免疫检查点T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域、人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的分析免疫检查点T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)、人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2(HHLA2)在子宫内膜癌(EC)中的表达及临床意义。方法选取2017年9月至2019年10月唐山市妇幼保健院收治的120例的EC患者作为研究对象,收集其的EC组织和癌旁正常组织。检测EC组织和癌旁正常组织VISTA、HHLA2的表达;采用Spearman分析免疫检查点VISTA、HHLA2的相关性;Kaplan-Meier分析VISTA、HHLA2与预后的关系;Cox回归分析影响EC患者预后的危险因素。结果EC组织中VISTA、HHLA2阳性表达率显著高于正常癌旁组织(P<0.05)。Spearman相关性结果显示EC组织中VISTA与HHLA2表达呈正相关性(r=0.587,P<0.05)。EC组织中VISTA、HHLA2表达与临床病理特征有关(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线结果显示VISTA阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(χ^(2)=11.864,P<0.05),HHLA2阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(χ^(2)=4.975,P<0.05)。Cox回归分析结果显示VISTA和HHLA2是影响EC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论免疫检查点VISTA、HHLA2在EC中高表达,其是影响EC预后的危险因素,二者可能是有价值的预后标志物。

术前血清V-set和免疫球蛋白结构域4以及长链非编码核糖核酸SBF2反义RNA1与肾结石患者经皮肾镜取石术后急性肾损伤的关系

目的探讨术前血清V-set和免疫球蛋白结构域4(VSIG4)以及长链非编码核糖核酸(LncRNA)SBF2反义RNA1(SBF2-AS1)与肾结石患者经皮肾镜取石术后急性肾损伤(AKI)的关系。方法选择2020年1月—2022年12月本院收治的109例肾结石患者为研究对象。术前检测患者血清VSIG4水平以及LncRNA SBF2-AS1表达,术后记录AKI发生情况。采用多因素Logistic回归模型分析肾结石患者经皮肾镜取石术后发生AKI的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析VSIG4、LncRNA SBF2-AS1预测肾结石患者经皮肾镜取石术后发生AKI的价值。结果本研究中,术后发生AKI者16例。AKI组血清VSIG4水平低于非AKI组,LncRNA SBF2-AS1表达高于非AKI组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,术前高尿酸水平、术前高LncRNA SBF2-AS1表达、较长的手术时间、术中低血压是肾结石患者经皮肾镜取石术后发生AKI的危险因素(P<0.05),术前高VSIG4水平是保护因素(P<0.05)。术前血清VSIG4、LncRNA SBF2-AS1水平预测肾结石患者经皮肾镜术后发生AKI的曲线下面积分别为0.854、0.705,二者联合预测的曲线下面积为0.948,大于各指标单独预测(Z=1.995、2.958,P<0.05)。结论肾结石患者术前血清VSIG4水平降低、LncRNA SBF2-AS1表达增高与经皮肾镜取石术后AKI的发生有关,联合检测术前VSIG4、LncRNA SBF2-AS1可预测术后AKI的发生风险。

穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型PLA2R和IgG4表达的影响及其机制

目的 分析穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型磷脂酶A2受体(Phospholipase A2 receptor, PLA2R)和免疫球蛋白G亚型4(Immunoglobulin G4,IgG4)表达影响及可能机制。方法 将40只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、贝那普利组(10 mg/kg)、低和高剂量穿山龙总皂苷组(80 mg/kg、160 mg/kg),每组各8只。除对照组,其余4组采用Border法制备膜性肾病模型,造模成功后,贝那普利组灌胃给予贝那普利10 mg/(kg·d),低和高剂量穿山龙总皂苷组分别灌胃给予穿山龙总皂苷80 mg/(kg·d)、160 mg/(kg·d),对照组、模型组灌胃给予10 ml/(kg·d)生理盐水。连续给药4周后,检测24 h尿蛋白、白蛋白、血肌酐、血尿素氮、尿酸水平,HE染色观察肾脏病理改变,蛋白免疫印迹法检测肾脏中M型PLA2R、IgG4、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphorylated phosphoinositide 3-kinase, p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶(Heme oxygenase-1,HO-1)表达水平。结果 与模型组比较,贝那普利组、高剂量穿山龙总皂苷组白蛋白水平明显升高,血肌酐、血尿素氮、尿酸水平明显降低,差异均有统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,贝那普利组、低剂量和高剂量穿山龙总皂苷组肾脏病理改变明显改善,24 h尿蛋白水平及肾脏中M型PLA2R、IgG4、p-PI3K、p-AKT表达水平明显降低,肾脏中Nrf2、HO-1表达水平明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与降低PLA2R、IgG4表达,抑制PI3K/AKT通路,激活Nrf2/HO-1通路相关。

