空瓶刺激心理应激法建立大鼠血管内皮损伤模型的评价

目的评价空瓶刺激心理应激法建立的大鼠血管内皮损伤模型,为心理应激与血管内皮细胞(VEC)损伤关系的研究提供实验工具。方法将16只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组各8只,两组第1周每天早晚9点定时喂水10 min;第8～21天,对照组(群居饲养)早晚9点依然定时饮水10 min,模型组(孤独饲养)早晚9点按随机表给予空瓶刺激或喂水10 min,两组均按体质量腹腔注射生理盐水(200 g/mL)2次/d。用旷场实验观察大鼠行为学变化;放射免疫法检测血浆皮质醇(COR),ELISA法检测血浆肾上腺素(Adr),硝酸还原酶法检测血浆一氧化氮(NO),放射免疫计数法检测血浆内皮素(ET)、6-酮-前列环素F1α(6-Keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2),化学比色法检测血浆Adr代谢产物H2O2,高效液相色谱法检测血浆甲胺(MA)及甲醛(FA);采用透射电镜观察VEC超微结构。结果与对照组比较,模型组大鼠行为学垂直得分、水平得分及总分均增高(P均<0.05),血浆COR、Adr、ET、TXB2、H2O2、MA、FA水平升高(P均<0.05),NO、6-Keto-PGF1α水平降低(P均<0.05),NO/ET、6-Keto-PGF1α/TXB2值均下降(P均<0.05)。透射电镜显示,模型组VEC的线粒体嵴模糊,部分线粒体出现空泡;对照组VEC线粒体结构完整,嵴清晰、排列紧密。结论空瓶刺激心理应激能够造成VEC功能和结构的损伤,此造模方法可用于心理应激、VEC损伤与保护的相关研究。

知母水煎剂对空瓶刺激诱发的慢性情绪应激的干预作用

目的:研究知母水煎剂对空瓶刺激诱发的大鼠慢性情绪应激的干预作用。方法:采用空瓶刺激法造成大鼠慢性情绪应激模型,利用行为学观察法观察应激后大鼠的攻击、探究、修饰行为的变化;用动物秤分别于实验前、刺激第7天、刺激第14天称量大鼠体质量观察体质量增长情况;利用酶联免疫吸附法测定应激大鼠皮质酮含量。结果:应激后的大鼠攻击及修饰行为频繁,体质量增长减少,大鼠皮质酮含量显著增高;而干预组与模型组相比攻击及修饰行为显著下降,体质量增长显著增多,血清皮质酮含量显著降低。结论:知母水煎剂对空瓶刺激诱发的慢性情绪应激的大鼠有干预作用。

空瓶刺激诱导的慢性情绪应激对单胺类递质的影响与四逆散有效组分干预作用的研究

目的:从神经内分泌学的角度探讨空瓶刺激诱导的慢性情绪应激发生的机制及四逆散有效组分对其干预作用。方法:建立空瓶刺激大鼠应激模型,通过血液皮质酮含量的测定及行为学实验评估大鼠情绪应激状态,并测定大鼠全脑主要单胺类神经递质含量变化,通过对四逆散有效组分的干预作用的观察,探讨中药有效组分的作用机理。结果:四逆散有效组分能改善慢性情绪应激所引起的大鼠行为学改变,并对全脑各单胺神经递质有不同的调节作用。结论:四逆散有效组分可对空瓶刺激诱导的慢性情绪应激模型动物的行为学表现进行调节,并使全脑各单胺神经递质含量呈现不同变化趋势,提示其对慢性情绪应激具有一定的内在调节作用。

