血清基质金属蛋白酶-9、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体及纤溶酶原激活物抑制因子-1联合检测预测老年慢性心力衰竭患者预后的价值

目的 探讨血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)及纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)表达与老年慢性心力衰竭(CHF)患者心功能分级及预后的关系。方法 选取廊坊市中医医院收治的108例CHF患者及同期50例健康体检者分别作为研究组和对照组。采集受试者血液标本,测定血清MMP-9、suPAR及PAI-1水平。比较不同纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级患者及不同预后患者的血清指标差异,并分析各血清指标对不良预后的预测价值。结果 与对照组相比,研究组血清MMP-9、suPAR、PAI-1水平更高,差异有统计学意义(P<0.05)。NYHA分级Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级CHF患者的血清MMP-9、suPAR、PAI-1水平呈逐渐升高趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访1年的结果显示,预后良好65例,预后不良43例,预后不良率为39.81%(43/108)。与预后良好患者相比,预后不良患者的年龄更大,合并高血压率更高,左室射血分数(LVEF)更低,左室舒张末期内径(LVEDD)、MMP-9、suPAR及PAI-1水平更高,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,年龄、MMP-9、suPAR、PAI-1均是老年CHF患者预后不良的危险因素,LVEF是老年CHF患者预后不良的保护因素(P<0.05)。血清MMP-9、suPAR、PAI-1单独检测及3项联合检测的曲线下面积(AUC)分别为0.711、0.829、0.768和0.840,3项联合检测的敏感度为88.21%,特异度为79.46%。结论 老年慢性CHF患者的血清MMP-9、suPAR、PAI-1表达水平与心功能分级及预后不良密切相关。

蛋白酶激活受体1在甲型流感病毒感染所致炎症中的作用机制

目的:探究蛋白酶激活受体1(PAR1)在甲型流感病毒(IAV)感染所致的炎症中的作用机制。方法:选取10例甲型流感病毒患者及10名健康受试者作为研究对象,比较二者血清PAR1表达水平。按照不同感染复数将人肺癌细胞系A549细胞分为control组、0.05组、0.1组、0.2组及0.4组,使用MTT法检测各组细胞活性;使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组白细胞介素6(IL-6)水平;使用RT-qPCR检测各组PAR1 mRNA水平;Western blot检测PAR1、Toll样受体3(TLR3)及核因子κB(NF-κB) p65蛋白水平。敲低PAR1或过表达TLR3后,使用Western blot检测各组细胞PAR1、TLR3、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达量。结果:PAR1在IAV感染患者血清及IAV感染的A549细胞中表达上调。与control组细胞相比,IAV感染细胞中细胞活性降低,促炎因子IL-6水平升高,且PAR1的mRNA表达水平上调。si-PAR1抑制了IAV诱导的炎症细胞因子IL-6水平的升高。TLR3过表达逆转了由si-PAR1所致的TLR3、p-NF-κB p65蛋白水平降低(P<0.05)。TLR3过表达逆转了si-PAR1所致的细胞活力和炎性因子的水平(P<0.05)。si-PAR1通过介导TLR3/NF-κB信号通路降低IAV感染所致的炎症反应。结论:敲低PAR1可通过抑制TLR3/NF-κB信号通路降低了IAV感染所致的炎症反应,发挥抗病毒作用。

张岩/毛春友教授团队揭示蛋白酶激活受体的栓配体结合和激活机制及G蛋白选择性的结构基础

2024年7月12日,浙江大学基础医学院张岩/毛春友教授团队联合上海药物研究所徐华强团队在《细胞研究》(Cell Research)上发表了题为“Structural basis of tethered agonism and G protein coupling of protease-activated receptor”的研究论文(DOI:10.1038/s41422-024-00997-2),报道了人源PAR1独特的栓配体结合激活机制和G蛋白选择性机制,为开发新型靶向蛋白酶激活受体(PAR)1的G蛋白选择性药物提供了结构基础。

基于胸腺基质淋巴细胞生成素/蛋白酶激活受体2/瞬时电位受体香草酸受体1/活化T细胞的核因子信号通路探讨麻荆止咳颗粒治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制

