帕博利珠单抗治疗EGFR基因突变阴性和ALK阴性的晚期或转移性非小细胞肺癌的预算影响分析

目的从国家医疗保障支付方的角度出发,基于真实世界数据预测将帕博利珠单抗(PEM)纳入国家医保后,其作为一线药物治疗晚期或转移性非小细胞肺癌对医保基金可能产生的影响,从而为医保部门决策提供依据。方法构建预算影响分析模型,以2023年为基线年,比较PEM未纳入医保和纳入医保后对未来5年(2024-2028年)医保基金支出的影响。目标人群为EGFR基因突变阴性和间变性淋巴瘤激酶(ALK)阴性的局部晚期或转移性非小细胞肺癌患者;测算成本主要包括药品成本、不良反应处理成本、检查费用、入院监护费用等;以广东省183家医院2020-2022年PEM的配备率作为市场份额。采用单因素敏感性分析检验基础分析结果的稳健性。结果PEM未纳入医保时,2024-2028年目标人群的医保报销金额为493362.35万~515119.83万元;若将PEM纳入医保,上述数据范围为1187197.22万~1454057.10万元;两种情境下的医保报销增额为672077.39万~960694.75万元。PEM纳入医保后的医保报销金额占当年医保基金支出的比例分别为0.2980%、0.2621%、0.2288%、0.2082%、0.1857%,医保报销增额占当年医保基金支出增加部分的1.0840%、0.9957%、0.8886%、0.8863%、0.8616%,均呈逐年递减趋势。结论若将PEM纳入医保,由于其单价较高,导致医疗支出相应增加,将对医保基金支出产生较大冲击;但是,将该药用于EGFR基因突变阴性和ALK阴性的局部晚期或转移性非小细胞肺癌患者时,其医保报销金额占当年医保基金支出的比例以及医保报销增额占当年医保基金支出增长部分的比例均逐年降低。

EGFR敏感突变阴性非小细胞肺癌脑转移患者的临床特征

目的 研究表皮生长因子(EGFR)变阴突性非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移患者的临床特征。方法 选取92例EGFR突变阴性NSCLC患者为阴性组,并以1∶1比例选取同期92例EGFR突变阳性患者作为阳性组。分析NSCLC的脑转移发病率、病灶数目、大小、发病症状。结果 阴性组3年累积脑转移率28.26%(26/92)较阳性组46.74%(43/92)低(P<0.05)。本组26例EGFR突变阴性NSCLC脑转移中,病灶部位幕上61.54%(16/26)、幕下3.85%(1/26)、幕上幕下同时累积30.77%(8/26)、侵犯颅骨3.85%(1/26),其中以顶叶和额叶较为常见。脑转移病灶数1个、2~3个、>3个分别为9例(34.62%)、9例(34.62%)、8例(30.77%)。病灶大小范围<1.0 cm、<2.0 cm、<3.0 cm分别为7例(26.92%)、9例(34.62%)、10(38.46%)。症状:呼吸系统症状46.15%(12/26)、神经系统症状26.92%(7/26)、疼痛11.54%(3/26)、胸部影像学异常11.54%(3/26)、食欲降低3.85%(1/26),其中神经系统症状中包含瘫痪15.38%(4/26)、癫痫3.85%(1/26)、头痛3.85%(1/26)、运动障碍3.85%(1/26)。结论 EGFR敏感突变阴性NSCLC患者脑转移风险较低,发病部位主要为幕上,主要表现为呼吸系统症状和神经系统症状。

EGFR敏感突变阴性非小细胞肺癌脑转移患者临床特征

除少见的间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase, ALK)及原癌基因-1受体酪氨酸激酶(c-ros oncogene 1-receptor tyrosine kinase, ROS1)阳性敏感融合外,非表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)敏感突变的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)脑转移患者目前无有效的全身治疗药物,整体预后较差。由于传统药物血脑屏障透过率低,脑转移的局部治疗尤其是放疗具有非常重要作用。为了更好地认识EGFR突变阴性NSCLC脑实质转移的特点,本文从脑转移的发病率、发病时间、发病部位、病灶数目及大小、发病症状、治疗疗效和病情演变等方面综述了EGFR突变阴性NSCLC脑实质转移的临床特征以及治疗,为脑实质转移局部治疗的介入时机以及局部治疗技术选择提供参考。

