舍曲林对抑郁症大鼠认知功能和海马突触后致密蛋白-95 mRNA表达的影响

目的探讨舍曲林对抑郁症大鼠认知功能和海马突触后致密蛋白-95(PSD-95)mRNA表达的影响,分析PSD-95 mRNA表达与抑郁症大鼠认知功能之间的关系。方法在64只成年健康雄性Sprague-Dawle大鼠中随机选择16只作为对照组,余48只大鼠作为模型组,对照组大鼠正常饲养,模型组大鼠给予慢性不可预见应激制备抑郁症模型。造模成功后,将模型组大鼠随机分为抑郁组、抑郁+生理盐水组和抑郁+舍曲林组,每组16只。抑郁+舍曲林组大鼠每日灌胃舍曲林5.8 mg·kg^(-1),抑郁+生理盐水组大鼠每日灌胃生理盐水5.8 mg·kg^(-1),均干预4周;抑郁组大鼠不给予任何干预措施。记录并比较对照组和模型组大鼠体质量、蔗糖水摄入量及运动总距离。采用Y迷宫实验和巴恩斯迷宫实验检测对照组、抑郁组、抑郁+生理盐水组和抑郁+舍曲林组大鼠的认知功能,然后处死大鼠,采用反转录聚合酶链反应法检测4组大鼠海马组织中PSD-95 mRNA相对表达量,并分析大鼠海马组织中PSD-95 mRNA相对表达量与认知功能的关系。结果模型组大鼠体质量、蔗糖水摄入量、运动总距离均少于对照组(P<0.05)。模型组大鼠正确反应次数少于对照组,错误反应次数多于对照组,总潜伏期反应时间长于对照组(P<0.05)。模型组大鼠第2、4天进入目标洞时间长于对照组(P<0.05);2组大鼠第1、3天进入目标洞时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。抑郁组、抑郁+生理盐水组大鼠正确反应次数少于对照组,错误反应次数多于对照组,总潜伏期反应时间长于对照组(P<0.05)。抑郁+舍曲林组与对照组大鼠正确反应次数、错误反应次数、总潜伏期反应时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。抑郁+舍曲林组大鼠正确反应次数多于抑郁组和抑郁+生理盐水组,错误反应次数少于抑郁组和抑郁+生理盐水组,总潜伏期反应时间短于抑郁组和抑郁+生理盐水组(P<0.05)。抑郁组与抑郁+生理盐水组大鼠正确反应次数、错误反应次数和总潜伏期反应时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。抑郁组、抑郁+生理盐水组大鼠第1、2、3、4天进入目标洞时间均长于对照组(P<0.05)。抑郁+舍曲林组与对照组大鼠第1、2、3、4天进入目标洞时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。抑郁+舍曲林组大鼠第1、2、3天进入目标洞时间短于抑郁组和抑郁+生理盐水组(P<0.05);第4天进入目标洞时间与抑郁组和抑郁组+生理盐水组比较差异无统计学意义(P>0.05)。抑郁组与抑郁+生理盐水组大鼠第1、2、3、4天进入目标洞时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。抑郁组、抑郁+生理盐水组大鼠海马组织中PSD-95 mRNA相对表达量低于对照组(P<0.05)。抑郁+舍曲林组与对照组大鼠海马组织中PSD-95 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。抑郁+舍曲林组大鼠海马组织中PSD-95 mRNA相对表达量高于抑郁组和抑郁+生理盐水组(P<0.05)。抑郁组与抑郁+生理盐水组大鼠海马组织中PSD-95 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠海马组织中PSD-95 mRNA表达水平与大鼠在Y迷宫实验中正确反应次数呈显著正相关(r=0.486,P<0.05),与错误反应次数呈显著负相关(r=-0.581,P<0.05)。结论舍曲林能改善抑郁症大鼠的认知功能,增加海马组织中PSD-95 mRNA的表达量,大鼠海马组织中PSD-95 mRNA的表达与大鼠认知功能呈正相关。

