靶向突变p53蛋白的抗肿瘤药物

p53蛋白是人体内十分重要的肿瘤抑制因子,通过调节细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡等作用发挥肿瘤抑制功能。突变后的p53蛋白不仅具有显性负性效应(dominant negative effect,DN)抑制野生型p53蛋白功能,而且还通过功能获得性效应(gain of function,GOF)调节细胞代谢、侵袭、迁移等方式促进肿瘤的发生。p53蛋白在超过50%的肿瘤组织中发生突变,是肿瘤细胞区别于正常细胞的一个特异性药物靶点。因此,针对突变p53蛋白开发新型抗癌药物一直是研究的热点。长期以来,由于突变p53蛋白表面较为光滑,缺乏药物结合口袋,使其被认为是一个不可成药的靶点。随着高通量筛选技术的发展以及对突变p53蛋白结构的深入了解,许多靶向突变p53蛋白的小分子化合物被报道并在体外展现出较好的抗肿瘤活性,多款基于突变p53蛋白研发的化合物已经进入临床试验阶段。本文就靶向p53蛋白治疗肿瘤的直接和间接策略进行综述,重点针对突变p53蛋白重激活剂与降解突变p53蛋白的小分子化合物作用机制进行梳理,以期为后续开发靶向突变p53蛋白药物的创新提供帮助。

膀胱移行细胞癌Pgp、突变p53蛋白、EGFR表达的预后判定价值

目的 探讨 Pgp、突变 p53蛋白、EGFR表达在膀胱移行细胞癌预后方面的判定价值。方法 应用免疫组化 SP法 ,检测 83例随 3年以上、术前未经化疗的原发性膀胱移行细胞癌中Pgp、突变 p53蛋白和 EGFR表达情况。结果 Pgp、突变 p53蛋白、EGFR的阳性表达率分别为63.9%、74.7%、67.5% ,三者的过表达均与膀胱癌的病理分级、临床分期和复发有关 ;生存分析显示 Pgp、突变 p53蛋白、EGFR表达与患者术后存活率密切相关。结论 Pgp、突变 p53蛋白、EGFR过表达是判定膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的重要指标。

HCV核心蛋白、突变p53和Bcl-2在HCC中的表达及相关性

目的探讨HCC组织中的核心蛋白、突变p53、Bcl_2的表达以及其相关性,探讨HCV核心蛋白是否促进p53突变和Bcl_2的表达。方法收集手术切除HCC组织42例,采用免疫组织化学EnVision法检测HCC组织核心蛋白、突变p53、Bcl_2的表达,用统计学分析三者间的关系。结果C蛋白、p53和Bcl_2在HCC癌组织中的表达率分别为40.5%(17/42)、47.62%(20/42)、83.3%(33/42);3组强度等级资料Kruskal_Wallis秩和检验H=16.33,差异性显著,Mann_WhitneyUtest:C蛋白和p53、Bcl_2蛋白间的P值分别0.43、0.00;C蛋白与突变p53、Bcl_2阳性强度两者间相关性检验P值分别为0.000、0.914,相关系数rs分别为0.67、0.08;突变p53与Bcl_2两者相关性检验P值为0.27,相关系数rp为0.32。结论3种蛋白的表达有相关性;HCV核心蛋白可能促进野生型p53突变和表达;核心蛋白和突变p53都有可能促进Bcb2蛋白的表达。

表浅膀胱癌Pgp、突变P53蛋白、bcl-2表达的预测复发价值

目的 探讨Pgp、突变P5 3蛋白、bcl 2表达在预测表浅膀胱癌复发方面的价值。方法 应用免疫组化SP法 ,检测 46例随访 3年以上、术前未经化疗的原发性表浅膀胱移行细胞癌中Pgp、突变P5 3蛋白和bcl 2表达情况。结果 Pgp、突变P5 3蛋白、bcl 2的阳性表达率分别为 45 .7%、5 8.7%、37.0 % ,单因素Kaplan Meier生存分析示Pgp、突变P5 3蛋白、bcl 2表达与术后复发相关 (P值均 <0 .0 1) ;多因素COX回归分析示术后复发与Pgp、突变P5 3蛋白表达有关(P值均 <0 .0 5 ) ,而与bcl 2表达无关 (P值 >0 .0 5 )。结论 Pgp、突变P5 3蛋白表达是判定原发性表浅膀胱移行细胞癌术后复发的独立预后指标。