T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域蛋白-3对2型糖尿病患者T细胞的影响

目的:探讨T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域蛋白-3对2型糖尿病患者T细胞的影响。方法:本研究选取2017年1月至2019年12月在本院的内分泌科就诊的72例2型糖尿病患者作为糖尿病组,并选取同期进行健康体检者55例作为对照组;比较两组患者T细胞中TIM-3的表达情况,比较两组患者T细胞分泌细胞因子相对量。进一步比较通过抗TIM-3抗体刺激对糖尿病患者T细胞分泌细胞因子相对量。结果:糖尿病组患者的CD4+T和CD8+T细胞的含量均显著高于对照组(P<0.05);糖尿病组患者的INF-γ、IL-4、IL-17、IL-22含量低于对照组,糖尿病组患者的IL-10、IL-35含量高于对照组(P<0.05);糖尿病组TNF-α、INF-γ的含量低于对照组(P<0.05);经过抗TIM-3抗体刺激后的糖尿病患者INF-γ、IL-17、IL-22的含量明显高于无抗体刺激糖尿病患者,经过抗TIM-3抗体刺激后糖尿病患者IL-35的含量明显低于无抗体刺激糖尿病患者(P<0.05);经过抗TIM-3抗体刺激后的糖尿病患者TNF-α、INF-γ含量高于无抗体刺激糖尿病患者(P<0.05)。结论:在糖尿病患者中T细胞表面黏蛋白结构域蛋白-3的表达量提升,含量会升高,其可能参与了2型糖尿病患者T细胞调节功能。

免疫球蛋白联合低分子肝素对绒毛膜下血肿患者疗效及妊娠结局的影响

目的 探讨绒毛膜下血肿患者应用免疫球蛋白联合低分子肝素的临床效果及对妊娠结局的影响。方法 选取2019年1月—2021年4月在赣州市妇幼保健院接受治疗的64例绒毛膜下血肿患者作为研究对象,按治疗方式的不同分为研究组与常规组,各32例。其中常规组采用常规治疗方式,研究组在常规组基础上采用免疫球蛋白联合低分子肝素治疗方式。比较分析2组患者临床疗效、治疗前后孕激素水平、辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)细胞因子变化和妊娠结局。结果 研究组总有效率较常规组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。2组患者治疗后血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、血人绒毛膜促性腺激素(β-h CG)水平较治疗前高,且研究组较常规组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。2组患者治疗后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)水平较治疗前均有明显变化,且研究组TNF-α水平较常规组低,IL-4水平较常规组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。研究组正常分娩率较常规组高,不良妊娠结局发生率较常规组低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 在绒毛膜下血肿患者治疗中采用免疫球蛋白联合低分子肝素治疗效果确切,不仅可以改善孕激素水平与调节Th1/Th2细胞因子平衡,还能预防或减少不良妊娠结局的发生。