四逆散有效组分拮抗空瓶刺激所致大鼠慢性情绪应激的作用

目的:探讨四逆散有效组分拮抗慢性情绪应激大鼠的作用。方法:利用连续21 d空瓶刺激所致大鼠慢性情绪应激模型,观察四逆散有效组分(450 mg/kg/day,连续21 d)对模型大鼠的体重、行为学、血清皮质酮含量及大鼠海马组织病变的影响。结果:四逆散有效组分能够有效拮抗空瓶刺激诱导的大鼠慢性情绪应激反应,表现为大鼠体重明显升高、攻击和探究行为减少、修饰行为增加、皮质酮含量降低、改善情绪应激导致的海马损伤。结论:四逆散有效组分可能是通过抑制皮质酮的含量升高,减少海马损伤而发挥其拮抗慢性情绪应激的作用。

不确定空瓶刺激联合亚氨基二丙腈建立多发抽动共患焦虑大鼠模型的评价

目的验证不确定空瓶刺激联合亚氨基二丙腈（IDPN）腹腔注射是否可成为模拟多发性抽动症（偈）共患焦虑的一种动物实验模型。方法按随机数字表法，将3周龄雄性SD大鼠随机分为空白对照组（空白组）、单纯TS组（佟组）、单纯焦虑组（焦虑组）、TS共患焦虑组（共患组），每组12只；空白组腹腔注射生理盐水7d，TS组腹腔注射IDPN250mg／kg7d，焦虑组给予不确定空瓶刺激3周，共患组在腹腔注射IDPN同时给予不确定空瓶刺激，3周结束后测定各组大鼠的刻板运动、高架十字迷宫、旷场的行为学变化，并用高效液相色谱法检测纹状体、海马的单胺类神经递质含量。结果刻板运动结果测试显示，TS组刻板运动评分最高[（3．28±0．13）分]，空白组及焦虑组评分最低（0分），各组间差异有统计学意义（P〈0．01）。高架十字迷宫测试显示，共患组[（21．33±11．35）％]及焦虑组[（17．68±16．89）％]OE／TE值明显下降，低于空白组[（73．24±19．33）％]及TS组[（61．43±21．84）％]（P〈0．01）。旷场测试结果显示，共患组[（15．22±9．87）分]、焦虑组[（11．17±10．76）分]较空白组[（41．86±33．30）分]及Ts组[（48．83±17．65）分]降低（P〈0．01），共患组和焦虑组两者之间比较，差异无统计学意义。纹状体单胺类神经递质测试显示，5-羟吲哚乙酸（HIAA）共患组含量最高[（0．03±0．00）ng／mg]，TS组及焦虑组[（0．02±0．00）ng／mg]均较空白组[（0．01±0．00）ng／mg]升高（P〈0．01）。而多巴胺（DA）的测定显示，共患组含量最高[（0．03±0．00）ng／mg]，共患组、TS组[（0．02±0．00）ng／mg]、焦虑组[（0．02±0．00）ng／mg]高于空白组[（0．01±0．00）ng／mg]（P〈0．01）。5-HT的表达在组间差异最明显，焦虑组[（0．011±0．001）ng／mg]与共患组[（0．014±0．002）ng／mg]比较，差异均有统计学意义（P〈0．01），而高香草酸（HVA）的表达，三个模型组[（0．05±0．00）ng/mg]均高于空白组[（O．02±0．00）ng／mg]（P〈0．01）。3，4-二羟基苯乙酸（DOPAC）的表达，TS组[（0．23±0．02）ng／mg]高于空白组[（0．16±0．01）ng／mg]及共患组[（0．16±0．02）ng／mg]（P〈0．01）。海马单胺类神经递质测试显示，5-HT共患组含量最高[（0．14±0．02）ng／mg]，其次是焦虑组[（0．1±0．03）ng／mg]和TS组[（0．07±0．04）ng／mg]，均高于空白组[（0．04±0．03）ng／mg]（P〈0．05，P〈0．01）。共患组与TS组及焦虑组差异也有统计学意义（P〈0．01）。HIAA、HVA的表达，共患组[（0．44±0．04，0．01±0．00）ng／mg]、TS组[（0．46±0．15，0．01±0．01）ng／mg]和焦虑组[（0．46±0．08，0．01±0．00）ng／mg]均高于空白组[（0．21±0．10，0±0）ng／mg]（P〈0．05，P〈0．01）。结论本研究印证了该模型的可靠性，是研究TS共患焦虑较为理想的动物模型，可供后续研究应用。