电针手厥阴心包经穴对大脑中动脉栓塞模型大鼠不同时点脑组织突触素及突触后致密蛋白-95表达的影响

目的观察电针手厥阴心包经穴对大脑中动脉栓塞(MCAO)模型大鼠突触可塑性的影响,探讨其作用机制。方法将150只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、心包经组和肺经组,每组再分成3、7、14、21、28 d 5个时点,每个时点6只。采用颈外动脉插入线栓法制备MCAO大鼠模型。心包经组取穴“天泉”“曲泽”“内关”“大陵”,肺经组取穴“天府”“尺泽”“列缺”“太渊”,于造模后第2日开始干预,每次30 min,连续电针6 d,间隔1 d,继续电针,共28 d。采用免疫组化、Western blot检测大鼠脑组织突触素(SYP)、突触后致密蛋白-95(PSD-95)表达。结果免疫组化结果显示,与正常组、假手术组比较,模型组大鼠脑组织7、14 d SYP表达明显降低(P<0.05,P<0.01),各时点PSD-95表达均明显降低(P<0.01);与模型组比较,心包经组、肺经组大鼠脑组织各时点SYP表达均明显升高(P<0.01,P<0.05),除3 d外,心包经组、肺经组大鼠脑组织PSD-95表达均明显升高(P<0.01);与同一时点肺经组比较,除3 d外,心包经组大鼠脑组织SYP和PSD-95表达均明显升高(P<0.01,P<0.05)。Western blot结果显示,与正常组、假手术组比较,模型组大鼠脑组织各时点SYP和PSD-95蛋白表达均明显降低(P<0.01);与模型组比较,心包经组大鼠脑组织各时点SYP和PSD-95蛋白表达均明显升高(P<0.01,P<0.05);与同一时点肺经组比较,心包经组大鼠脑组织3、7、21 d SYP和PSD-95蛋白表达均明显升高(P<0.01)。结论电针心包经穴能提高MCAO模型大鼠突触可塑性相关蛋白SYP和PSD-95表达,在一定程度上参与脑缺血后突触可塑性的调节。

康复训练对缺血性脑卒中小鼠突触蛋白Ⅰ和突触后致密蛋白-95表达的影响

目的:探究局部缺血性脑卒中后康复训练对突触蛋白Ⅰ(SynapsinⅠ)和突触后致密蛋白-95(PSD-95)表达的影响。方法:光栓法建立局部缺血脑卒中模型,随机分为假手术组(n=9)、缺血组(n=9)、缺血+训练组(n=9),术后16h开始对缺血+训练组进行康复训练,持续至21天,分别于术后第1、3、7、14、21天对小鼠进行行为学测试。康复训练的方法有加速转棒训练、爬梯子训练、平衡木训练、悬挂训练,2次/d。21天后取脑做Western Blot分析SynapsinⅠ、PSD-95的表达水平。结果:行为测试结果表明,脑卒中后第1天缺血组和缺血+训练组疲劳转棒的成绩和抓力显著低于假手术组(P<0.01),在训练后第3天,缺血+训练组转棒成绩增高至假手术组水平,均明显高于缺血组(P<0.05),在训练第7天后,转棒成绩三组间无差异;前肢抓力恢复较慢,训练第7天后,缺血+训练组抓力提高至假手术组水平,较缺血组高(P<0.05)。Western Blot结果显示,术后21天,缺血组PSD-95表达水平明显低于假手术组(P<0.01),缺血+训练组显著高于缺血组(P<0.01);SynapsinⅠ表达水平缺血组较假手术组低(P<0.05),缺血+训练组显著高于缺血组(P<0.01)。结论:局部缺血性脑卒中后康复训练促进小鼠脑功能恢复与突触蛋白SynapsinⅠ和PSD-95表达的增加有关。

人参皂苷Rb1对阿尔茨海默病模型小鼠术后认知功能、海马内突触后致密蛋白-95及尼氏体表达的影响

目的观察人参皂苷Rb1对APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病(AD)模型小鼠肝叶部分切除术后认知功能及海马内突触后致密蛋白-95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)、神经元尼氏体表达的影响。方法将3月龄AD模型小鼠120只随机分为3组,手术组(S组)于麻醉后行肝叶部分切除术;人参皂苷Rb1组(Rb1组)于手术前5 d腹腔注射人参皂苷Rb160 mg/kg;对照组(N组)于手术前5 d腹腔注射同体积的生理盐水。以上各组随机抽取8只小鼠采用水迷宫连续训练5 d并检测术后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d、28 d的学习记忆能力,余小鼠术后3 d、7 d、14 d、21 d、28 d取标本,行尼氏染色并检测海马内PSD-95的表达。结果与Rb1组比较,S组和N组术后3 d、7 d、14 d、21 d、28 d平均逃避潜伏期延长(P<0.05);Rb1组术后目的象限时间百分比较S组和N组升高(P<0.05)。与Rb1组比较,S组和N组术后3 d、7 d、14 d、21 d、28 d PSD-95蛋白表达逐渐减少(P<0.05)。尼氏染色显示:Rb1组术后海马CA1区神经细胞排列密集、整齐,胞浆中尼氏体丰富;与Rb1组比较,S组和N组术后21 d、28 d神经元尼氏体减少(P<0.05)。结论人参皂苷Rb1可以提高AD模型小鼠肝叶部分切除术后的学习记忆能力,其机制可能与其改善突触相关蛋白PSD-95及神经元尼氏体的表达相关。