伴免疫球蛋白G沉积原发性膜性肾病病人疾病缓解影响因素及与肾小球免疫球蛋白G4表达强度的关系研究

目的 探讨伴免疫球蛋白(Ig)G沉积原发性膜性肾病(PMN)病人疾病缓解影响因素及与肾小球IgG4表达强度的关系。方法 回顾性纳入山西省运城市中心医院2014年1月至2020年1月收治伴IgG沉积PMN病人共500例,根据有无IgG4表达和表达强度分组,分析临床病理及随访预后资料,采用单因素和多因素Cox回归模型评价伴IgG沉积PMN病人疾病缓解独立影响因素。结果 阳性组24 h尿蛋白量和M型磷脂酶A2受体(PLA2R)表达强度比例显著高于阴性组(P<0.05);弱阳性组、中阳性组及强阳性组血浆白蛋白、IgG1强度比例及IgA强度比例比较差异有统计学意义(P<0.05);阴性组、弱阳性组、中阳性组及强阳性组随访3个月(30.0%比17.3%比15.9%比9.5%)和6个月(38.4%比30.6%比26.5%比13.0%)累积缓解率比较差异有统计学意义(P<0.05);Cox回归模型单因素和多因素分析结果显示,IgG4阳性高强度、男性、基线高24 h尿蛋白量均是伴IgG沉积PMN病人疾病未缓解独立危险因素[RR=1.33,95%CI:(1.05,1.61);RR=1.80,95%CI:(1.17,3.04);RR=1.51,95%CI:(1.09,2.80)。P<0.05]。结论 伴IgG沉积PMN病人疾病缓解效果与IgG4表达强度、性别及基线24 h尿蛋白量密切相关;而肾小球IgG4表达强度可作为PMN治疗反应性潜在评估指标加以应用。

尿免疫球蛋白和补体C_2测定对肾脏病变程度和激素治疗效果的判定

我院自1987年8月至1988年2月,对40例肾脏病人测定尿免疫球蛋自、C3来判断肾小球病损程度及激素治疗效果的研究,现报告于下。资料与方法肾病组40例中男37人、女3人,年龄12～70岁。正常人组20名,男12、女8例,年龄19～40岁。急性肾炎4例,慢性肾炎普通型2例、高血压型2例,肾病综合征Ⅰ型18例、Ⅱ型11例,狼疮性肾炎3例。有18例作了肾活检,其中系膜增生性肾炎9例,膜增生性肾炎2例,膜性肾炎3例,硬化性肾炎3例,微小病变性肾病1例。

HCG联合免疫球蛋白对溴隐亭致大鼠流产模型Th1/Th2型细胞因子的影响

目的:研究人绒毛膜促性腺激素(HCG)联合免疫球蛋白对溴隐亭致大鼠流产模型蜕膜局部Th1/Th2型细胞因子及妊娠结局的影响。方法:采用孕第6、7、8天大鼠皮下注射溴隐亭0.3mg/kg,诱导SD大鼠流产模型,随机分为4组:即流产模型(A)组、HCG(B)组、HCG联合免疫球蛋白(IVIG)(C)组及正常妊娠(D)组,每组10只,妊娠第14天麻醉处死并观察妊娠结局,取胚胎吸收邻近的蜕膜研磨并裂解,离心后取上清液,-80℃保存。ELISA方法测定标本中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)以及白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果:胚胎吸收率:A组明显高于其余3组,B组高于C、D组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Th1型细胞因子(TNF-α、IFN-γ)水平,A组明显高于其余3组,差异有统计学意义(P<0.05);Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)水平,A组明显低于其余3组,差异均有统计学意义(P<0.05);IL-10细胞因子水平,B、D组低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HCG联合免疫球蛋白通过上调蜕膜局部细胞因子IL-10水平来改善胚胎发育,二者具有协同作用。