信迪利单抗联合常规化疗方案对EGFR/ALK突变阴性晚期非鳞非小细胞肺癌患者免疫功能的影响

目的 探究信迪利单抗联合常规化疗方案对EGFR/ALK突变阴性晚期非鳞非小细胞肺癌患者免疫功能的影响。方法 选取2018年12月~2022年12月收治的80例EGFR/ALK突变阴性初治晚期非鳞非小细胞肺癌患者,按随机分配方法分为对照组和观察组各40例。其中对照组采用培美曲塞与顺铂常规化疗,观察组采用信迪利单抗联合培美曲塞与顺铂化疗。评估两组患者的临床疗效、免疫功能、肿瘤标志物水平、不良反应及生活质量。结果 治疗后观察组的疾病控制率(CBR)、客观缓解率(ORR)、T淋巴细胞表面抗原(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))及CD4^(+)/CD8^(+)水平明显高于对照组(P <0.05);治疗后观察组的癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血清铁蛋白(SF)、糖类抗原125(CA125)、CD8^(+)水平均低于对照组(P <0.05);两组患者不良反应发生情况差异无统计学意义(P> 0.05);治疗后观察组的生活质量改善率明显高于对照组(P <0.05)。结论 EGFR/ALK突变阴性晚期非鳞非小细胞肺癌患者采用信迪利单抗联合常规化疗方案治疗有助于提升患者的治疗效果,调节免疫功能,降低肿瘤标志物水平,且不会增加明显的不良反应,提升患者的生活质量。

就诊年龄、性别与基因突变阴性的肥厚型心肌病患者发生晚期心力衰竭的相关性研究

目的探讨基因突变阴性的肥厚型心肌病(HCM)患者晚期心力衰竭(HF)的风险因素,为HCM患者发生晚期HF的危险分层提供依据。方法经全外显子或panel测序未在8个编码肌小节蛋白的HCM致病基因中检出致病突变的无血缘关系HCM患者614例,采集的基线资料主要包括性别、就诊年龄、HCM患者病史、体征和影像学检查等。患者通过电话或临床随诊随访,随访终点为晚期HF。通过多因素Cox回归分析和KM曲线生存分析评估各个基线特征与晚期HF事件的相关性。结果经过平均(3.4±2.3)年的随访,60例患者发生晚期HF。多因素Cox回归分析和KM曲线分析均表明,就诊年龄(校正后风险比[HR]为1.716,95%可信区间[CI]为1.202~2.449,P=0.003)和性别(校正后HR为0.360,95%CI为0.180~0.720,P=0.004)和晚期HF风险有关。结论就诊年龄和性别是基因突变阴性的HCM患者发生晚期HF的风险因素,可能为基因突变阴性的HCM患者的预后评估提供重要依据。

乙型肝炎病毒(HBV)C启动子区核苷酸序列改变:HBV E阴性突变的另一分子机理

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｃ启动子区核苷酸序列改变：ＨＢＶＥ阴性突变的另一分子机理熊思东，屠红，闻玉梅（上海医科大学医学分子病毒学实验室，上海２０００３２）关键词乙型肝炎病毒Ｃ启动子，乙型肝炎病毒Ｅ阴性突变，核苷酸序列分析乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｅ阴性突变...

基因重组HBV联合表达反义RNA和显性阴性突变体抗HBV作用及HBV包装细胞系的构建

目的 探讨HBV作为基因治疗载体的可能性并检验其联合表达反义RNA和显性阴性突变体抗HBV的作用。方法 在表达完整HBV颗粒的质粒上,经基因修饰后联合表达S区反义RNA和核心-P蛋白的融合蛋白,整合于具有HBV复制的2.2.15细胞,形成细胞克隆,ELISA 法检测细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg,斑点杂交法检测细胞内HBV核壳中HBV DNA,PCR检测上清液中重组HBV颗粒。HBV全基因经删除包装信号ε区后,插入到G418抗性PCI-neo载体,转染HepG2细胞系,用G418筛选形成细胞克隆,检测表达HBsAg及HBcAg较多者作为HBV包装细胞系,进一步转染表达复制缺损型HBV的质粒,经两种抗生素同时筛选,PCR方法观察上清液中的病毒。结果 2.2.15-pMEP4组、2.2.15-CP组、2.2.15-SAS组和2.2.15-CPAS组,对HBsAg平均抑制率分别为2.74％±3.83％、40.08％±2.05％（t=35.5,P<0.01）、66.54％±4.45％（t=42.3,P<0.01）和73.68％±5.07％（t=51.9,P<0.01）;对HBeAg平均抑制率分别为4.46％±4.25％、52.86％±1.32％（t=36.2,P<0.01）、26.36％±1.69％（t=22.3,P<0.01）和 59.28％±2.10％（t=39.0,P<0.01）;对 HBV复制的抑制率分别为0、82.0％、59.9％和96.6％。在各治疗组培养上清液中均能检测出重组HBV颗粒。证明包装细胞系具有HBSAg和HBcAg表达。