突触后致密区蛋白-95与突触可塑性研究进展

突触是神经元之间的连接部位，生物信号通过突触前膜经突触传递到突触后膜。突触数量和功效的改变可引起突触可塑性的改变。突触可塑性是学习和记忆的神经基础。突触后致密区（PSD）是突触后信号转导和整合的结构基础，而PSD-95是新近在谷氨酸能突触的PSD中发现的一种特殊蛋白质，能够整合N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体信号。该蛋白与突触可塑性密切相关。本文就PSD-95与突触可塑性研究进展作一综述。

雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠突触后致密物蛋白N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚基2B和突触后致密物质95的影响

目的：探讨雷公藤内酯醇（TP）对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马神经元突触后致密物中N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚基2B（NR2B）和突触后致密物质95（PSD-95）表达的影响。方法：30只SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组、用药组。应用免疫组织化学法和RT-PCR法检测各组大鼠海马NR2B和PSD-95蛋白和mRNA的表达。结果：免疫组织化学显色结果显示，用药组NR2B和PSD-95阳性细胞数较模型组均增多，平均光密度较模型组增加。RT-PCR结果显示，用药组NR2B和PSD-95mRNA水平较模型组升高。结论：TP能促进AD模型大鼠海马神经元NR2B和PSD-95的表达，表明其对突触可塑性有一定的改善作用。

睾酮对β-淀粉样蛋白1-42寡聚体联合去势对大鼠脑内突触后膜致密物-95表达的影响

目的:研究睾酮对β-淀粉样蛋白(Aβ) 1-42寡聚体联合去势大鼠突触可塑性的影响.方法:采用双侧海马CA1区分别注射Aβ1-42寡聚体10 μg联合去势,建立阿尔茨海默病(AD)样动物模型,大鼠随机分为模型对照组、睾酮组、氟他胺组、氟他胺+睾酮组,另设空白对照组.尼氏染色计数各组正常锥体细胞;免疫组织化学和免疫印迹检测各组大鼠脑内突触后膜致密物-95(PSD-95)的表达量.结果:睾酮组细胞计数、PSD-95表达量较高,与空白对照组无差异,但与其余3组差异均存在统计学意义;氟他胺组、氟他胺+睾酮组、模型对照组中神经细胞数量与PSD-95表达量组间均无差异.结论:睾酮对突触可塑性的作用是通过增加细胞存活率与雄激素受体途径实现的.

三七总皂苷对机械通气致脑损伤大鼠海马神经元及突触相关蛋白PSD-95、GAP-43的影响

目的 探究三七总皂苷(PNS)对机械通气(MV)致脑损伤大鼠海马神经元突触可塑性的影响。方法 SD大鼠采用随机数字表法分为对照(Control)组、MV组、MV+PNS组,每组18只。MV组和MV+PNS组大鼠行MV,Control组大鼠气管插管后进行自主呼吸,未行MV。MV+PNS组大鼠于MV前15 min尾静脉注射PNS 15.844 mg/kg,Control组及MV组于MV前15 min腹腔注射等量生理盐水。MV后,Morris水迷宫实验测量大鼠的认知功能;苏木素-伊红(HE)染色观察海马组织病理学变化;高尔基染色观察海马神经元的树突棘密度;免疫组化法检测海马神经元谷氨酸受体(GluR)1的表达;Western印迹检测海马组织突触后密度蛋白(PSD)-95、生长相关蛋白(GAP)-43蛋白表达。结果 与Control组相比,MV组逃避潜伏期显著延长,穿越平台所在位置次数、树突棘密度、海马CA1区GluR1阳性表达和海马组织PSD-95、GAP-43蛋白表达显著减少(P<0.05),海马CA1区神经元未见明显病理学改变;与MV组相比,MV+PNS组逃避潜伏期显著缩短,穿越平台所在位置次数、树突棘密度、海马CA1区GluR1阳性表达和海马组织PSD-95、GAP-43蛋白表达显著增加(P<0.05),海马CA1区神经元损伤明显减轻。结论 PNS可减轻MV所致大鼠脑损伤,其作用机制可能与增加海马神经元突触可塑性有关。