干扰素α-1b联合人免疫球蛋白对EB病毒感染患儿临床疗效及对Ficolin-3、SH2D1A表达的影响

目的探讨人干扰素α-1b联合人免疫球蛋白治疗对EB病毒(EBV)感染患儿的临床疗效,并分析治疗对患儿免疫相关分子纤维胶凝蛋白3(Ficolin-3)、SH2结构域蛋白1A(SH2D1A)表达水平的影响。方法选取2018年2月至2020年2月在该院就诊的130例EBV感染患儿,根据治疗方式不同分为对照组和观察组,各65例。对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗基础上给予人干扰素α-1b联合人免疫球蛋白治疗。观察两组发热、咳嗽、颈淋巴结肿大、咽痛、扁桃体肿大和肝脾肿大各项临床症状的消失时间。采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测治疗前后两组EBV-DNA、EBV-CA-IgM及EBV-NA-IgG,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组治疗前后血清Ficolin-3、SH2D1A水平,以及外周血白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,采用流式细胞术分析T淋巴细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)。结果观察组发热、咳嗽、颈淋巴结肿大、咽痛、扁桃体肿大和肝脾肿大各项临床症状的消失或消退时间均短于对照组,EBV-DNA、EBV-CA-IgM转阴率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组Ficolin-3、SH2D1A、IL-6、IL-8、TNF-α、CD8^(+)明显降低,CD3^(+)、CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前Ficolin-3、SH2D1A表达与IL-6、IL-8、TNF-α及CD8^(+)呈正相关(r=0.478、0.454、0.503,0.462、0.443、0.511,均P<0.001),与CD3^(+)、CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(r=-0.567、-0.402、-0.423,-0.477、-0.416、-0.409,均P<0.001)。观察组治疗总有效率[96.92%(63/65)]明显高于对照组[80.00%(52/65)],差异有统计学意义(χ^(2)=9.119,P=0.003),并发症总发生率[9.23%(6/65)]明显低于对照组[30.77%(20/65)],差异有统计学意义(χ^(2)=9.423,P=0.002)。结论干扰素α-1b联合人免疫球蛋白能降低EBV感染患儿Ficolin-3、SH2D1A水平,改善患儿免疫功能,提高治疗有效性。

子宫内膜癌组织中TMIGD2,TIGIT的表达及其与临床病理特征的相关性研究

目的 探究子宫内膜癌(endometrial cancinoma)组织中跨膜和免疫球蛋白结构域2(transmembrane and immunoglobulin domain containing 2,TMIGD2),T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序结构域(T cell immunoglobulin and immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif domain,TIGIT)的表达及其与临床病理特征的相关性。方法 选取2016年1月~2018年1月唐山市妇幼保健院诊治的160例子宫内膜癌患者为研究对象,收集患者术中切除的癌组织及癌旁正常组织。采用免疫组织化学法检测TMIGD2和TIGIT表达;对子宫内膜癌组织TMIGD2与TIGIT表达的相关性进行Spearman法分析;采用Kaplan-Meier法分析子宫内膜癌组织TMIGD2,TIGIT表达与患者预后的关系;影响子宫内膜癌患者预后的因素采用COX回归分析。结果 子宫内膜癌组织中TMIGD2和TIGIT高表达率分别为67.50%,72.50%,均高于癌旁正常组织的21.25%,17.50%,差异具有统计学意义(χ^(2)=69.327,97.778,均P<0.01)。子宫内膜癌组织中TMIGD2与TIGIT表达呈正相关(r=0.422,P<0.001);TMIGD2,TIGIT表达水平均与FIGO分期、淋巴结转移、肌层浸润程度有关(χ^(2)=6.565~20.323,均P<0.05);TMIGD2,TIGIT低表达组患者生存率分别为82.69%,86.36%,均高于高表达组的38.89%,40.52%,差异具有统计学意义(χ^(2)=27.045,26.925,均P<0.05)。COX回归分析发现FIGO分期高(HR=2.716,P=0.04)、TMIGD2高表达(HR=1.314,P=0.02)、TIGIT高表达(HR=4.303,P<0.01)是子宫内膜癌患者预后的危险因素。结论 子宫内膜癌组织中TMIGD2和TIGIT均高表达,均与临床病理特征及预后有密切联系。

