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蛋白质SDS-PAGE用于螺旋藻分类及突变体鉴定的研究 被引量:11
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作者 汪志平 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期583-587,共5页
螺旋藻经 SDS提取液提取、冷丙酮沉降后 ,所得蛋白液的 SDS- PAGE图谱条带清晰、信息量大 .对 10株钝顶螺旋藻 ( Spirulina platensis) Sp- D,Sp- Y,Sp- F,Sp- J,Sp- B,Sp- S,Sp- K,Sp- Z及其突变体 Sp- Z( S)和 Sp- Z( L) ,所作的蛋白... 螺旋藻经 SDS提取液提取、冷丙酮沉降后 ,所得蛋白液的 SDS- PAGE图谱条带清晰、信息量大 .对 10株钝顶螺旋藻 ( Spirulina platensis) Sp- D,Sp- Y,Sp- F,Sp- J,Sp- B,Sp- S,Sp- K,Sp- Z及其突变体 Sp- Z( S)和 Sp- Z( L) ,所作的蛋白质 SDS- PAGE分析表明 :1螺旋藻蛋白带主要分布于 31k D和188k D之间 ,各藻株间的蛋白质电泳图谱的特征性差异可作为螺旋藻分类的主要依据之一 ;2 Sp- J和Sp- K的蛋白质 SDS- PAGE图谱相同 ,从而进一步确证它们属同一品系 ;3 Sp- Z( S)和 Sp- Z( L )作为Sp- Z的耐盐突变体和直线形突变体 ,分别比 Sp- Z多 1条 4 3k D及少 1条 87k D的蛋白带 ;4所建立的蛋白质 SDS- 展开更多
关键词 螺旋藻 蛋白质 分类 突变体鉴定 SDS-PAGE
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拟南芥AtGDPD-like6和AtGDPD-like7基因突变体鉴定
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作者 王志凤 程玉祥 李淑娟 《安徽农业科学》 CAS 2014年第7期1921-1922,1938,共3页
[目的]鉴定拟南芥AtGDPD-like6和AtGDPD-like7基因的突变体。[方法]以拟南芥AtGDPD-like6和AtGDPD-like7为研究对象,采用半定量RT-PCR法进行分析,并用3引物PCR扩增法进行筛选和鉴定。[结果]各得到2个AtGDPD-like6和AtGDPD-like67独立T-... [目的]鉴定拟南芥AtGDPD-like6和AtGDPD-like7基因的突变体。[方法]以拟南芥AtGDPD-like6和AtGDPD-like7为研究对象,采用半定量RT-PCR法进行分析,并用3引物PCR扩增法进行筛选和鉴定。[结果]各得到2个AtGDPD-like6和AtGDPD-like67独立T-DNA插入纯合突变体。半定量RT-PCR结果显示,4个纯合突变体中目标基因转录表达都被完全敲除。[结论]AtGDPDlike6和AtGDPD-like67突变体材料的获得为生理功能的鉴定提供了反向遗传学材料。 展开更多
关键词 拟南芥 AtGDPD-like6 AtGDPD-like7 T-DNA 突变体鉴定
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理化诱变小豆京农6号突变体的鉴定 被引量:8
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作者 佟星 赵波 +7 位作者 金文林 曾潮武 刘红霞 吴宝美 濮绍京 陈学珍 潘金豹 万平 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期565-573,共9页
选用小豆品种京农6号种子,分别采用甲基磺酸乙酯(EMS)(0.5%、0.9%和1.4%处理12h和24h)、电子束(100、300、600Gy)、60Co-γ(400Gy)诱变处理,将处理后的种子种于大田,鉴定后代植株性状的变异。观察表明,EMS诱变的变异类型最丰富、60Co-... 选用小豆品种京农6号种子,分别采用甲基磺酸乙酯(EMS)(0.5%、0.9%和1.4%处理12h和24h)、电子束(100、300、600Gy)、60Co-γ(400Gy)诱变处理,将处理后的种子种于大田,鉴定后代植株性状的变异。观察表明,EMS诱变的变异类型最丰富、60Co-γ射线次之、电子束产生的变异类型较单一。EMS处理小豆以浓度0.5%和0.9%处理24h为宜;0.5%EMS处理的粒色和荚色变异突出,有鲜红、黄白、绿白粒色和黑荚、褐荚、黑褐荚变异;0.9%处理的叶形变异突出,有鸡爪叶、剑叶、肾形叶、小密叶等突变类型;电子束诱变后,M2变异率分别为4.09%、3.64%和2.22%。400Gy60Co-γ射线处理种子,后代变异率为7.23%。通过两年的鉴定筛选,获得937个EMS诱变M3代株系,934个60Co-γ射线和电子束诱变M2代株系,已得到株高、叶形、叶色、粒形、粒色、荚色、无分枝、多分枝、叶簇生、分枝簇生、光叶、蔓生、有限结荚习性、株型松散、育性、成熟特性等突变体材料1490份。本研究为小豆基因遗传分析、基因定位与克隆及其进一步的基因功能分析奠定了基础,为小豆育种提供了重要的材料。 展开更多
关键词 小豆 理化诱变 突变体 突变体鉴定
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拟南芥突变体 myc234 的鉴定及其对MeJA的敏感性分析
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作者 王炎炎 张斐斐 +7 位作者 熊娟 王雪 李林 冯蕊 董萍萍 殷伊君 张有刚 周丽娟 《昆明学院学报》 2022年第3期100-104,共5页
