聚β-胡萝卜素聚合物的急性毒性试验、亚慢性毒性试验和致突变性试验

本试验旨在通过小鼠急性毒性试验、大鼠亚慢性毒性试验和小鼠致突变性试验对聚β-胡萝卜素聚合物进行安全性评价。急性毒性试验:将50只昆明小鼠随机分为5组,每组10只。测定聚β-胡萝卜素聚合物的半数致死量(LD_(50))和95%置信区间。亚慢性毒性试验:将80只无特定病原体(SPF)级SD大鼠随机分为4组,每组20只。低、中高剂量组分别灌胃100、250和500 mg/kg BW的聚β-胡萝卜素聚合物,对照组灌胃等体积的植物油,连续灌服30 d。测定大鼠生长性能、血液生理指标、血清生化指标、脏器指数及组织病理学。致突变性试验:将50只昆明小鼠随机分为5组,每组10只。依据本试验得出聚β-胡萝卜素聚合物的LD50,低、中、高剂量组分别灌胃282.5、565.0和1130.0 mg/kg BW的聚β-胡萝卜素聚合物,阴性对照组灌胃等体积的植物油,阳性对照组腹腔注射0.4 mL/kg环磷酰胺。测定嗜多染红细胞/红细胞比值和嗜多染红细胞微核率。结果表明:1)急性毒性试验中,聚β-胡萝卜素聚合物的LD_(50)为2260 mg/kg BW,95%置信区间为2067~2470 mg/kg BW。2)亚慢性毒性试验中,试验期间内大鼠精神食欲等状况良好。与对照组相比,低、中、高剂量组的雄性大鼠和高剂量组的雌性大鼠末重、平均日增重、平均日采食量极显著升高(P<0.01),料重比极显著降低(P<0.01)。中剂量组的雄性大鼠红细胞压积显著低于低剂量组(P<0.05),各组之间大鼠的其他血液生理指标和血清生化指标均无显著差异(P>0.05)。中、高剂量组的雌性大鼠肾脏指数显著低于对照组和低剂量组(P<0.05),各组之间大鼠的脏器重和其他脏器指数均无显著差异(P>0.05)。组织病理学检查表明各组大鼠心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏无明显病理变化。3)致突变性试验中,与阴性对照组相比,阳性对照组的雄性、雌性小鼠的嗜多染红细胞微核率极显著增加(P<0.01),低、中、高剂量组的雄性、雌性小鼠的嗜多染红细胞微核率均差异不显著(P>0.05)。由此可见,聚β-胡萝卜素聚合物无明显急性毒性、亚慢性毒性和致突变性。聚β-胡萝卜素聚合物可以提高大鼠的生长性能,可作为一种安全的饲料添加剂进一步开发利用。

N-亚硝基布美他尼SD大鼠体内致突变性风险研究

目的评价布美他尼杂质N-亚硝基布美他尼的体内致突变风险和肝细胞DNA损伤风险。方法SD大鼠随机分为6组,分别为:溶媒对照组(溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),N-亚硝胺布美他尼100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组,阳性对照组1[N-乙基-N-亚硝基脲(ENU),40 mg·kg^(-1)]、阳性对照组2[甲磺酸乙酯(EMS),200 mg·kg^(-1)]。2个阳性对照组均为每组6只动物,其余每组12只动物。大鼠连续14 d经口灌胃给予受试物N-亚硝胺布美他尼。首次给药后约14 d和约28 d后采集外周血用于Pig-a基因突变率检测,末次给药后约3 h取肝细胞开展彗星试验。结果试验期间给予N-亚硝基布美他尼未导致异常临床症状和动物体重及摄食量改变。100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组动物肝细胞平均tail%DNA值(平均数/中位数)分别为2.90±0.38/2.34±0.46、3.58±0.27/2.87±0.51、3.45±0.59/2.21±1.44,与溶媒对照组相应数值相比未见差异,且无明显剂量效应相关性。首次给药后14 d,100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组动物平均RBC^(CD59-)和RET^(CD59-)百万分之发生率(RBC^(CD59-)百万分之发生率/RET^(CD59-)百万分之发生率)分别为2.9±1.6/1.2±0.8、2.8±2.4/1.3±1.5、2.4±1.0/1.3±1.5;首次给药后28 d,100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组动物RBC^(CD59-)百万分之发生率/RET^(CD59-)百万分之发生率分别为5.1±1.5/2.2±0.6、4.3±1.5/3.5±3.6、4.8±2.4/2.5±2.7。上述数值与相同时间点溶媒对照组相比均未见差异,且经统计学分析未见剂量效应相关性。结论连续经口给予N-亚硝基布美他尼14 d,SD大鼠的最大耐受量高于1000 mg·kg^(-1),未检出外周血基因突变风险和肝细胞DNA损伤风险。研究数据可为药品中遗传毒性杂质的合理监管和含N-亚硝基杂质药物的安全使用提供数据支持。

