TACI融合蛋白对免疫球蛋白A肾病大鼠肾脏损害的影响

目的探讨TACI融合蛋白(TACI-Ig)对免疫球蛋白A肾病(IgAN)大鼠肾脏损害的影响。方法将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、TACI-Ig组、药物对照组,每组6只。正常对照组、模型组给予生理盐水,TACI-Ig组给予TACI-Ig(14.36 mg/kg),药物对照组给予醋酸泼尼松(5 mg/kg)。比较各组24 h尿蛋白定量(24h-UP)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、低半乳糖基化IgA1(Gd-IgA1)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子κB(NF-κB)蛋白及mRNA水平,并分析TACI-Ig对肾脏损害的影响。结果模型组24h-UP水平显著高于正常对照组,而TACI-Ig组、药物对照组24h-UP水平显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。TACI-Ig组血清Scr水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。TACI-Ig组、药物对照组肾组织系膜区沉积免疫复合体的增加受到明显抑制。模型组大鼠血清Gd-IgA1水平高于正常对照组,而低于TACI-Ig组,差异有统计学意义(P<0.01)。药物对照组血清Gd-IgA1水平低于模型组,而高于TACI-Ig组,差异有统计学意义(P<0.01)。TACI-Ig组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。药物对照组TLR4、MyD88蛋白水平高于TACI-Ig组,差异有统计学意义(P<0.05)。TACI-Ig组TLR4、MyD88、NF-κB mRNA水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TACI-Ig对IgAN有较好的治疗作用,可改善IgAN大鼠肾功能,抑制肾小球系膜基质扩张和系膜细胞增殖。

胃癌组织中增殖诱导配体及其受体蛋白的表达

目的:观察人胃癌组织中增殖诱导配体(APRIL)及其受体B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)蛋白的表达,探讨其临床意义。方法:采用H-E染色及间接免疫荧光法检测30例人胃癌组织及相应10例癌旁正常组织APRIL及其受体蛋白的表达,分析不同临床病理特征下相关蛋白的表达水平。结果:胃癌组织中APRIL阳性率为86.7%,癌旁正常组织未见表达(P<0.05);而其受体BCMA和TACI蛋白表达水平在两者间无统计学差异。胃癌组织不同临床病理指标下(肿瘤大小、分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移和TNM临床分期),APRIL及其受体蛋白表达无统计学差异。结论:胃癌组织中APRIL蛋白高表达,检测其表达水平可能有助于胃癌的早期诊断。

增殖诱导配体及其受体在肿瘤组织中的表达与意义

目的分析增殖诱导配体(APRIL)及其受体在不同肿瘤组织及肿瘤发展不同阶段的表达水平,探讨其与肿瘤发生的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测了临床上常见肿瘤组织中APRIL及其受体mRNA的准确含量,并以靶基因和内参mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果肿瘤组织中APRIL表达水平显著高于交界组织(P<0.05)和正常组织(P<0.05);B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)表达水平在大多数肿瘤组织中与正常组织差异无统计学意义(P>0.05);APRIL在肠上皮化生、异型增生和胃癌组织中表达水平显著高于正常黏膜(P<0.05),APRIL在胃癌组织中表达水平显著高于肠上皮化生和异型增生(P<0.05),而其受体BCMA和TACI在各组胃黏膜病变之间表达水平无统计学意义(P>0.05)。结论成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;APRIL在肿瘤发生、发展过程中可能起了重要作用;除了BCMA和TACI外,肿瘤细胞可能还存在APRIL未知受体;APRIL在某些类型肿瘤有可能主要是通过受体BCMA而不是TACI发挥作用。

人B细胞激活因子受体-TACI基因表达水平的定量测定

目的:建立实时荧光定量PCR(RFQPCR)检测人B细胞激活因子受体TACImRNA含量的方法,初步探讨健康献血员外周血单个核细胞(PBMC)中TACImRNA表达水平。方法:在TACI基因高保守区设计特异性的引物和荧光探针,PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中TACImRNA准确含量,并以TACImRNA和β2MmRNA含量的比值作为评价TACI表达水平的指标。结果:本法检测TACImRNA含量的线性范围为109～101pg/ml,批内和批间重复性测定的CV分别为2.97%～9.32%和5.86%～10.29%。40例健康献血员样本的PBMC中35例(87.5%)检出有TACImRNA表达,范围为0.02～2.11。结论:成功建立RFQPCR检测TACImRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性,为进一步探讨TACImRNA表达水平与自身免疫性疾病发病机制之间的关系奠定了基础。

APRIL及其受体在消化系肿瘤中的作用研究进展

增殖诱导配体(APRIL)是肿瘤坏死因子家族新成员,在体内外具有促进细胞增殖和调节免疫系统的作用,与肿瘤的发生和免疫性疾病有着密切的关系。APRIL存在三种受体,即BCMA、TACI和HSPG。APRIL/受体可能通过NF-κB途径完成信号转导。APRIL及其受体在消化系肿瘤中异常高表达,而在正常组织中低表达或不表达,它们有望成为消化系肿瘤诊断和治疗的新靶点。