AtMYC 2(AT1G32640),AtMYC 3(AT5G46760)和AtMYC 4(AT4G17880)是茉莉酸信号通路的关键基因,为深入挖掘其在拟南芥生长发育及防御反应中的基因功能,结合PCR,SqRT-PCR半定量及测序技术对myc 2,myc 3和myc 4单突变体杂交获得的F3代植株进... AtMYC 2(AT1G32640),AtMYC 3(AT5G46760)和AtMYC 4(AT4G17880)是茉莉酸信号通路的关键基因,为深入挖掘其在拟南芥生长发育及防御反应中的基因功能,结合PCR,SqRT-PCR半定量及测序技术对myc 2,myc 3和myc 4单突变体杂交获得的F3代植株进行鉴定,获得7株纯合三突变体.并以40μmol/L MeJA对纯合三突材料进行外源处理.结果显示,野生型根长较对照降低39.57%,而myc 234纯合三突变体较对照升高3.54%,说明其对MeJA敏感度明显下降.研究结果可为myc 234突变体的鉴定以及对茉莉酸敏感性相关研究提供试验依据及材料. 展开更多
关键词 拟南芥 MYC转录因子 突变体鉴定 MeJA敏感性 茉莉酸 SqRT-PCR
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一个响应土壤缺铁拟南芥突变体的分离及鉴定 被引量:2
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作者 王立赛 闫明科 +2 位作者 王晗 沈仁芳 兰平 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期476-484,共9页
铁是植物生长发育必需的一种微量元素,但土壤中植物可直接吸收利用的铁非常有限。缺铁使作物生长受限,进而影响人类膳食健康。植物体能通过调节一系列基因表达的变化来响应缺铁,但目前对该调控系统的研究仍不完善。CYP82C4(At4g31940)... 铁是植物生长发育必需的一种微量元素,但土壤中植物可直接吸收利用的铁非常有限。缺铁使作物生长受限,进而影响人类膳食健康。植物体能通过调节一系列基因表达的变化来响应缺铁,但目前对该调控系统的研究仍不完善。CYP82C4(At4g31940)是拟南芥中一个强烈响应缺铁的基因,本研究将该基因启动子连接荧光素酶报告基因LUC2并转化拟南芥,进一步通过T-DNA的随机插入得到一个响应缺铁信号的突变体库。通过筛选该突变体库,我们得到一个强烈响应缺铁信号的突变体L22-8。和野生型相比,正常情况下L22-8地上部和地下部内源CYP82C4的表达量均显著增高,缺铁处理时其地上部表达量仍高于野生型,而地下部则不明显。定量结果显示FIT,b HLH38和b HLH39等植物铁代谢关键调控因子的表达发生了显著变化,但植株总铁、磷、锌的含量较野生型并没有显著区别,表明该T-DNA的插入虽影响了植株对缺铁胁迫的响应,但并不直接作用于植株对铁的吸收、转运上。反向PCR分析发现L22-8的T-DNA插入位点位于At3g51950和At3g51960之间,且这两个基因的转录表达在正常生长条件下均略低于Col-0。基因互补实验发现仅有At3g51960能部分互补L22-8的荧光信号,表明At3g51960基因的表达影响了CYP82C4对缺铁胁迫的响应。本研究进一步扩展了植物吸收利用铁的分子调控网络,为分子育种工作提供了指导。 展开更多
关键词 土壤 缺铁胁迫 突变体鉴定 分子调控
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梁山慈竹体细胞突变体No.30的SLAF-seq特异分子标记分析 被引量:3
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作者 王懋林 胡尚连 +4 位作者 曹颍 卢学琴 徐刚 黄艳 龙志坚 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期596-602,共7页
梁山慈竹体细胞突变体No.30具有纤维素含量高、木质素含量高、纤维细胞长度长、纤维细胞长宽比大等特点,但由于梁山慈竹主要进行无性繁殖,不易获得纯合植株,突变体No.30的分子水平鉴定一直无法进行,严重阻碍了该突变体的推广利用。对梁... 梁山慈竹体细胞突变体No.30具有纤维素含量高、木质素含量高、纤维细胞长度长、纤维细胞长宽比大等特点,但由于梁山慈竹主要进行无性繁殖,不易获得纯合植株,突变体No.30的分子水平鉴定一直无法进行,严重阻碍了该突变体的推广利用。对梁山慈竹体细胞突变体No.30进行特异分子标记分析,并初步确定其性状变异来源。本研究利用SLAF-seq技术分别对突变体No.30以及同地区野生型梁山慈竹群体(CK)的基因组进行了简化基因组测序。经过了测序、建库、多态位点开发、特异多态性位点筛选等过程,最后对特异多态性位点筛选结果进行注释分析。结果发现突变体No.30的GC含量、纯合InDel数低于野生型梁山慈竹,而检测到的InDel总数以及杂合InDel数却高于野生群体。对SLAF-seq得到的InDel、SNP位点进行特异性筛选,获得了突变体No.30中稳定存在的特异InDel/SNP标签,包括特异C-T转换9381个、特异A-G转换9472个、特异InDel 329个。通过对这些特异SLAF标签进行注释,发现有6个特异SNP标签和1个特异InDel与纤维素合成相关,3个特异SNP标签与木质素合成相关,以及4个特异SNP标签和1个特异InDel与纤维细胞形态建成有关。这些结果表明突变体No.30在体细胞培养的过程中在基因组水平上发生了突变,并初步确定了其性状变异来源。但这些特异SLAF标签与突变体No.30在纤维素含量和木质素含量,以及纤维细胞发育等性状方面的相关性仍需进一步验证。 展开更多
关键词 克隆植物 突变体鉴定 梁山慈竹 体细胞无性系 SLAF-seq
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辐射诱变技术在木本植物育种中的应用及展望 被引量:5