目的:通过麻荆止咳颗粒调控胸腺基质淋巴细胞生成素(Thymic Stromal Lymphopoietin,TSLP)/蛋白酶激活受体2(Proteinase Activated Receptor-2,PAR2)/瞬时电位感受器香草酸受体1(Transient Receptor Potential Vanilloid 1,TRPV1)/活化T细胞核因子(Nuclear Factor of Activated T cells,NFAT)信号通路的动物实验,探讨其治疗咳嗽变异性哮喘(Cough Variant Asthma,CVA)的疗效机制。方法:将豚鼠随机分为空白对照组、模型组、中药组和地塞米松组,构建CVA豚鼠模型,药物干预10天,采用辣椒素激发各组豚鼠,观察咳嗽情况;苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色法观察各组肺组织病理学变化;酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Method,ELISA)法检测各组血清TSLP含量;免疫组化染色及实时定量聚合酶链反应(quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)法检测肺组织PAR2、TRPV1、NFAT的表达。结果:与模型组对比,中药组和地塞米松组药物干预后咳嗽次数明显减少;血清TSLP含量显著降低;且肺组织病理变化较模型组明显减轻;PAR2、TRPV1和NFAT的蛋白与mRNA表达均下调。结论:麻荆止咳颗粒可通过抑制CVA模型豚鼠TSLP/PAR2/TRPV1/NFAT信号通路表达,降低气道敏感性及改善气道炎症,达到止咳效果。

低pH插入肽-蛋白酶激活受体1复合物抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的实验研究

目的观察低pH插入肽-蛋白酶激活受体1(pHLIP-P1AP)复合物对三阴性乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞增殖的影响。方法设计、合成荧光标记的pHLIP-P1AP。观察MDA-MB-231细胞与MCF-10A细胞表面蛋白酶激活受体1(PAR1)的表达情况。分析不同pH值(7.4、6.0)条件下荧光标记的pHLIP-P1AP与MDA-MB-231细胞的结合情况及其对MDA-MB-231细胞增殖的影响。结果成功合成了pHLIP-P1AP并进行荧光标记。在酸性环境下(pH 6.0),荧光标记的pHLIP-P1AP与表面高表达PAR1的MDA-MB-231细胞有较强的结合能力,可明显抑制MDA-MB-231细胞的增殖,pHLIP-P1AP为0.5μg、1μg、2μg、4μg、8μg时,细胞的增殖抑制率分别为3.39%,5.27%,14.29%,22.14%、35.69%。结论MDA-MB-231细胞表面表达大量的PAR1。pHLIP-P1AP在酸性环境下能够有效靶向MDA-MB-231细胞,并抑制MDA-MB-231细胞的生长,有望成为治疗TNBC的有价值的新型药物。

蛋白酶激活受体-1拮抗剂降低心脏骤停后综合征兔血清炎性细胞因子的水平

目的：观察蛋白酶激活受体-1（PAR-1）拮抗剂对心脏骤停后综合征（PCAS）兔血清TNF-α、MCP-1和IL-8的影响。方法大耳白兔30只，随机分为假手术组、PCAS组、PAR-1拮抗剂组。采用窒息性心脏骤停制备兔PCAS模型。 PAR-1拮抗剂组在自主循环恢复后15 min给予PAR-1拮抗剂SCH79797（25μg／kg）静脉滴注，每天一次，其余各组给予等量生理盐水。48 h取股静脉血测定血清 ALT、cTnT、Cys -C 及 NSE，以监测器官功能的变化。采用ELISA测定血清TNF-α、MCP-1及IL-8水平。结果 PAR-1拮抗剂SCH79797可明显减轻心、脑、肝、肾功能障碍。 PCAS组血清TNF-α、MCP-1和IL-8水平均明显高于假手术组（ P＜0．01）。 PAR-1拮抗剂组TNF-α、MCP-1和IL-8水平均明显低于PCAS模型组（ P＜0．05）。结论 PAR-1拮抗剂SCH79797可降低PCAS兔血清TNF-α、MCP-1和IL-8水平，改善心肺复苏后多器官功能障碍。