重组逆转录病毒转导HBV载体表达显性阴性突变体抗HBV作用的研究

目的探讨重组逆转录病毒转导HBV载体表达显性阴性突变体的抗HBV作用。方法在逆转录病毒载体中插入两种不同类型表达显性阴性突变体的HBV基因复制单元,制备重组逆转录病毒pRV-CP、pRV-CS和空载体G1Na对照,并转染HepG2.2.15细胞,ELISA法检测细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg,斑点杂交法检测细胞内HBV核壳中HBV DNA,PCR检测上清液中重组HBV颗粒。结果转染HepG2.2.15细胞后3d、5d、7d、9d和11d,pRV-CP、pRV-CS和G1Na对照组对HBsAg表达的平均抑制率分别为(28.9±4.73)%(P<0.01)、(39.3±7.04)%(P<0.01)和(2.6±3.77)%;对HBeAg表达的平均抑制率分别为(40.38±2.59)%(P<0.01)、(33.1±4.27)%(P<0.01)和(3.1±3.02)%;对HBV复制的抑制率分别为67.2%和55.8%,对照组为13.4%。只有pRV-CP组培养上清液中检测出突变型HBV颗粒。结论重组逆转录病毒能转导HBV载体表达显性阴性突变体,对HBV复制及抗原表达有抑制作用,有望用于抗HBV治疗。

神兴牌仕康咀嚼片急性毒性与遗传毒性试验初报

神兴牌仕康咀嚼片是以沙棘果、菊花、桑叶、天然 β-胡萝卜素、乳酸锌为原料精制而成。经人群试验证实为一种可长期服用的护眼产品 ,动物试验表明两种性别的大、小鼠的 L D50 均大于 2 15 0 0 mg/ kg· bw,说明该产品属无毒物 ;三项致突变试验结果阴性。

Construction and Verification of LuxS-negative Mutants of Streptococcus Mutans and the Effect of the Absence of LuxS Gene on the Acid Tolerance

Objective: To knock out the entire Luxs gene of Streptococcus mutans(S.mutans) UA159 strain via homologous recombination and construct a Luxs-deleted mutant strain of S. mutans. To study the difference between the acid resistance of S. mutans Ingbritt C international standard strain and the acid resistance of LuxS mutant strain. Methods: Two DNA fragments locating in the upper and downstream of Luxs gene were amplified and a erythromycin resistance gene of PJT10 between them were engineered into PUC19 plasmid for constructing the recombination plasmid pUCluxKO. Electrotransformation of S.mutans cells with pUCluxKO-mutant resulted in isolation of erythromycin resistant S. mutans transformants, which was identified by polymerase chain reaction, V.harveyi BB170 luminescence bioassay and sequencing analysis. Solutions of S. mutans standard strain and LuxS mutant strain with same density were made and cultured at pH 3.5 to 7.0 BHI liquid for the same period.Terminal growth situation was compared.Firstly acidized in pH 5.5 BHI liquid,the two strains were cultured at pH 3.0 BHI liquid. The acid tolerance responses of the two strains were compared.Results:Restriction endonuclease analyses showed that pUCluxKO-mutant vector had been successfully recombined. The Luxs-deleted status of S.mutans mutants was confirmed by PCR with primers which were specific for the genes of Luxs and Erythromycin resistance. S.mutans mutant can not induce bioluminescence, indiating the mutant had been successfully recombined. After twenty generations of culture, the constructed Chinese S.mutans mutants were confirmed to be stable. Significant difference of aciduricity was observed between S.mutans standard strain and LuxS mutant strain.The acid resistance of standard strain was stronger than that of LuxS mutant strain.The two strains both displayed the capability of acid tolerance responses. Conclusion:The S.mutans gene allelic exchange plasmid is constructed correctively and a Luxs-negative mutants of S.mutans is constructed, which can help to further study the role of Luxs in the pathogenesis of S.mutans. LuxS mutant strain is more sensitive to acid inactivation,but the capability of acid tolerance responses exist still.

C基因截短突变体抗乙型肝炎病毒作用机制的研究

目的探讨C基因截短突变体抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用机制。 方法 构建C基因截短的真核表达载体pcDNA3—△ C及野生型C基因真核表达载体pcDNA3—C,瞬时转染HepG2细胞,用SDS—PAGE western blot检测pcDNA3—△C、pcDNA3-C的蛋白表达。pcDNA3—△ C与adwR9共转染HepG2细胞,以pcDNA3与adwR9为对照,用荧光定量PCR检测培养上清液及细胞内病毒量,用Native western blot 分析C基因截短蛋白干扰核心颗粒形成。 结果 重组载体pcDNA3—△ C、pcDNA3—C均可表达,pcDNA3-△C与adwR9共转染组上清液和细胞内病毒量较对照组降低,pcDNA3—△ C和pcDNA3—C共转染组Native western blot条带与pcDNA3和pcDNA3—C共转染组条带相比较明显淡。 结论 C基因截短突变体可干扰核心颗粒的形成,导致HBV复制下降。