不确定性空瓶饮水刺激法和束缚应激法建立小鼠焦虑模型及比较

目的通过比较不确定性空瓶饮水刺激法和束缚应激法诱发小鼠产生焦虑样情绪,筛选一种重复性好、刺激性小且易于操作的方法建立小鼠焦虑模型,为寻找合适的抗焦虑药物的药效学评价模型提供实验依据。方法 SPF级雄性C57BL/6J小鼠采用不确定性空瓶饮水刺激法建立小鼠焦虑模型,实验分为自由饮水组、定时饮水组、生理应激组和空瓶刺激组,每组8只。自由饮水组小鼠全天自由进食饮水;定时饮水组小鼠每天固定2个时间点、间隔12 h,每次饮水10 min;在相同的时间点,生理应激组小鼠每天确保1次饮水10 min,另一次既不给水也不给空瓶;空瓶刺激组小鼠每天饮水时间随机给予1次或2次空瓶进行刺激,共计饮水12次,空瓶16次;实验持续14 d。采用束缚应激法建立小鼠焦虑模型,实验分为正常对照组和束缚应激组,每组8只。正常对照组小鼠正常饲养,束缚应激组小鼠于每天早上9∶00头朝离心管的底部束缚在管内,第1天束缚2 h,随后每天束缚时间延长2 h,直至每天8 h,连续21 d。小鼠在空瓶刺激7和14 d后或束缚应激7,14和21 d后观察体质量的变化。造模结束后,通过旷场实验检测小鼠自主活动和探索行为,高架十字迷宫实验检测小鼠进入开放臂的次数和在开放臂内停留时间;采用ELISA测定束缚应激21 d后小鼠血浆皮质酮(CORT)水平和海马组织中5-羟色胺(5-HT)含量。结果不确定性空瓶饮水刺激法:与自由饮水组相比,定时饮水组小鼠在开放臂内停留时间显著下降(P<0.05);与定时饮水组相比,空瓶刺激7 d后,小鼠体质量显著下降(P<0.05),其他各项行为学指标无明显变化。束缚应激法:与正常对照组相比,束缚应激14 d后,小鼠体质量显著降低(P<0.05),小鼠的自主活动和探索行为无明显变化,进入开放臂的次数和在开放臂内停留时间均显著下降(P<0.05);束缚应激21 d后,小鼠体质量显著降低(P<0.05),血浆CORT含量和海马组织中5-HT含量显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论不确定性空瓶饮水刺激法建立小鼠焦虑模型的稳定性和敏感性欠佳,不可控因素较多,刺激14 d未成功建立小鼠焦虑模型。束缚应激14 d可成功建立小鼠焦虑模型,其机制可能与下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱和5-HT代谢异常相关。

慢性情绪应激对大鼠行为的影响及变化趋势

目的 探讨空瓶刺激诱发的慢性情绪应激对大鼠行为的影响及行为变化的趋势。方法 利用空瓶刺激诱发的情绪应激模型 ,观察记录连续 1 4次 ,每次 1 0分钟的情绪应激期间 ,情绪应激组、对照组和生理应激组大鼠的攻击性行为、探究行为和修饰行为的表现。结果 连续 1 4次的情绪应激期间 ,与对照组和生理应激组相比 ,情绪应激组大鼠均表现出明显的攻击性行为 ,而对照组和生理应激组大鼠仅表现为探究和修饰行为。结论 慢性情绪应激能诱发大鼠行为的明显改变 ,且这种行为的改变与应激频率无关。

