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基于竞争性杂交方法的猪-肠道微生物特异性互作靶点发掘 被引量:1
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作者 樊丽华 莫虹斐 +2 位作者 张晓峰 帅江冰 陈青 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期163-172,共10页
动物肠道中存在着一些参与猪肠道微生物互作的基因,这些基因具有一定的宿主特异性,利用其设计分子标记能准确识别粪便污染来源。该文共采集6个物种(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅)的145个粪便样品,提取其DNA后利用竞争性杂交的基因片段富集方... 动物肠道中存在着一些参与猪肠道微生物互作的基因,这些基因具有一定的宿主特异性,利用其设计分子标记能准确识别粪便污染来源。该文共采集6个物种(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅)的145个粪便样品,提取其DNA后利用竞争性杂交的基因片段富集方法(genome fragment enrichment,GFE),靶向筛选参与猪肠道微生物互作的特异性基因。经BLASTX分析发现,82%的猪特异性非冗余DNA片段存在相似序列,以拟杆菌纲(Bacteroidetes)(43.2%)、梭菌纲(Clostridia)(19.5%)、芽孢杆菌纲(Bacilli)(8.6%)相似序列为主。从蛋白质功能方面分析,61.5%的非冗余序列功能明确,有7.6%的序列与信息贮存及加工有关,12.8%的序列与细胞加工及信息传导有关,22%的序列与代谢有关,其中,碳水化合物和氨基酸的转移代谢相关序列含量最为丰富,均占总特异性序列的6.3%。研究发现,能够编码拟杆菌纲(Bacteroidetes)和梭菌纲(Clostridials)等表面蛋白、膜分泌蛋白及碳水化合物代谢蛋白的相关基因可作为猪特异性分子标记筛选的靶点。 展开更多
关键词 非点源污染 竞争性杂交 特异性基因组片段富集 功能注释 猪特异性分子标记
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猪粪便污染特异性分子标记筛选及其PCR检测方法的建立
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作者 樊丽华 帅江冰 +5 位作者 莫虹斐 曾若雪 金晨晨 张晓峰 陈青 何永强 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期2085-2091,共7页
肠道微生物群落在与其宿主长期协同进化过程中会形成大量的宿主-肠道微生物互作基因,这些互作基因具有一定的宿主肠道微生物特异性,利用其设计分子标记能有效识别粪便污染源.本研究首次利用竞争性杂交的方法富集猪粪便特异性基因,从中... 肠道微生物群落在与其宿主长期协同进化过程中会形成大量的宿主-肠道微生物互作基因,这些互作基因具有一定的宿主肠道微生物特异性,利用其设计分子标记能有效识别粪便污染源.本研究首次利用竞争性杂交的方法富集猪粪便特异性基因,从中筛选出具有猪粪便特异性的基因片段,以此设计引物并建立相应的PCR检测方法,并对采集样进行应用调查.竞争性杂交富集的猪粪便特异性基因文库以拟杆菌群(Bacteroidetes)(43.2%)和梭状杆菌群(Clostridia)(19.5%)相似序列为主,其蛋白功能主要分为3大类:与信息贮存与加工有关(7.6%),与细胞加工及信息传导有关(12.8%)以及与代谢有关(22.0%).进一步针对功能蛋白序列筛选宿主粪便特异性分子标记.分析表明序列3-53-2对应引物可作为猪粪便污染的特异性分子标记,针对其建立的常规PCR方法对粪便DNA的检出限可低至0.01 ng·μL-1,且对实际样品具有较高的应用灵敏性(97%)和特异性.进一步对可能受污染水样进行猪粪便污染特异性检测,结果显示不同地区的阳性检出率高达75%~100%,证明了此方法的有效性,可为研究微生物示踪技术在非点源污染方面的应用提供一定的基础数据. 展开更多
关键词 竞争性杂交 宿主-微生物互作基因 宿主粪便特异性分子标记 常规PCR
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Interspecific competition, hybridization, and reproductive isolation in secondary contact: missing perspectives on males and females 被引量:2
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作者 Sara E. LIPSHUTZ 《Current Zoology》 SCIE CAS CSCD 2018年第1期75-88,共14页
Research on sexual selection and hybridization has focused on female mate choice and male-male competition. While the evolutionary outcomes of interspecific female preference have been well explored, we are now gainin... Research on sexual selection and hybridization has focused on female mate choice and male-male competition. While the evolutionary outcomes of interspecific female preference have been well explored, we are now gaining a better understanding of the processes by which male-male compe- tition between species in secondary contact promotes reproductive isolation versus hybridization. What is relatively unexplored is the interaction between female choice and male competition, as they can oppose one another or align with similar outcomes for reproductive isolation. The role of female-female competition in hybridization is also not well understood, but could operate similarly to male-male competition in polyandrous and other systems where costs to heterospecific mating are low for females. Reproductive competition between either sex of sympatric species can cause the divergence and/or convergence of sexual signals and recognition, which in turn influences the likelihood for interspecific mating. Future work on species interactions in secondary contact should test the relative influences of both mate choice and competition for mates on hybridization outcomes, and should not ignore the possibilities that females can compete over mating resources, and males can exercise mate choice. 展开更多
关键词 female-female competition HYBRIDIZATION male-male competition reproductive isolation sexual selection
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