低误差第二代测序技术应用于肿瘤研究和药物致突变性风险评价的进展

目的:探讨低误差第二代测序(next-generation sequencing,NGS)技术在肿瘤研究和药物致突变性评价领域的进展。方法:通过查阅文献、收集资料等方法,汇总近年来低误差NGS技术进展、优缺点以及在肿瘤研究和药物致突变性/致癌性评价的应用。结果:传统的NGS技术的背景误差率较高,限制其在低频率突变检测方面的应用。近年开发的多种低误差NGS技术(即校正测序错误的NGS,errorcorrected next-generation sequencing,ecNGS)可将NGS的检测误差率降低至10^(-7)~10^(-4)或甚至更低,满足肿瘤临床监测和指导用药的需求。此外,HiFi-Seq和PECC-Seq等技术的最低误差率可降低至10^(-8),可检出药物短期暴露导致的细胞/组织的超低频突变,有助于在药物研发早期评估其致癌性风险。结论:ecNGS技术目前处于开发阶段,尚未标准化,且未在临床、毒理学、风险评估领域推广应用。然而,该方法可直接检出肿瘤早期病变组织中的突变和药物诱导的组织/细胞突变,有望取代或补充现有的致突变性试验方法,纳入相关指导原则,成为药物早期遗传毒性、致癌性筛查的金标准。

甜味剂乙酰磺胺酸钾的致突变性评价

目的:评价甜味剂乙酰磺胺酸钾的致突变性。方法:细菌回复突变试验(Ames试验)计数各组回复突变菌落数,小鼠精原细胞染色体畸变试验观察各组染色体畸变类型并计算畸变率,小鼠骨髓红细胞微核试验计数各组红细胞微核发生率。结果:Ames试验显示,加或不加S9时,受试物各剂量组、溶剂对照组与空白对照组比较,两次检测各菌株的回复突变数均小于空白对照组2倍;小鼠精原细胞染色体畸变试验显示,受试物各剂量组精原细胞染色体畸变率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);小鼠骨髓红细胞微核试验显示,受试物各剂量组微核细胞率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:乙酰磺胺酸钾未见明显的致突变性。

乙烯利体内致突变性研究

为测定乙烯利对人体健康的影响,采用小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验分别检测了乙烯利对小鼠体细胞和生殖细胞的致突变性。3个实验组的微核发生率(6.13‰、9.13‰、11.25‰)与阴性对照组(2.88‰)比较,差异极显著(P<0.01),且存在一定的剂量-反应关系。各剂量组精子畸形率(39.6‰、50.4‰、49.6‰)与对照组(38.6‰)比较,中、高剂量组存在明显差异(P<0.05)。表明乙烯利对体细胞和生殖细胞有致突变性。

二氧化氯和液氯消毒饮用水致突变性的比较

本文运用国内外广泛应用的Ames试验,对二氧化氯与液氯消毒水样进行了致突变性的比较 结果表明,ClO_2消毒的水样未显示出致突变性,而液氯消毒的木样显示致突变性.研究结果为ClO_2在饮用水消毒中的应用提供了科学的依据.