四逆散有效组分对慢性情绪应激所致大鼠睡眠障碍的改善作用研究

目的:基于空瓶刺激诱发慢性情绪应激所致大鼠睡眠障碍模型来研究四逆散有效组分是通过调整负性情绪来实现其改善睡眠的作用。方法:SD大鼠24只,随机分为空白对照组、模型组、阳性药物对照地西泮组(1 mg/kg)、四逆散有效组分组(450 mg/kg),每组6只。以空瓶刺激法建立情绪应激模型。在模型复制的第2周开始灌胃给药,共灌胃7 d。观察四逆散有效组分对慢性情绪应激大鼠的攻击行为、睡眠时间、睡眠-觉醒节律,全脑TNF-α含量的影响。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠的攻击行为显著增多(P<0.01),全天睡眠时间显著减少(P<0.05),全脑TNF-α水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,四逆散有效组分可使攻击行为显著减少(P<0.05),全天睡眠时间显著增多(P<0.05),全脑TNF-α水平显著增高(P<0.05)。结论:四逆散有效组分可通过改善负性情绪来实现其改善睡眠的作用,对全脑TNF-α水平的调节可能是其作用的机制之一。

情绪应激体液免疫调节作用的影响因素

以给予经定时喂水训练大鼠空瓶刺激为情绪性心理应激源 ,研究了应激源给予的频率及抗原免疫前或后给予应激刺激等因素对此情绪应激体液免疫调节作用的影响。结果表明 ,特异性抗原OVA免疫前 3次 ,每次 30分钟的情绪应激刺激不影响大鼠的抗OVA抗体水平和脾脏指数 ;抗原免疫后 ,同样频率和持续时间的情绪应激能一定程度地降低体液免疫功能 ;而抗原免疫后 14次 ,每次 10分钟的情绪应激刺激则显著降低大鼠的抗OVA抗体水平和脾脏指数。该研究证实 ,抗原免疫后、反复多次的情绪应激刺激能显著抑制大鼠的原发性体液免疫功能。

舒郁宁心汤对焦虑大鼠行为及血清神经肽和皮质酮水平的影响

目的观察中药舒郁宁心汤对动物孤养加不确定性空瓶刺激焦虑大鼠模型的行为学变化以及血清神经肽(NPY)、皮质酮(CORT)含量的变化的影响。方法大鼠随机分为正常对照组、空瓶应激焦虑模型组、地西泮治疗组、舒郁宁心汤小剂量治疗组、舒郁宁心汤大剂量治疗组。采用不确定性空瓶应激刺激的方法建立大鼠焦虑的模型,空瓶刺激的第2周开始进行大鼠给药,连续用药7 d;然后观察大鼠空瓶刺激时探究、修饰和攻击行为的变化,以及血清神经肽、皮质酮含量的变化。结果模型组大鼠的攻击行为、探究行为明显增加,修饰行为明显减少,与对照组比差异有统计学意义(P<0.01)。舒郁宁心汤干预后大鼠的探究和攻击行为明显减少,修饰行为明显增加,与模型组比差异有统计学意义(P<0.05)。空瓶应激模型组大鼠血清NPY、CORT含量比正常对照组明显升高(P<0.05);大剂量舒郁宁心汤干预后大鼠血清NPY、CORT含量明显降低,与模型组比差异有统计学意义(P<0.05)。结论舒郁宁心汤具有抗焦虑作用,其作用机理与降低血清NPY、CORT的含量有关。

慢性心理应激对大鼠睡眠时相的影响

目的:研究慢性心理应激模型对大鼠睡眠时相的影响。方法:以空瓶刺激慢性心理应激模型,结合大鼠皮层脑电图描记与分析,观察其对大鼠睡眠时相的影响。结果:空瓶刺激诱发的慢性心理应激可以明显减少大鼠睡眠SW S2期,相对延长SW S1期,减少总睡眠时间。结论:慢性心理应激可以引发大鼠的睡眠障碍。