突变P53功能研究新进展与个性化的肿瘤治疗新策略

p53是迄今为止研究最多的一种抑癌蛋白,最新研究仍在不断地揭示p53在调控机体代谢、生殖方面的新功能。同时,也揭示了不同p53突变蛋白的获得性新功能在肿瘤发生中的促进作用。这些研究对于了解p53突变的个性化新功能,寻找再激活野生型p53,校正突变p53的新途径奠定了基础,不同突变p53蛋白的个性化治疗将是未来肿瘤治疗的热点。文章综述了已发现的一些突变p53的获得性新功能,及针对不同的p53功能缺陷进行的p53蛋白功能再激活的策略:通过小分子或多肽再激活肿瘤细胞中的p53突变蛋白的野生型功能;通过重组的腺病毒在肿瘤细胞中表达野生型p53蛋白;通过抑制MDM2与p53的相互作用稳定野生型p53蛋白。对p53不同位点突变的深入研究可以帮助我们制定更合理的个性化治疗方案,寻求更有效的肿瘤治疗新途径。

注射突变p53基因CRISPR/Cas9质粒和肝癌细胞建立肝癌小鼠模型

目的采用尾静脉注射突变p53基因CRISPR/Cas9质粒和H22细胞建立肝癌模型。方法将健康雄性BALB/c小鼠随机空白组(生理盐水)、质粒组(质粒)、对照组(H22细胞+盐水)、实验组(H22细胞+质粒),每组25只。尾静脉注射建立肝癌模型。分别在注射后的2、3、4、5周中取材,眼眶采血检测小鼠血清转氨酶(ALT/AST)水平。观察肝、肺表面变化及结节数目,计算各组小鼠的成模率、死亡率以及脏器指数。HE染色观察小鼠肝的组织病理形态学改变。免疫组化、Western Blot等方法检测小鼠肝中p53及PCNA蛋白的表达情况。结果实验组和对照组均能成功构建转移性肝癌小鼠模型,其中实验组和对照组小鼠的成模率分别为60.87%和45.83%,死亡率为4.35%和29.17%。两组小鼠血清ALT、AST水平均有显著增加,肝表面按时间顺序也出现大小不等的囊肿和白色颗粒状结节。HE结果显示5周后实验组和对照组小鼠肝小叶结构均有不同程度的破坏,呈明显肿瘤病理学改变。质粒组与实验组小鼠肝中p53蛋白的表达量明显降低(P<0.05);实验组和对照组的肝组织中PCNA蛋白表达显著增加,且实验组表达量明显高于对照组(P<0.05)。结论通过尾静脉注射突变p53基因CRISPR/Cas9质粒和H22细胞的方法能够成功快速构建转移性肝癌小鼠模型。

散发性结直肠癌中MMR与突变p53的表达

目的 探讨错配修复基因MMR(hMSH2与hMLH1基因 )在散发性结直肠癌发生中的作用。方法 采用PCR SSCP和PCR产物直接测序法对 41例散发性结直肠癌患者肿瘤组织及正常组织的hMSH2、hMLH1与p53基因进行检测。结果 41例散发性结直肠癌中,有 2例发生hMSH2基因突变,占 4. 88% (2 /41), 5例发生hMLH1基因突变,占 12. 20% (5 /41), 20例发生p53基因突变,占 48. 78% (20 /41)。hMLH1和hMSH2基因在p53突变患者的突变率 30. 00% (6 /20)显著高于p53未发生突变患者的突变率 4. 76(1 /21) (P<0. 05)。结论 部分散发性结直肠癌患者中存在MMR基因缺陷,其中hMLH1基因的作用大于hMSH2。MMR基因突变与p53突变密切相关。

靶向突变p53的小分子药物研究进展

肿瘤抑制因子p53蛋白可以调节靶基因转录,控制细胞凋亡、衰老等生命活动,但其容易发生突变,失去抑癌功能,促进肿瘤发生发展。目前p53蛋白已成为治疗肿瘤的热门靶点之一,该文主要介绍以突变p53为靶点恢复构象活性的小分子化合物结构及作用机制。

靶向突变p53聚集体的肿瘤治疗研究进展

突变p53(mutant p53,Mut-53)聚集体的形成是p53突变后使原本包裹在其疏水核心内部的黏附序列暴露,黏附序列迅速成核组装,形成无定形的原纤维.Mut-p53聚集体不仅可以以显性负效应(dominant-negative effect,DN)的方式使野生型p53(wild type p53,Wt-p53)失活,还表现出功能获得(gain-of-function,GOF)特性,促进肿瘤的发生和发展.在卵巢癌、结肠癌、前列腺癌等多种肿瘤细胞中均发现了Mut-p53的异常聚集,其与肿瘤的转移、耐药和预后不良具有显著的相关性.因此,p53聚集是逆转化疗耐药及肿瘤治疗的潜在靶点.设计和发现靶向Mut-p53聚集体的小分子化合物,抑制p53疏水核心内部黏附序列的暴露,恢复p53的功能从而发挥抗肿瘤作用成为了当今研究热点.本文就p53聚集体对肿瘤发生发展的影响及目前靶向Mut-p53聚集体的研究策略进行了综述.