Fe_3O_4及Fe_3O_4-Glu纳米颗粒的毒性和致突变性研究

[目的]研究直径约15nm的四氧化三铁纳米颗粒(nano_Fe3O4)、谷氨酸包覆的四氧化三铁纳米颗粒(nano_Fe3O4_Glu)的毒性及致突变性。[方法]①单次给药实验 :在以往急性毒性实验的基础上 ,对昆明种小鼠口服一次给药 ,分别得到nano_Fe3O4、nano_Fe3O4_Glu的最大耐受量。②小鼠骨髓细胞微核试验 :nano_Fe3O4 及nano_Fe3O4_Glu分别设150mg/kg、300mg/kg和600mg/kg 各三个剂量组 ,另设阴性对照组和环磷酰胺组 ,分别计算其微核率。③小鼠精子畸形试验 :两种受试物分别设150mg/kg、300mg/kg、600mg/kg三个剂量组及阴性对照组和环磷酰胺组 ,连续5d染毒 ,染毒后第35d处死 ,分别计算其精子畸形率。④体外CHL细胞染色体畸变试验 :nano_Fe3O4 设1.05μg/ml、2.10μg/ml、4.20μg/ml三个剂量组 ,nano_Fe3O4_Glu设30μg/ml、60μg/ml、120μg/ml三个剂量组 ,另设阴性、阳性对照组和空白对照组。在加S9mix和不加S9mix时 ,分别计算细胞染色体畸变率。[结果]两种受试物的小鼠经口染毒最大耐受量均大于600mg/kg ;小鼠骨髓细胞微核试验中两种受试物的微核率均低于2‰ ;小鼠精子畸形试验中 ,nano_Fe3O4 各剂量组小鼠精子畸形率均高于3.8% ,与阴性对照组比较有统计学差异 (P<0.01) ;体外CHL细胞染色体畸变试验中 ,在加与不加体外?

排油烟机收集油的致突变性研究

采集太原市居民厨房排油烟机收集盒内的油烟，采用Ａｍｅｓ试验、ＳＯＳ显色试验和小鼠骨髓微核试验，对其进行致突变性研究。结果表明：太原市居民烹调油烟物质具有致突变性，但因烹调油温在２５０℃以下，其致突变力比国内报导的略弱。

我国典型地区饮水中致突变性表征

报道上海、昆明、哈尔滨、沈阳、广州、武汉和深圳等城市自来水的致突变性特征，以及上述城市自来水厂源水及其氯化源水致突变性的比较研究。发现７城市自来水中均含有移码型直接致突变物。ＴＡ９８菌株是最敏感的监测菌株。另外，按水样比活性（ｒｅＶ／Ｌ）和浓集物比活性（ｒｅＶ／ｍｇ）为指标，则上海、昆明、哈尔滨、沈阳、广州和武汉等６城市自来水厂氯化源水对ＴＡ９８（Ｓ９）和ＴＡ１００（Ｓ９）２菌株的致突变性均明显地高于源水，上海市尤为突出。该结果也为研究饮水中氯化过程中有毒有机氯化物的生成机理而选择典型城市提供了科学依据。

抚仙湖无机污染物化学背景值及动物体内致突变性评定

为了比较抚仙湖不同区域的水质及其致突变性，从抚仙湖周围水域采取７个样点的水样。用电感耦合氩等离子发射光谱法对水样中的无机污染物作定性和定量分析。另外使用蝌蚪（Ｂｕｆｏｂｕｆｏａｎｄｒｅｗｓｉ）红细胞微核试验检测抚仙湖水样的致突变性。结果显示：禄冲采样点水样带有微核的红细胞率增高，表明这个点水样有致突变活性物质。