β-淀粉样蛋白对叉头蛋白O3a和突触后致密蛋白95的影响

【目的】为了研究β-淀粉样蛋白(Aβ)产生神经毒性的机制,本研究探讨了Aβ对凋亡相关核转录因子叉头蛋白O3a(FoxO3a)和突触后致密蛋白95(PSD95)的作用及可能的机制。【方法】采用梯度浓度(5、10、20μmol/L)寡聚化的Aβ25-35处理PC12细胞和神经元24 h,采用Westernblot法检测FoxO3a和PSD95的变化。免疫荧光法检测PC12细胞中PSD95表达量的变化和FoxO3a在细胞内的定位。在Aβ25-35海马注射的大鼠和APP/PS1转基因鼠中,考察脑组织中PSD95和FoxO3a的变化。采用WesternBlot法检测体外环境和在体环境中,Aβ对FoxO3a和蛋白激酶B(AKT)磷酸化的影响。【结果】与正常对照组相比,20μmol/L的Aβ25-35处理组PSD95蛋白水平下调至(45.09±1.61)%(F=7.487,P=0.0540)。与之对应,20μmol/L的Aβ25-35上调FoxO3a的蛋白水平为对照组的(228.7±20.44)%(F=17.48,P=0.0210)。在原代培养的神经元中,获得了相似的结果。另外,免疫荧光的结果显示Aβ25-35可以促进FoxO3a进入细胞核。大鼠海马注射Aβ25-35后,水迷宫实验中目标区域的平均停留时间为(24.35±1.29)s(F=2.843,P=0.098),平均穿越次数为(2.53±0.49)次(F=3.459,P=0.0149),与对照组相比都显著降低。RT-PCR结果显示Aβ25-35组大鼠海马组织中PSD95的mRNA水平下降为对照组的(58.40±8.28)%(F=1.193,P=0.0101),同时FoxO3a的mRNA的表达量上调(140.90±7.45)%(F=2.378,P=0.0496)。在7月龄的APP/PS1转基因小鼠的大脑组织中,PSD95的mRNA和蛋白水平分别下调为野生型小鼠的(60.89±1.53)%(F=20.05,P=0.0088)和(59.63±13.55)%(F=8.496,P=0.0445),而FoxO3a的mRNA和蛋白水平则分别上调为对照组的(172.4±4.87)%(F=2.351,P=0.0004)和(235.00±39.03)%(F=2.754,P=0.0320)。20μmol/L的Aβ25-35处理PC12细胞不同时间后(5、10、20和40 min),FoxO3a和AKT的磷酸化水平随着时间增长而降低,APP/PS1转基因小鼠脑组织中的AKT和FoxO3a的磷酸化水平与对照组相比也显著下降至(65.75±3.51)%(F=6.362,P=0.0236)和(46.62±9.64)%(F=8.562,P=0.0079)。【结论】Aβ在体外细胞模型和体内动物模型中都可以上调核转录因子FoxO3a的表达,下调PSD95的水平,可能的机制是通过去磷酸化AKT从而减少了PSD95的合成,同时降低了FoxO3a的磷酸化水平并增加FoxO3a的表达量。