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作者 李玉岭 毛欣 +4 位作者 张元帅 董元夫 刘翠兰 段春华 毛秀红 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期12-30,共19页
辐射诱变在植物新品种选育和遗传改良方面发挥着重要作用,为了能让育种者迅速准确地了解辐射诱变在木本植物上的研究和应用情况,基于CNKI数据库及国际原子能机构官网,对2000年后公开发表的木本植物辐射诱变相关文献及公布的辐射突变品... 辐射诱变在植物新品种选育和遗传改良方面发挥着重要作用,为了能让育种者迅速准确地了解辐射诱变在木本植物上的研究和应用情况,基于CNKI数据库及国际原子能机构官网,对2000年后公开发表的木本植物辐射诱变相关文献及公布的辐射突变品种进行统计分析。从辐射诱变机理、辐射效率影响因素、突变体鉴定及分离、辐射育种成果等方面进行了全面梳理。结果表明,目前辐射诱变机理尚不清楚,影响辐射效率的关键因素为适宜辐照剂量,其次要关注辐射材料的敏感差异性,鉴定突变体的方法有表型、生理生化、细胞学及分子标记,组合使用结果更准确。总体上木本植物辐射育成品种数量不多,并且有逐渐下降的趋势。该文综述了木本植物辐射育种研究进展,对辐射诱变存在的难题诸如诱变效率低、突变方向不易控制、突变体鉴定方法不完善等给出相应解决方案,并对今后辐射育种研究方向进行了展望,旨在为植物辐射育种研究及应用提供借鉴和新思路。 展开更多
关键词 辐射诱变 木本植物 育种 突变 诱变机理 突变体鉴定
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一种适用于批量筛选和鉴定拟南芥突变体的快速DNA提取方法 被引量:5
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作者 张小明 勾雪娇 +3 位作者 梁鹏 林华明 赵晋洁 胡向阳 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期909-915,共7页
DNA提取是拟南芥突变体筛选与鉴定中的关键环节.结合拟南芥突变体鉴定特点和DNA提取特点,对传统SDS法进行改良,摸索出一种简易、快速且经济的DNA提取方法,并将其应用到突变体的批量筛选与鉴定中.使用该方法可在常温下利用10 mg左右拟南... DNA提取是拟南芥突变体筛选与鉴定中的关键环节.结合拟南芥突变体鉴定特点和DNA提取特点,对传统SDS法进行改良,摸索出一种简易、快速且经济的DNA提取方法,并将其应用到突变体的批量筛选与鉴定中.使用该方法可在常温下利用10 mg左右拟南芥叶片,以少量试剂,通过简单的研磨、离心、沉降和干燥等步骤便能快速制备用于PCR检测的DNA模板.采用本方法个人提取单个样品DNA仅需15 min左右,每小时可提取48个DNA样品.研究采用该方法提取了一批待鉴定拟南芥突变体的DNA样品,利用三引物法对其进行PCR检测,结果表明DNA样品浓度高,DNA扩增成功率高达100%,且目的条带清晰,说明该方法在拟南芥突变体的筛选和鉴定上是适用且高效的,可广泛应用于实验室突变体库的建立. 展开更多
关键词 拟南芥 DNA提取 SDS抽提法 聚合酶链式反应 突变体鉴定 三引物法
原文传递
RAPD技术及在桃种质研究中的应用概况 被引量:1
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作者 杨英军 张开春 李学强 《陕西林业科技》 北大核心 2000年第4期67-70,共4页
阐述了 RAPD技术的原理及在桃种质的突变体鉴定、基因标记、连锁图谱构建种品种鉴定等方面的应用 ,并评价了研究桃的遗传对认识所有果树遗传规律的意义。
关键词 RAPD 种质研究 突变体鉴定 基因标记 连锁谱
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前沿科技
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《新疆农垦科技》 2018年第6期60-60,共1页
中科院新成果变废为宝挖掘玉米秸秆的潜在价中国科学研究人员,通过特色资源筛选、突变体鉴定和木质素基因工程调控等工作,在木质素合成调控机制研究方面取得新成果,获得了多个细胞壁降解效率髙,且具有潜在商业化利用价值的植物资源.(... 中科院新成果变废为宝挖掘玉米秸秆的潜在价中国科学研究人员,通过特色资源筛选、突变体鉴定和木质素基因工程调控等工作,在木质素合成调控机制研究方面取得新成果,获得了多个细胞壁降解效率髙,且具有潜在商业化利用价值的植物资源.(光明网) 展开更多
关键词 木质素合成 科技 调控机制 突变体鉴定 研究人员 玉米秸秆 变废为宝 资源筛选
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Rice leaf inclination2, a VIN3-1ike protein, regulates leaf angle through modulating cell division of the collar 被引量:36
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作者 Shu-Qing Zhao Jiang Hu +2 位作者 Long-Biao Guo Qian Qian Hong-Wei Xue 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第8期935-947,共13页