饮水中非挥发性有机污染物致突变性的防治对策

针对饮水致突变物的主要成因研究了减少饮水致突变活性的措施。结果表明：进厂源水生物膜预处理，可使致突变前体物，如藻、腐殖酸、总有机碳等含量分别减少６８．２％、２３．９％、３７．２％，使水厂加氯量减少５０％，最终使所制饮水的致突变件减少３ｏ％。改革加氯消毒方法可使饮水致突变活性降低，不同消毒剂所致致突变活性顺序为Ｃｌ_２＞ＣｌＯ_２＞Ｃｌ_２＋ＣｌＯ_２＞源水，Ｃｌ_２＋ＣｌＯ_２等量联合消毒优于单一加氯消毒法，既可提高所试甲型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒及大肠杆菌ｆ２噬菌体的灭活效果一至数倍；又可使饮水中ＣＨＣｌ_３，减少９１．５％－９６．５％，致突变活性减少２７．６％。

北京市大气PM10和PM2.5中多环芳烃组分的致突变性

目的研究北京市大气颗粒物中提取的多环芳烃组分的致突变性,并探讨采样点、粒径、季节对多环芳烃致突变活性的影响。方法于2005年7和12月从北京市工业区和商业区冬夏两季采集的可吸入颗粒物(PM10和PM2.5)样本中提取出多环芳烃。采用Ames试验检测该多环芳烃的致突变性。每个多环芳烃样本各设125、250和500μg/皿3个剂量,在加S9和不加S9条件下进行实验。结果受试多环芳烃组分在加S9和不加S9条件下均可引起TA98菌株发生回复突变增加,而且在加入活化系统S9后工业区样本的突变活性明显增加。随剂量增加,突变率升高,除部分低、中浓度组外,其他组的每皿回变菌落数为阴性对照的2倍或2倍以上;各组均存在明显的剂量-反应关系(P<0.01,P<0.05)。工业区多环芳烃样本的回变菌落数均高于商业区。冬季多环芳烃样本诱导的回变菌落数高于夏季样本。同剂量的PM2.5的多环芳烃样本诱导TA98菌株产生的回变菌落数大于PM10的多环芳烃样本。结论多环芳烃样本具有较强的致突变性并且以移码型突变为主。工业区多环芳烃样本主要是间接致突变物。工业区空气样本的多环芳烃组分的致突变性明显高于商业区。同剂量的PM2.5的多环芳烃组分的致突变性大于PM10。冬季颗粒物的多环芳烃组分的致突变性均比夏季组分致突变性强,并且商业区冬夏两季致突变性差异较工业区明显。

广州市不同粒径大气颗粒物有机提取物的致突变性研究

为了了解广州市大气气溶胶中不同粒径颗粒物中有机物的污染水平以及其对人体健康的影响 ,用 6段分级采样器分段采集 <PM1 0 的广州市荔湾区气溶胶 ,分别用GC MS和Ames试验测定不同粒径颗粒物中多环芳烃 (PAHs)的含量和有机抽提物的致突变性 .结果表明 ,在广州大气中共检测到 42种PAHs,其中 16种EPA优控PAHs中有 15种均在检出之列 .且高环数PAHs占总PAHs的质量百分比随着颗粒物粒径的减小而增加 .Ames测定表明 ,TA98菌株在加与不加S9活化系统时样品均出现阳性诱变反应并存在剂量 反应关系 .且随着颗粒物粒径的逐渐减小 ,抽提物的致突性越强 .在加或不加S9时 ,1μg和 1m3空气的致突性也均随着颗粒物粒径的减小而增强 。