Ki-67、突变型p53表达和CT与直肠腺癌亚型、病理分化程度的相关性及临床价值分析

目的探究核基因Ki-67、突变型p53表达和CT与直肠腺癌亚型、病理分化程度的相关性及临床价值。方法选取2021年1月~2022年12月启东市人民医院收治的直肠腺癌患者90例,采用免疫组织化学法对患者的Ki-67及突变型p53表达情况进行测定,并对患者进行CT影像检查。探究患者Ki-67及突变型p53表达情况及CT检查结果与直肠腺癌亚型、病理分化程度的相关性,并采用受试者工作特征曲线(ROC)探究各指标对患者直肠腺癌高度分化的诊断价值。结果根据患者直肠腺癌亚型将90例患者分为A组(n=73,管状腺癌)和B组(n=17,黏液腺癌);根据患者的分化程度将患者分为C组(n=74,低分化)及D组(n=16,中分化及高分化)。Ki-67在A、B组中的阳性率分别为76.71%、47.06%,C、D组中的阳性率分别为47.30%、87.50%,差异有统计学意义(χ^(2)=4.547、8.573,P<0.05);突变型p53在A、B组中的阳性率分别为53.42%、23.53%,在C、D组中的阳性率分别为36.49%、81.25%,差异有统计学意义(χ^(2)=4.939、10.676,P<0.05)。C、D组间肿瘤位置、肿瘤肠壁长度、厚度、强化程度、增强后低密度区比较差异无统计学意义(P>0.05);但与C组相比较,D组肠壁偏向性、环形增厚占比、重度肠周浸润占比较大,差异有统计学意义(P<0.05)。Ki-67、突变型p53的阳性表达情况及肠壁偏向性环形增厚和重度肠周浸润对直肠腺癌管状腺癌高分化的ROC曲线下面积分别为0.701、0.724、0.636、0.639,但肠壁偏向性环形增厚和重度肠周浸润诊断差异无统计学意义(P>0.05)。结论Ki-67及突变型p53的阳性表达情况对直肠腺癌亚型和病理分化程度具有一定诊断意义,CT影像特征可以在一定程度上反映直肠腺癌患者病理分化程度,但诊断价值较低。

子宫内膜癌组织中HAX1和突变型p53表达的相关性及其临床意义

目的:探讨造血干细胞特异性相关结合蛋白1(HAX1)和突变型p53在子宫内膜癌组织中的表达模式、相关性及与预后的关系。方法:采用UALCAN数据库及qRT-PCR分析新鲜子宫内膜癌组织中HAX1 mRNA的表达水平;利用Western blotting检测新鲜子宫内膜癌组织中HAX1的蛋白表达水平;应用免疫组化检测120例子宫内膜癌患者癌组织及相应的癌旁组织石蜡标本中HAX1和p53蛋白的表达水平,分析两者的相关性及与患者临床病理特征和预后的关系;利用GEPIA数据库对HAX1与子宫内膜癌相关基因的关系进行分析。结果:HAX1 mRNA和蛋白在子宫内膜癌组织中均高表达;HAX1阳性表达和突变型p53的表达中度正相关(χ^(2)=36.468,r=0.551,P<0.05),且均与淋巴结转移、FIGO分期、血CEA水平以及Ki-67的表达密切正相关(P<0.05),但与患者总生存率呈负相关;HAX1阳性表达(P=0.008)、突变型p53表达(P=0.022)、淋巴结有转移(P=0.003)、FIGO高分期(P<0.001)及术后辅助治疗方法(P<0.001)是患者预后的独立危险因子;基因相关性分析结果显示HAX1与TP53、MKI67、BAX、CCNE1、POLE1、MSH2、MSN6及PMS2的表达相关。结论:HAX1在子宫内膜癌组织中高表达,与突变型p53表达正相关,两者表达模式可综合评估该肿瘤的恶性程度、进展情况及患者的预后情况,为子宫内膜癌的术后治疗提供新思路。