抗PLA2R IgG4抗体、PLA2R IgG4/IgG比值在原发性膜性肾病预后评估中的价值

目的探讨抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)IgG4抗体和PLA2R IgG4/IgG比值在原发性膜性肾病(PMN)预后评估中的价值。方法选取2020年1月—2022年12月南阳市第一人民医院PMN患者58例。收集所有患者临床资料、病理检查资料和实验室检测结果,并检测血清抗PLA2R IgG抗体和抗PLA2R IgG4抗体水平,计算PLA2R IgG4/IgG比值。对所有患者随访3~24个月,根据疗效分为缓解组和未缓解组。采用Pearson/Spearman相关分析评估各项指标之间的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同抗PLA2R IgG4抗体水平和PLA2R IgG4/IgG比值PMN患者的缓解率。结果58例PMN患者中,PLA2R阳性51例(87.93%)、阴性7例(12.07%)。PLA2R阳性组血清抗PLA2R IgG抗体、抗PLA2R IgG4抗体和PLA2R IgG4/IgG比值均高于PLA2R阴性组。PLA2R与抗PLA2R IgG4抗体、PLA2R IgG4/IgG比值均呈正相关(r值分别为0.276、0.283,P<0.05)。抗PLA2R IgG抗体和抗PLA2R IgG4抗体与红细胞沉降率(ESR)均呈正相关(r值分别为0.283、0.382,P<0.05),抗PLA2R IgG抗体和抗PLA2R IgG4抗体与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)均呈负相关(r值分别为-0.379、-0.425,P<0.05)。抗PLA2R IgG4抗体与抗PLA2R IgG抗体、PLA2R IgG4/IgG比值均呈正相关(r值分别为0.817、0.714,P<0.001)。规范治疗并随访3~24个月后,58例PMN患者中有41例(70.69%)缓解。缓解组治疗前、后24 h尿蛋白、抗PLA2R IgG抗体、抗PLA2R IgG4抗体和PLA2R IgG4/IgG比值均显著低于未缓解组(P<0.05)。治疗后缓解组血清白蛋白(Alb)水平高于未缓解组(P<0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,低抗PLA2R IgG4抗体水平和低PLA2R IgG4/IgG比值PMN患者缓解率分别高于高抗PLA2R IgG4抗体水平和高PLA2R IgG4/IgG比值PMN患者。结论抗PLA2R IgG4抗体和PLA2R IgG4/IgG比值或可作为评估PMN疗效的指标。

Tim-3靶向CD8^(+)T细胞调控TNF-α/IL-22/STAT3通路加重自身免疫性肝炎小鼠肝损伤

目的探讨T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域的分子3(Tim-3)对自身免疫性肝炎的影响及其机制。方法将30只小鼠分为3组:空白组、模型组和模型+Tim-3阻断组,每组10只。空白组经尾静脉注射等量生理盐水;其他两组尾静脉注射10 mg/kg刀豆蛋白A建立自身免疫性肝炎小鼠模型,造模成功后模型+Tim-3阻断组每天1次腹腔内注射液0.1 mg/ml Tim-3,注射7 d。HE染色观察小鼠肝组织病理改变;全自动生化分析仪检测血清AST、ALT;酶联免疫吸附法检测IL-22、TNF-α水平;流式细胞分析肝组织CD8^(+)T比例;实时荧光定量PCR检测肝组织Tim-3、IL-22、TNF-α、STAT3 mRNA相对表达;免疫印迹试验检测肝组织Tim-3、IL-22、TNF-α、STAT3蛋白相对表达。结果空白组小鼠肝脏组织无变化;模型组肝脏组织大面积性肝炎;模型+Tim-3阻断组见显著淋巴细胞浸润与大量空泡。与空白组比较,模型组和模型+Tim-3阻断组ALT、AST、IL-22、TNF-α水平均升高(P<0.05);与模型组相比,模型+Tim-3阻断组ALT、AST、IL-22、TNF-α水平升高(P<0.05)。与空白组比较,模型组和模型+Tim-3阻断组CD8^(+)T细胞比例表达均升高(P<0.05);与模型组相比,模型+Tim-3阻断组CD8^(+)T细胞比例下降(P<0.05)。与空白组比较,模型组和模型+Tim-3阻断组Tim-3、IL-22、TNFα、STAT3 mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05);与模型组相比,模型+Tim-3阻断组Tim-3 mRNA及蛋白表达下降,IL-22、TNF-α、STAT3 mRNA及蛋白相对表达升高(P<0.05)。结论阻断Tim-3可下调CD8^(+)T细胞,促进TNF-α/IL-22/STAT3炎症信号表达,加重自身免疫性肝炎小鼠肝损伤。