As an important agronomic trait, inclination of leaves is crucial Ior crop architecture and grain yields. 10 understand the molecular mechanism controlling rice leaf angles, one rice leaf inclination2 (1c2, three all... As an important agronomic trait, inclination of leaves is crucial Ior crop architecture and grain yields. 10 understand the molecular mechanism controlling rice leaf angles, one rice leaf inclination2 (1c2, three alleles) mutant was identified and functionally characterized. Compared to wild-type plants, lc2 mutants have enlarged leaf angles due to increased cell division in the adaxial epidermis of lamina joint. The LC2 gene was isolated through positional cloning, and encodes a vernalization insensitive 3-like protein. Complementary expression of LC2 reversed the enlarged leaf angles of lc2 plants, confirming its role in controlling leaf inclination. LC2 is mainly expressed in the lamina joint during leaf development, and particularly, is induced by the phytohormones abscisic acid, gibberellic acid, auxin, and brassinosteroids. LC2 is localized in the nucleus and defects of LC2 result in altered expression of cell division and hormone-responsive genes, indicating an important role of LC2 in regulating leaf inclination and mediating hormone effects. 展开更多
关键词 leaf inclination RICE VIN3-1ike protein cell division LC2
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Improvement of Wild Rice Oryza Longistaminata through Mutation Induction 被引量:1
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作者 Fousseyni Cisse Medoune Papa Khouma 《Journal of Food Science and Engineering》 2016年第2期82-89,共8页
Influence of a mutation to improve the undesirable traits (shattering, red caryopsis etc.) of wild rice O. longistaminata while preserving its useful genes by radiation 20 Kr gamma rays from 60Co was studied. The mu... Influence of a mutation to improve the undesirable traits (shattering, red caryopsis etc.) of wild rice O. longistaminata while preserving its useful genes by radiation 20 Kr gamma rays from 60Co was studied. The mutants issued this irradiation were crossed with the interspecific variety SIK385-b-42-28-28 (O. glaberrima x O. sativa). Irradiation followed by crossing with interspecific variety generated a large genetic variability, in the subsequent generations, in plant height, maturity, non-shattering grain, kernel colour, spikelets fertility, panicle length, and grain size. This has resulted in identification of promising mutants which possess all the traits of cultivated rice O. sativa (white kernel, non-shattering grain, secondary branchies etc.). During 2012 rainy season, nineteen selected mutants from M5 and M7 generations were evaluated for yield potential in replicated trials at Longorola station. 展开更多
关键词 Wild rice Oryza longistaminata MUTAGENESIS mutants.
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