IVIM-DWI和IDEAL-IQ技术预测子宫内膜癌p53基因突变

目的:探讨体素不相干运动DWI(IVIM-DWI)和多点非对称回波采集与迭代最小二乘法水脂分离(IDEAL-IQ)成像在鉴别p53基因突变型与野生型子宫内膜癌(EC)中的价值。方法:回顾性分析2021年11月-2022年6月在本院经病理证实的18例p53突变型和28例p53野生型EC患者的IVIM-DWI和IDEAL-IQ成像资料。比较两组间ADC_(slow)、ADC_(fast)、f、FF和R_(2)^(*)值的差异。分别采用受试者工作特征曲线(ROC)、Logistic回归分析和DeLong检验评估各参数的诊断效能、构建多参数联合模型和比较AUC的差异。结果:p53基因突变组的ADC_(slow)和f值均显著小于野生组[(0.66±0.26) vs.(1.11±0.45),P<0.001;1.78 (1.49,2.15) vs. 2.29 (1.51,3.35),P=0.048],R_(2)^(*)值显著大于野生组[(23.98±12.46) vs.(15.10±3.69),P=0.001];两组间ADC_(fast)和FF值的差异无统计学意义(P=0.173、0.184)。ADC_(slow)、f和R_(2)^(*)值预测突变型EC的AUC分别为0.817、0.675和0.718;三者构建的联合模型的AUC为0.984,敏感度为96.43%,特异度为94.44%。DeLong分析结果显示,联合模型与单项参数(ADC_(slow)、f、R_(2)^(*))比较,AUC的差异均有统计学意义(Z=2.659,P=0.008;Z=3.876,P<0.001;Z=3.318,P=0.001)。结论:IVIM-DWI和IDEAL-IQ成像的定量参数可用于评估EC患者的p53基因突变情况,且两种技术多参数联合诊断能够显著提升预测效能。

四川大学华西医院:汪源研究员团队开发突变p53可视化系统实现病理正常组织微量癌前细胞的示踪和靶向

本刊讯(通讯员沈国波)近日,四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室/神经外科汪源研究员团队在Nature Cancer上发表了题为"Protein-level mutant p53 reporters identify druggable rare precancerous clones in noncancerous tissues"的研究论文。该研究通过基因编辑首次构建了2种突变p53荧光融合蛋白报告基因鼠,在包括脑瘤、肉瘤、淋巴瘤等多种恶性实体瘤模型中,实现了在病理正常组织中对低丰度癌前细胞的特异性标记、示踪和靶向干预,为研究肿瘤早期演进和调控机制提供了重要工具。

吸烟与食管鳞状细胞癌p53基因突变关系的meta分析

目的 利用meta分析,研究吸烟与食管鳞状细胞癌中p53基因突变的关联性。方法 系统检索国内外数据库中,截至2022年1月5日发表的食管鳞状细胞癌p53基因突变与吸烟关系的有关论文,数据库来自Medline、Embase、CNKI、万方、维普。提取数据计算合并比值比以及95%置信区间。结果 符合纳入及排除标准的研究共计27项,共2257例食管鳞状细胞癌患者,其中吸烟人群占68.59%,不吸烟人群占31.41%。I~2=52.4%,P=0.001,选取随机效应模型进行分析,结果表明,吸烟和p53基因突变的合并比值比为1.64,95%置信区间:1.17~2.30,P=0.004;其中轻度吸烟组与p53基因突变的合并比值比为1.12,95%置信区间:0.67~1.88,P=0.67;重度吸烟组与p53基因突变的合并比值比为2.28,95%置信区间:1.38~3.78,P=0.001。结论 吸烟与食管鳞状细胞癌p53基因突变存在正相关关系,尤其是重度吸烟者食管鳞状细胞癌发生p53突变的风险明显高于非吸烟者。