免疫球蛋白样结构域受体2缺失加重缺血再灌注诱导的肾纤维化

目的探究免疫球蛋白样结构域受体2(immunoglobulin-like domain-containing receptor 2,Ildr2)在缺血再灌注诱导肾纤维化中的作用。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Ildr2敲除小鼠(KO组),其对照组为野生型小鼠(WT组)。通过夹闭左侧肾蒂构建单侧肾脏缺血再灌注(unilateral renal ischemia reperfusion,UIR)模型(UIR组),造模后分为KO-UIR组和WT-UIR组;假手术小鼠(Sham组)不进行缺血处理。采用肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐水平;二乙酰肟比色法检测血尿素氮水平;酶联免疫吸附测定法检测尿白蛋白水平,计算尿白蛋白/肌酐比值;HE、PAS及MASSON染色检测肾组织炎性细胞浸润情况和纤维化程度;实时荧光定量PCR检测Ildr2,肾损伤相关分子中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)和肾损伤分子1(kidney injury molecule-1,KIM-1),纤维化标志分子Ⅰ型胶原α1(type 1 collagenα-1,Col1α1)、纤维连接蛋白1(fibronectin,Fn1)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),以及炎症相关分子巨噬细胞标志物F4/80、单核细胞趋化因子1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的mRNA表达水平。免疫荧光和Western印迹法检测Ildr2、Col1α1及α-SMA的蛋白表达水平。结果(1)实时荧光定量PCR和Western印迹结果显示UIR组Ildr2 mRNA和蛋白表达水平均显著低于Sham组(均P<0.05)。(2)KO组和WT组小鼠体重、血清肌酐、血尿素氮、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白及三酰甘油等的差异均无统计学意义(均P>0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,KO组和WT组NGAL、KIM-1、α-SMA、Col1α1、CTGF、Fn1、MCP-1及F4/80 mRNA表达水平的差异均无统计学意义(均P>0.05)。组织学染色结果显示KO组和WT组均无炎性细胞浸润异常及间质纤维化。(3)与WT-UIR组相比,KO-UIR组血清肌酐和血尿素氮水平均较高(均P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,KO-UIR组NGAL、F4/80、MCP-1、Col1α1、α-SMA和CTGF mRNA表达水平均显著高于WT-UIR组(均P<0.05)。免疫荧光和Western印迹结果显示,KO-UIR组Col1α1和α-SMA蛋白表达水平均明显高于WT-UIR组(均P<0.05)。组织学染色结果显示,相比WT-UIR组,KO-UIR组小鼠炎性细胞浸润明显较多,间质胶原纤维沉积和小管损伤较重。结论正常生理状态下Ildr2敲除未引起小鼠表型变化。Ildr2在UIR损伤中起到调控作用,Ildr2缺失导致UIR诱导的肾纤维化程度加重。

自释放型细胞内运输载体LCA2结构域的制备与性质研究

蛋白质药物因其独特的优势,在疾病的预防和治疗中发挥了极其重要的作用,但大分子的特性阻碍了其对细胞内靶标的作用。现有的递送策略中,由于穿膜肽更适用于临床研究和治疗,逐渐成为了递送蛋白质药物最主要的工具。因此,开发安全有效的穿膜肽类递送载体对于生物医药的基础研究及临床应用具有重要意义。文中设计了一种基于肠毒素A2结构域的自释放型细胞内运输载体LCA2,该载体由连接子Linker、自释放酶敏感位点Cs与穿膜结构域LTA2三部分组成,并以荧光蛋白质mCherry为模式蛋白质来检测该载体的性质。电泳结果显示,从含有pET24a(+)-ma2重组质粒的工程菌中获得了高纯度的mCherry-LCA2融合蛋白,且低浓度的胰蛋白酶就可将mCherry从LCA2上有效地分离;荧光显微镜下观察到LCA2能将与之连接的mCherry运输到不同类型的细胞中,流式细胞仪检测到LCA2的运输能力具有一定的细胞差异性。共聚焦显微镜的荧光分析和Western印迹结果显示,LCA2载体将mCherry蛋白运送到内质网,Cs酶敏感位点被切开,模式蛋白质mCherry与LCA2分离并释放到细胞内。CCK-8结果表明,在给药剂量5~40μg/mL范围内,细胞增殖活力未见显著变化。上述结果证明,LCA2是一种安全有效的自释放型递送载体,能够将活性蛋白质或蛋白质药物运输到细胞内质网并释放。