Z流域水质致突变性研究

目的 探讨 Z水系地表水主要有机污染物及其致突变性。方法 用 Ames试验及双微核试验对该流域各主要城市地表水有机污染物进行致突变性检测 ,以气相色谱 /质谱 (GC/ MS)联机检测和高效液相色谱技术分析其主要有机污染物。结果 近城市及化工企业的江段水样致突变性较强。 类水质保护区内的采样点未检出致突变性。GC/ MS检出 6 0多种有机污染物 ,其中 a采样点检出间、对、邻硝基氯苯及硝基苯胺、氯苯胺 ;各采样点均可检测出多种芳烃类物质。结论 水质致突变性以 Q段最强 ;J段次之 ;

稀土元素的致突变性研究

用ＶＭＴ检测１４种稀土元素的致突变性，结果表明：重稀土组最强，中稀土组次之，轻稀土组软弱，其阈值为１μｇ／ｍＬ～５μｇ／ｍＬ。在一定浓度下，稀土对植物生长的影响表现为蚕豆根尖发黑甚至变硬，显微镜下见纤维组织增多，细胞变小、萎缩或变形，显示稀土具有细胞毒性；大量葡萄糖介质可使稀土毒性缓解；

有机烷酚类化合物致突变性研究

采用鼠伤寒沙门氏菌致突变试验 (AmesTest)菌株TA97,TA98,TA10 0 ,TA10 2 ,对环境中潜在内分泌激素干扰污染物甲基苯酚等 12种烷酚类有机物的致突变性进行研究。结果表明 ,除 2 ,4-二氯苯酚外 ,烷酚类化合物对Ames试验中TA98菌株的平皿掺入试验 ,均诱发显示阳性反应 ;其中对壬基酚、2 ,6 -二甲基苯酚、4-辛基酚等烷基酚类化合物呈强阳性反应 ,怀疑这几种化合物具有强致突变性 ,且以碱基移码型突变为主。

不同类型贮水箱提供的自来水有机浓集物致突变性比较

应用Ａｍｅｓ试验观察了不同类型贮水设备对所贮存自来水的有机浓集物致突变性的影响。结果表明，同一来源的供水经不同贮水设备提供的水样，其有机浓集物的致突变性呈现出一定的差异。大型水泥（Ａ型）贮水箱提供的水与出厂水一样，致突变性最强；涂有机玻璃及环氧树脂内衬的水箱（Ｂ型）和有机玻璃钢板水箱（Ｃ型）供水的致突变性相对较低；不同使用年限的涂铅丹水箱（Ｄ型）致突变性差别不大，似乎优于Ａ型而不及Ｂ型和Ｃ型水箱。总的看来，未见到二次供水设备的形式和质材对出厂自来水有机浓集物的致突变性有明显影响。

不同粒径颗粒物中多环芳烃含量与致突变性关系的研究

用五段分级采样器采集太原市三个功能分区空气中颗粒物，用高效液相色谱测定不同粒径颗粒物上五种ＰＡＨ的含量，用ＳＣＥ试验观察不同粒径颗粒物致突变性，结果表明，三个采样点大气颗粒物五种ＰＡＨ（芘、苯并（ａ）蒽、苯并（ａ）芘）浓度均很高，工业区明显高于住宅区及郊区（Ｐ＜０．０１），Ｂａｐ含量分别超标１５８、６２、５２倍，６０～７０％ＰＡＨ富集在粒径≤２μｍ颗粒上。颗粒物粒径愈小，致突变性愈强。ＰＡＨ含量和致突变性关系分析表明二者一致，在加Ｓ９条件下，它与ＰＡＨ总量、充、ＢａＰ显著相关（Ｐ＜０．０ｌ），在不加Ｓ９条件下，它与ＰＡＨ总量、芘、Ｂａｐ和ＢａＡ相关（Ｐ＜０．０５）。

煮沸对自来水有机浓集物致突变性的影响

本文通过Ames试验观察了以地面水为源水的H市自来水,经煮沸后其致突变性的变化情况。结果见到,自来水有机浓集物的致突变活性,随着沸腾持续时间的延长而上升。经色/质谱仪分析,亦见有新的化合物生成。