Ki67、突变型P53、突变型P16、CK7与宫颈癌复发相关性临床研究

目的探讨Ki67、突变型P53、突变型P16、CK7免疫组化因素与宫颈癌术后复发的相关性临床研究。方法选取2012年1月至2022年1月在佛山市妇幼保健院和佛山市第一人民医院收治的符合条件的120例宫颈癌患者临床资料进行回顾性分析,所有患者均按照国际妇产科联盟(FIGO)宫颈癌诊疗指南接受手术治疗,所有标本予病理检查,采集患者Ki67、突变型P53、突变型P16、CK7免疫组化表达情况。收集临床就诊相关资料进行分析,通过单因素、多因素Logistic回归分析宫颈癌复发风险因素,以组织病理学结果作为诊断金标准,分析Ki67、突变型P53、突变型P16、CK7免疫组化因素与宫颈癌复发关系。结果复发组肿瘤直径≥4cm、中或低分化、病理分期(Ⅱa~Ⅲ期)、淋巴转移、脉管阳性、残端阳性及Ki67、突变型P53、突变型P16、CK7表达阳性的患者占比均高于未复发组(P<0.05)。将宫颈癌术后是否复发作为因变量,将影响术后复发的差异有统计学意义的指标作为自变量,纳入多因素Logistic回归分析模型,结果显示:复发组肿瘤直径≥4cm、中或低分化、病理分期(Ⅱa~Ⅲ期)、淋巴转移、残端阳性、脉管阳性及Ki67、突变型P53、突变型P16、CK7表达阳性是宫颈癌术后复发的主要风险因素。多因素Logistic回归模型分析为LogitP=-9.543^(+)肿瘤直径×2.623^(+)分化程度×2.764^(+)病理分期×2.052^(+)淋巴结转移×2.046^(+)残端阳性×2.439^(+)脉管阳性2.413^(+)Ki67表达×2.177^(+)突变型P53表达×2.039^(+)突变型P16表达×1.883^(+)CK7表达性×2.098,上述公式直接代入数据,若LogitP>0.496,提示宫颈癌复发风险高。结论肿瘤直径(≥4cm)、中低分化、淋巴转移、脉管阳性、阴道残端阳性、病理分期(Ⅱa~Ⅲ期)、Ki67、突变型P53、突变型P16、CK7表达阳性是宫颈癌术后复发的高危因素;通过Ki67、突变型P53、突变型P16、CK7免疫组化因素建立宫颈癌复发模型具有一定的预警作用及临床价值。

十枣汤对荷瘤小鼠p53突变及内皮素表达的影响

目的观察十枣汤对荷H22腹水瘤种小鼠的抗肿瘤作用。方法小鼠随机分为空白对照组、荷瘤模型组、环磷酰胺(CTX)阳性对照组和十枣汤高、中剂量组。除空白对照组外,其余4组小鼠均以皮下注射瘤细胞悬液0.2 mL造模。于造模第2天,分别灌胃相应药物或生理盐水,或注射CTX。采用免疫组化方法检测瘤体内突变的p53蛋白;放射免疫法测定小鼠血浆内皮素(ET)水平。结果各用药组突变型p53表达水平明显低于荷瘤模型组(P<0.01),而3组间比较差异无显著性意义(P>0.05);模型组小鼠血浆ET水平明显高于空白对照组(P<0.01),各用药组ET水平均有不同程度下降(P<0.05,P<0.01)。结论十枣汤可以降低突变型p53蛋白表达,降低血浆ET水平并减少肿瘤的血供,这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。

p53及其突变体在癌症中的作用

Tp53肿瘤抑制基因是人类癌症中最常见的基因,在肿瘤学中一直被视为主要研究焦点。p53蛋白作为其转录因子,能够激活多个靶基因表达在调节细胞周期、凋亡和基因组稳定性方面发挥着至关重要的作用,被广泛认为“基因组的守护者”。尽管对p53及其突变体的功能进行了大量的研究,但仍然没有批准的药物可以选择性地靶向癌症中p53通路。因此,本文对p53蛋白中的个体结构域进行了综述,总结了p53在肿瘤发生发展中的作用,同时阐述了突变型p53的作用机制,最后,提出了基于p53的相关癌症治疗策略,以期对癌症的诊断与治疗有一定的参考作用。

化癥口服液对荷瘤小鼠p53突变及内皮素表达的影响

目的:探讨化癥口服液对荷H22小鼠的抗肿瘤作用和可能的机制。方法:75只健康小鼠随机分为5组,即空白对照组、荷瘤模型组、化癥口服液高、中剂量组(简称高、中剂量组)和阳性对照组。除空白对照组外,其余4组小鼠均以皮下注射瘤细胞悬液,0·2ml/只造模。于造模第2天,空白对照组和荷瘤模型组小鼠以生理盐水(NS)灌胃。高、中剂量组小鼠分别予100%、50%浓度的化癥口服液10ml/kg灌胃,2次/d,共10天。阳性对照组小鼠以CTX10ml/kg腹腔内注射,隔日1次,共5次。免疫组化方法检测瘤体内突变的p53蛋白;放射免疫法测定小鼠血浆内皮素(ET)水平。结果:荷瘤模型组小鼠的突变型p53表达水平明显高于其他3组(P<0·05),3个治疗组小鼠突变型p53表达都有不同程度的下降,3组间比较差异无显著性意义(P>0·05);模型组小鼠血浆ET水平明显高于空白对照组(P<0·001),其余各组的比较,ET水平均有不同程度下降,尤以高剂量组接近空白对照组水平,且与中剂量组和阳性对照组相比,差异有显著性意义(P<0·05)。结论:化癥口服液可以降低突变型p53蛋白表达,降低血浆ET水平并减少肿瘤的血供,这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。