黄芪甲苷Ⅳ通过抑制TIM-1信号通路增加Th1/Th2细胞比率减轻IgA肾病小鼠肾损伤

目的探讨黄芪甲苷Ⅳ(AS-Ⅳ)对IgA肾病(IgAN)小鼠1型辅助T(Th1)细胞/Th2细胞平衡的影响及其可能作用机制。方法建立BALB/c小鼠IgAN模型,造模成功小鼠随机分为模型组、AS-Ⅳ低、中和高剂量组各10只,另设对照组10只。AS-Ⅳ低、中和高剂量组小鼠灌胃(12.5、25、50)mg/kg AS-Ⅳ混悬液(生理盐水配制),对照组及模型组给予等量生理盐水。测定各组小鼠24 h尿蛋白(24 hUPr)含量和尿红细胞计数;测定小鼠血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)和白蛋白(ALB)水平;ELISA检测各组小鼠血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和IL-10水平;流式细胞术检测小鼠外周血Th1/Th2细胞比率;HE染色观察小鼠肾组织病理学变化;反转录PCR和Western blot法分别检测小鼠肾组织中T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域1(TIM-1)、Toll样受体4(TLR4)的mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较,AS-Ⅳ低、中和高剂量组小鼠第12周和第15周尿红细胞计数、24 h UPr、BUN、Scr、IL-4、IL-10水平、Th2细胞比例、TIM-1与TLR4 mRNA和蛋白表达水平均明显降低,ALB、IFN-γ水平、Th1细胞比例和Th1/Th2细胞比率升高,且以AS-Ⅳ高剂量组效果最佳。结论AS-Ⅳ通过抑制TIM-1信号通路,增加Th1/Th2细胞比率,抑制炎症反应,减轻IgAN小鼠肾损伤。

血清PLA2RAb阳性与阴性原发性膜性肾病患者实验室相关指标比较

目的比较血清M型磷脂酶A2受体抗体(PLA2RAb)阳性与PLA2RAb阴性原发性膜性肾病(PMN)患者的实验室相关指标的差异。方法选取PMN患者97例,根据血清PLA2RAb表达情况分为PLA2RAb阳性组72例、PLA2RAb阴性组25例。采集两组患者空腹静脉血2 m L,检测血清肾功能指标,包括尿素氮(BUN)、肌酐(Cr);血脂指标,包括胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、脂蛋白a[Lp(a)];总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、Ig G4。留取24 h尿标本,采用邻苯三酚红钼法检测24 h尿蛋白。比较两组肾功能、血脂、蛋白、Ig G4及24 h尿蛋白指标。分析PLA2RAb阳性组血清PLA2RAb水平与各检验指标的相关性,分析两组Ig G4与24 h尿蛋白水平的相关性。多元线性回归模型分析PLA2RAb、Ig G4与24 h尿蛋白的关系,PLA2RAb联合Ig G4对PLA2RAb阳性PMN患者病情评估的价值。结果PLA2RAb阳性组LDL、Lp(a)、Ig G4及24 h尿蛋白均高于PLA2RAb阴性组(P <0. 05或0. 01)。PLA2RAb阳性组血清PLA2RAb水平与TP(r=-0. 398,P <0. 01)、ALB(r=-0. 426,P <0. 01)均呈负相关,与血清CHO(r=0. 393,P <0. 01)、Ig G4(r=0. 449,P <0. 01)及24 h尿蛋白(r=0. 588,P <0. 01)呈正相关。PLA2RAb阳性组Ig G4与24 h尿蛋白水平呈正相关(r=0.449,P <0.01); PLA2RAb阴性组Ig G4与24 h尿蛋白水平无相关性(r=0. 263,P=0. 203)。PLA2RAb(P <0. 01)及Ig G4(P <0.05)均与PLA2RAb阳性组24 h尿蛋白有线性回归关系。结论 PLA2RAb阳性的PMN患者脂类代谢异常及肾脏受损程度较PLA2RAb阴性者重,血清Ig G4较PLA2RAb阴性者高; PLA2RAb阳性患者血清Ig G4与24 h尿蛋白呈正相关,但PLA2RAb阴性患者血清Ig G4则与24 h尿蛋白无关。