小鼠顶叶皮层反复轻度创伤性脑损伤抑制延髓NLG-1和PSD-95的表达

目的研究反复轻度创伤性脑损伤(rmTBI)对延髓神经元形态和突触可塑性的影响。方法32只雄性ICR小鼠随机分为假手术组(SHAM组,n=8)和rmTBI组(n=24)。使用自由落体打击装置建立rmTBI模型,打击后存活小鼠为rmTBI存活组(rmTBI-S),打击后死亡小鼠为rmTBI死亡组(rmTBI-D)。使用神经损伤评分、翻正反射和强迫游泳实验检测小鼠神经功能障碍,使用苏木素-伊红及尼氏染色观察神经细胞病理形态改变,使用免疫印迹及免疫荧光染色检测神经连接蛋白1(NLG-1)和突触后致密蛋白95(PSD-95)表达水平。结果SHAM组小鼠无死亡,rmTBI组死亡率41.67%,差异有统计学意义(P<0.05);和SHAM组相比,rmTBI-S组小鼠神经损伤评分降低(P<0.001)、翻正反射恢复时间(P<0.001)和强迫游泳不动时间(P<0.05)增加,神经元尼氏小体消失、肿胀坏死;延髓NLG-1(P<0.05)和PSD-95(P<0.05)表达水平降低;和rmTBI-S组相比,rmTBI-D组NLG-1(P<0.01)和PSD-95(P<0.01)表达水平降低。rmTBI-D组小鼠延髓神经纤维扭曲水肿,神经元密度降低。结论延髓突触结构异常和功能障碍可能与rmTBI导致的死亡及神经功能损害相关。

电针对糖尿病模型大鼠海马CA3区神经元Nrf2、HO-1和PSD95表达的影响

目的观察电针对糖尿病模型大鼠海马CA3区核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶(HO-1)与突触后致密蛋白95(PSD95)表达变化,探讨电针保护糖尿病神经系统损伤的可能机制。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常组、载体组、糖尿病组和电针组,每组8只。采用链脲佐菌素腹腔注射法制备糖尿病大鼠模型。造模成功1周后,电针组电针刺激一侧“足三里”及“胰俞”穴,30分钟/次,1次/天,连续4周。血糖仪检测大鼠空腹血糖水平;尼氏染色法观察大鼠海马CA3区神经元形态;免疫组织化学染色法检测大鼠海马CA3区的Nrf2、HO-1与PSD95的蛋白表达。结果空腹血糖检测结果显示,与正常组和载体组比较,糖尿病组血糖水平升高(P<0.05);与糖尿病组比较,电针组血糖水平降低(P<0.05)。尼氏染色结果显示,与正常组和载体组比较,糖尿病组海马CA3区神经元层次减少,胞核固缩;与糖尿病组比较,电针组海马CA3区神经元层次增加,形态改善。免疫组织化学染色结果显示,与正常组和载体组比较,糖尿病组海马CA3区Nrf2、HO-1与PSD95蛋白表达降低(P<0.05);与糖尿病组比较,电针组海马CA3区Nrf2、HO-1与PSD95蛋白表达升高(P<0.05),且与正常组和载体组表达水平相接近(P>0.05)。结论电针可上调糖尿病模型大鼠海马CA3区Nrf2、HO-1与PSD95的表达,提示其可能通过抑制氧化应激和改善突触可塑性发挥对其对神经元的保护作用。

突触后致密蛋白95(PSD95)和突触小泡蛋白在神经元成熟过程中的分布

目的探讨突触后致密蛋白95(PSD95)和突触小泡蛋白(SYP)在原代培养不同时间神经元中的表达。方法采用免疫荧光技术检测原代培养3 d(3DIV)、7DIV和14DIV大脑皮层神经元内的PSD95和SYP的表达。结果 PSD95在3DIV时主要分布在神经元胞体;7DIV时分布在胞体、突起末端和分支处;14DIV时分布在胞体和呈斑点状分布在神经元突起上。SYP在3DIV时无明显表达,7DIV时分布在神经元细胞核内,14DIV时分布在细胞核内和呈斑点状分布在突起上。结论随着培养神经元和突触的发育至成熟,PSD95和SYP最初主要位于神经元胞体和细胞核内,最终大都呈斑点状密集分布在突起上。表明PSD95和SYP虽产生部位不同,但最终都与突触的形成和成熟密切相关。

川芎素对大鼠脑缺血再灌注时突触后致密物质-95活性的影响(英文)

应用神经行为学评估、脑梗死容积测量和 Westernblot分析 ,探讨研究阿魏酸钠 (SF)的神经保护作用及其对局灶性脑缺血损伤时突轴后致密物质 - 95 (PSD- 95 )活性的影响 ,证实 SF明显改善再灌注 2 4 h神经功能缺陷和减少脑梗死容积 ,显著增强再灌注后 PSD- 95表达 ,表明 SF可能通过加强PSD-