增殖诱导配体基因在桥本氏病中的表达

目的探讨APRIL基因在桥本氏病中的表达与临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)技术检测正常甲状腺组织和桥本氏病甲状腺组织中APRILmRNA的表达情况,分析APRIL基因表达与桥本氏病之间的关系。结果APRILmRNA在桥本氏病甲状腺组织中的表达水平显著高于正常甲状腺组织(P<0.01)。结论APRIL基因在桥本氏病的发生过程中可能具有重要功能。

扶正抑瘤方对肝癌组织中增殖诱导配体及其受体表达的影响

目的探讨扶正抑瘤方对增殖诱导配体(APRIL)及其受体蛋白表达的影响。方法取40只SPF-VAF级雄性ICR小鼠随机分为5组:空白组、模型组、5-氟尿嘧啶组、5-氟尿嘧啶加扶正抑瘤方组、5-氟尿嘧啶加胸腺肽组,制备皮下移植瘤动物模型,采用免疫组织化学法检测5组APRIL及其受体的蛋白表达情况。结果 APRIL及其受体在肝癌组织的阳性表达部位不同,APRIL主要表达于癌细胞胞质,而其受体穿膜蛋白活化物(TACI)则散在表达于胞核及胞质;与模型组比较,其它给药组的阳性分布范围明显缩小(P<0.05)。5-氟尿嘧啶组、5-氟尿嘧啶加中药组、5-氟尿嘧啶加胸腺肽组与模型组比较,表达强度显著降低(P<0.01),其中以5-氟尿嘧啶加扶正抑瘤方组疗效最好(P<0.01)。结论 APRIL及其受体是扶正抑瘤方辅助治疗肝癌的分子靶标之一。

原发性胆汁性肝硬化患者外周血APRIL/BLyS系统及其受体的表达

目的探讨APRIL(TNFSF13)/BLyS系统及其受体BCMA、TACI(TNFRSF13B)、BAFFR mRNA在原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血中的表达水平和临床意义。方法设计特异性引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,检测42例正常健康者和56例PBC患者外周血中APRIL/BLyS系统及其受体mRNA表达水平,采用全自动酶标仪测定PBC患者血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α的水平。结果与健康者相比,PBC患者外周血中APRIL(TN-FSF13)、BLyS及其受体BCMA的mRNA表达均升高(P<0.01),APRIL、BLySmRNA表达与BCMAmRNA表达有显著相关性(分别为r=0.607和r=0.559,P均<0.01);APRILmRNA的表达与血清IL-2水平正相关(r=0.462,P<0.05),BLySmRNA的表达与血清IL-2、TNF-α水平正相关(r=0.740,P<0.01;r=0.381,P<0.05)。结论 APRIL/BLyS系统及其受体可能参与PBC的疾病进程,为监控PBC的病情和有效治疗提供了新的途径。

胃癌组织中增殖诱导配体及受体mRNAs表达的病理意义

目的:研究增殖诱导配体(APRIL)及其受体B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)mRNA在胃癌组织中的表达,探讨其临床病理意义。方法:收集30例胃癌及相应癌旁正常胃组织,应用RT-PCR检测APRIL及其受体mRNA在胃癌及癌旁胃组织中的表达。结果:胃癌组织APRILmRNA阳性率(26/30,86.7%)明显高于癌旁胃正常组织(12/30,40.0%)(P<0.01),在肠型胃癌中的表达高于弥漫型(P<0.05),与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等因素无关。而APRIL受体mRNA在胃癌和癌旁胃组织中表达无差异,且与年龄、性别、病灶大小、临床病理分型和分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等因素无关。结论:APRILmRNA异常表达与肠型胃癌的发生有关,检测其表达水平有助于胃癌的早期诊断。

人B细胞激活因子受体-TACI基因表达水平定量标准品的构建

目的建立一种简便快速TACI基因表达水平定量标准品的制备方法。方法PCR扩增目的片段,与T载体连接,转化感受态大肠杆菌DH5α,阳性克隆进行测序证实,质粒用核酸分析仪准确定量,进行10倍系列稀释,作为标准品。结果:标准品建立的标准曲线有较大的线性范围,批内和批间重复性也较好,且可长期稳定保存。结论:使用质粒标准品对样本中TACI基因表达水平测定是一种可行的办法。

B淋巴细胞刺激因子／增殖诱导配体在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及意义

B淋巴细胞刺激因子（BAFF）和增殖诱导配体（APRIL）为Ⅱ型跨膜蛋白，均属于肿瘤坏死因子超家族中的成员，二者具有高度的同源性，共用两个配体：B细胞成熟抗原（BCMA）和穿膜蛋白活化物（TACI）。BAFF／APRIL参与B淋巴细胞的存活、增殖、发育和分化，