M型磷脂酶A_2受体和Ig G4与特发性膜性肾病相关性的研究进展

膜性肾病是一种自身免疫性肾小球疾病,是成人肾病综合征的主要病因。肾组织M型磷脂酶A_2受体(PLA_2R)及其血清中的特异性抗体是特发性膜性肾病(IMN)的特异性标志物,其可以将IMN与继发性膜性肾病和其他肾小球疾病区分开。目前,尚缺乏诊断及指导IMN治疗的有效标志物,而肾组织PLA_2R抗原及血清中的PLA_2R抗体和Ig G4抗体与IMN的发病密切相关,三者不仅与机体的免疫反应有关,还易于检测。未来,三者联合应用可能对IMN的诊断、疾病进程判断、预测疾病预后及指导IMN的治疗有一定作用。

血清抗M型磷脂酶A2受体抗体对特发性膜性肾病的诊断价值

目的研究血清抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体对特发性膜性肾病(IMN)的诊断价值。方法回顾性分析纳入2019年1月至2020年1月于南京医科大学第一附属医院住院且经肾组织活检病理诊断为IMN的75例患者的临床资料(IMN组)。另选取同期于本院住院治疗的35例非IMN的肾病患者(非IMN组)。采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测患者血清抗PLA2R抗体。比较2组血清、尿液中生化及免疫指标水平。结果IMN组血清抗PLA2R抗体水平、抗PLA2R抗体阳性率均显著高于非IMN组[101.30(56.90,219.80)RU/ml比1.36(1.24,8.34)RU/ml、97.3%(73/75)比11.4%(4/35)](均P<0.01)。2组血清总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白G(IgG)、IgA、IgM、补体C3、补体C4及尿游离κ轻链、尿游离λ轻链水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。Pearson相关性分析结果显示,IMN患者血清抗PLA2R抗体与尿游离κ轻链、尿游离λ轻链呈正相关(均P<0.01)。结论IMN患者血清抗PLA2R抗体水平显著升高,可作为特异性血清学检测指标。

免疫检查点B7-H3、TMIGD2、HHLA2在卵巢癌中表达及临床意义

目的探讨免疫检查点B7-H3、跨膜和免疫球蛋白结构域2(TMIGD2)、人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法选取84例卵巢癌患者为研究对象,检测患者治疗前后血清B7-H3水平,以及癌组织B7-H3、TMIGD2、HHLA2蛋白表达情况。采用logistic回归分析组织B7-H3、TMIGD2、HHLA2蛋白表达与卵巢癌不同病理特征的关系。结果卵巢癌患者治疗后血清B7-H3水平低于治疗前(P<0.05);不同FIGO分期、肿瘤大小及是否出现淋巴结转移、腹腔积液的卵巢癌患者血清B7-H3水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌组织B7-H3、TMIGD2、HHLA2蛋白阳性表达分别为67例(79.8%)、55例(65.5%)、56例(66.7%)。不同FIGO分期、是否存在腹腔积液的卵巢癌患者癌组织B7-H3表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05);不同FIGO分期、肿瘤大小及是否存在淋巴结转移、腹腔积液卵巢癌患者组织TMIGD2、HHLA2表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论免疫检查点B7-H3、TMIGD2、HHLA2的表达与卵巢癌患者病情进展相关,可作为卵巢癌治疗及预测的新靶点。