突触后密度蛋白-95在大鼠脊髓发育过程中的表达变化

目的:探讨突触后密度蛋白-95(PSD-95)在大鼠脊髓发育过程中的表达变化以及细胞定位。方法:采用实时定量PCR(Real-Time PCR)和Western blot测定发育不同时期PSD-95 mRNA及蛋白水平的表达变化。采用免疫荧光染色显示PSD-95在发育脊髓中的细胞定位。结果:大鼠脊髓发育过程中PSD-95 mRNA及其蛋白水平从生后1d开始逐渐升高,在生后1周达高锋,成年后维持在一定的生理水平。免疫荧光双标证实PSD-95在生后发育早期主要定位于脊髓灰质,与神经元的标记物NeuN和突触的标记物synapsin存在共定位;成年后广泛分布于脊髓前角、后角以及白质,分别与NeuN和synapsin以及小胶质细胞的标记物OX-42共定位。结论:大鼠脊髓发育过程中PSD-95在基因和蛋白水平呈现明显的时相变化,在生后发育早期主要表达在前角运动神经元和后角感觉神经元,提示PSD-95参与了神经元的发育和成熟。

阿魏酸钠对局灶性脑缺血突触后致密物质-95活化的影响

目的 :观察阿魏酸钠 (SF)对局灶性脑缺血损伤的保护作用及其对突触后致密物质 95 (PSD 95 )活化的影响。方法 :雄性 SD大鼠 4 6只 ,随机分成对照组和 SF组 (每组各 2 3只 ) ,分别于缺血时腹腔注射生理盐水 4 m l和 SF1 0 0 m g/ kg(用生理盐水 4 m l溶解 )。采用线栓法制备大脑中动脉阻闭 (MCAO)模型 ,1 6只大鼠(每组各 8只 )在脑缺血再灌注后 2 4 h神经行为学评分完成后被处死 ,取大脑行氯化三苯四唑 (TTC)染色以测量脑梗死容积 ;其他大鼠在脑缺血再灌注后的 30 m in、2 h、6 h、2 4 h和 72 h(各组每个时间点 3只 )分别被处死 ,取缺血侧和对侧皮质以及缺血侧纹状体行 Western blot分析。结果 :术后动物均存活。再灌注 2 4 h神经功能缺损评分对照组明显高于 SF组 ,SF组动物梗死容积〔(6 1 .5± 2 8.7) mm3〕明显小于对照组〔(1 6 8.1±4 2 .2 ) m m3,P<0 .0 1〕。 Western blot分析法表明 ,对照组再灌注 30 m in后 PSD 95在缺血皮质和纹状体活化显著增多并出现高峰 ,持续 72 h;在 SF治疗组 ,再灌注后 30 min PSD 95活化开始增多 ,高峰出现在 2 h,6 h后开始下降 ,而且 PSD 95活化在各时间点较对照组少 ,持续时间短。在对侧皮质未发现 PSD 95的活化。结论 :SF对局灶性脑缺血损伤有神经保护作用 。

醒神益智颗粒对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马突触后致密蛋白95及突触蛋白表达的影响

目的探讨醒神益智颗粒对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力及海马突触后致密蛋白95(PSD95)及突触蛋白(SYN)表达的影响。方法选取45只SD大鼠,采用随机数字表法分为对照组(15只)、VD组(15只)和治疗组(15只)。VD组和治疗组采用改良的间断结扎颈总动脉建立VD模型,治疗组大鼠模型制作后给予醒神益智颗粒治疗。采用Morris水迷宫实验检测3组大鼠的学习记忆能力,免疫组织化学染色检测海马CA1区PSD95及SYN蛋白的表达情况。结果与对照组大鼠相比,实验第1天、第3天及第5天,VD组大鼠逃避潜伏期[(58.3±17.9),(29.3±7.6)和(17.4±8.7)]显著提高;实验1周、4周及8周,海马PSD95[(28.25±5.09),(30.74±5.16)和(32.34±5.43)]、SYN[(12.70±6.20),(15.74±6.27)和(22.11±6.34)]蛋白水平的表达显著降低;与VD组大鼠比,实验第1天、第3天及第5天,治疗组大鼠逃避潜伏期[(55.7±17.1),(21.4±7.9)和(9.4±4.2)]显著降低;实验1周、4周及8周,治疗组海马PSD95[(35.63±3.38),(37.84±3.57)和(39.53±3.67)]及SYN[(25.75±5.79),(28.61±5.93)和(33.18±6.16)]蛋白水平的表达显著上升。与对照组相比,VD组大鼠海马SYN和PSD95表达显著减少(P<0.05);与VD组相比,治疗组大鼠海马SYN和PSD5表达显著增加(P<0.05),但仍低于对照组。结论醒神益智颗粒可显著改善VD大鼠学习记忆功能,提高大鼠突触可塑性,其发挥神经保护作用可能与增加海马区SYN及PSD-95的表达相关。

逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症小鼠海马神经元突触后致密蛋白95表达的影响

目的观察逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症(BCRD)小鼠海马神经元突触后致密蛋白95(PSD95)的影响,探讨其对海马组织的可能保护机制。方法腋下注射4T1炎性乳腺癌细胞联合背部皮下注射皮质酮建立BCRD小鼠模型。随机分为模型组、紫杉醇组、紫杉醇+氟西汀组、逍遥抗癌解郁方组、紫杉醇+逍遥抗癌解郁方组,另取未造模BALB/c小鼠作为正常组。采用悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为,HE染色观察小鼠海马和乳腺肿瘤病理变化,免疫组化染色和Western blot检测小鼠海马PSD95的表达。结果与正常组比较,模型组小鼠悬尾实验、强迫游泳实验不动时间显著增加(P<0.01),海马结构损伤明显,PSD95表达水平显著降低(P<0.01);给予逍遥抗癌解郁方干预后,模型小鼠悬尾实验、强迫游泳实验不动时间明显减少(P<0.05),海马结构损伤得以恢复,PSD95表达显著升高(P<0.01),联合紫杉醇出现肿瘤细胞大面积坏死。结论逍遥抗癌解郁方可改善BCRD小鼠抑郁症状,有效辅助化疗药物抑制乳腺肿瘤增殖,并通过上调突触可塑性相关蛋白PSD95的表达,保护海马组织。

突触内与突触外NMDA受体在β-淀粉样蛋白减少海马神经元突触后密度蛋白-95表达中的作用

目的研究可溶性Aβ寡聚体在海马神经元中对突触蛋白表达的影响。方法用免疫细胞化学方法检测在NMDA拮抗剂与激动剂作用下,Aβ25～35对突触后密度蛋白(PSD-95)表达的影响。结果Aβ25～35引起的PSD-95减少具有时间、剂量依赖性。PSD-95的减少可被非特异性NMDA受体拮抗剂(MK801)缓解;突触外NMDA受体被阻断时,也可显著缓解;而在突触内NMDA受体被阻断时,无显著性改变。结论Aβ引起的PSD-95减少依赖NMDA受体活性,突触外NMDA受体可能参与Aβ诱导突触蛋白降解。

突触后致密物蛋白质95基因沉默及对神经病理性疼痛大鼠疼痛行为的干预

目的评估小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对突触后致密物蛋白质95(postsynaptic density protein95,PSD-95)基因的沉默效率及PSD-95基因沉默对谷氨酸诱导的神经细胞毒性与信号转导的影响,观察用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默大鼠脊髓PSD-95基因治疗神经病理性疼痛的效果。方法用神经母细胞瘤/大鼠神经胶质细胞瘤杂交瘤细胞(NG108-15细胞)筛选大鼠PSD-95基因特异的siRNA,并用谷氨酸刺激PSD-95基因沉默的NG108-15细胞,检测细胞生长活力与信号通路蛋白质表达与磷酸化的改变。建立大鼠神经病理性疼痛的坐骨神经慢性压迫(chronic constrictioni njury,CCI)模型,预防性及治疗性鞘内给予PSD-95siRNA,留取脊髓标本,实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)分析PSD-95 mRNA表达水平,并测定大鼠后足机械痛阈及热痛阈的变化。结果序列特异性最高的siRNA在最佳转染条件下使PSD-95基因表达水平下降91.5%;PSD-95基因沉默既可增强神经细胞对谷氨酸毒性的耐受能力,又可抑制Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白质激酶IIα(CaMKIIα)异构型磷酸化。正常大鼠鞘内注射PSD-95siRNA可降低大鼠脊髓背角PSD-95mRNA的表达水平38%(P<0.05),但对痛阈无显著影响;CCI模型大鼠鞘内注射PSD-95 siRNA可明显缓解神经病理性疼痛。结论 PSD-95基因在神经病理性疼痛的发生中起重要作用。鞘内注射PSD-95siRNA可以显著缓解CCI模型大鼠机械性和热痛觉过敏,PSD-95 siRNA可能成为有效控制神经病理性疼痛的基因治疗方法。