蛋白酶激活受体-1拮抗剂对兔心脏骤停后综合征中肾损伤的保护作用及机制

目的:探讨蛋白酶激活受体-1(PAR-1)拮抗剂对心脏骤停后综合征(PCAS)中肾损伤的影响及机制。方法:将日本大耳白兔随机分为假手术组(n=5)、PCAS组(n=10)、PAR-1拮抗剂组(n=10)。采用窒息性心脏骤停法制备兔PCAS模型。PAR-1拮抗剂组于心肺复苏后10 min给予静脉滴注PAR-1拮抗剂SCH79797(25μg/kg),其余各组给予等量生理盐水静脉滴注。72 h后取股静脉血检测血清肌酐和胱抑素C水平;取肾组织制备石蜡切片后行HE染色;采用TUNEL法测定肾脏细胞凋亡情况;应用Western blot测定肾组织半胱天冬酶(casepase)-3、细胞外调节蛋白激酶(ERK)活化情况。结果:与假手术组相比,PCAS组血清肌酐和胱抑素C水平明显上升,肾组织有大量炎性细胞浸润,凋亡细胞数显著增多,有催化活性的caspase-3裂解片段(cleaved caspase-3)表达增高,磷酸化ERK(p-ERK)表达减少(P<0.05)。与PCAS组相比,PAR-1拮抗剂组肾组织损伤减轻,血清肌酐和胱抑素C水平明显下降,凋亡细胞数减少,cleaved caspase-3表达降低,而p-ERK表达显著增高(P<0.05)。结论:PAR-1拮抗剂SCH79797能抑制PCAS兔肾组织的炎症反应和细胞凋亡,可能与ERK信号通路激活有关。

蛋白酶激活受体2激动剂诱导上皮细胞分泌MCP-1

目的 :探讨蛋白酶激活受体 (PAR) 2激动剂对人上皮细胞单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)分泌的影响 .方法 :人肺上皮细胞系A5 4 9细胞分别接种于 12孔培养板各孔内 ,并分别用不同浓度的PAR 2激动剂 ,反PAR 2激动剂进行刺激 .刺激时间为 2 ,8和 16h .用ELISA方法检测上清液中的MCP 1水平 .结果 :经过 16h的培养 ,PAR 2激动剂SLIGKV和tc LIGRLO均可引起浓度相关性MCP 1释放增加 ,tc LIGRLO引起的最大MCP 1释放量达基础分泌量的 13倍 .反PAR 2激动剂对MCP 1释放的影响较小 .时间相关曲线表明 ,PAR 2激动剂的作用从 2h开始 ,16h达高峰 .结论 :PAR 2激动剂是高效的人肺上皮细胞MCP 1的促分泌剂 .其拮抗剂有可能具有抑制呼吸道炎症的作用 .

蛛网膜下腔出血模型大鼠基底动脉蛋白酶激活受体-1的表达

目的探讨蛛网膜下腔出血(SAH)模型大鼠基底动脉PAR1表达与脑血管痉挛(CVS)之间的关系。方法 7周龄清洁级SD大鼠24只,随机数字表法分为正常组、SAH 3 d组、SAH 5 d组、SAH 7 d组,采取二次枕大池注血法建立大鼠SAH模型,观察动物行为学改变,SAH模型大鼠按照分组于术后3、5、7 d分别灌杀动物,显微镜下观察基底动脉组织学形态,并以Image-Pro Plus6.0图像分析软件测量基底动脉管腔横截面积,免疫组化检测基底动脉标本PAR1表达。结果 SAH制模术后参照Endo 4分制方法行神经功能评分SAH 3 d组中2分2只(33.3%),3分4只(66.7%);SAH 5 d组中1分3只(50%),2分3只(50%);SAH 7 d组中1分4只(66.7%),2分2只(33.3%);正常组均为1分。CVS观察:正常组无痉挛,SAH 3 d组出现基底动脉痉挛,SAH 5 d组基底动脉稍舒张,SAH 7 d组痉挛程度较3 d组加重,统计分析显示四组之间的差异有统计学意义(P<0.05),组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。PAR1免疫组织化学结果分析:正常组未见明显表达,SAH模型制作后后3、5、7 d组基底动脉PAR1有阳性表达。统计分析显示四组间PAR1平均光密度差异有统计学意义(P<0.01),组间两两比较显示正常组与SAH 3 d组、正常组与SAH 5 d组、正常组与SAH 7 d组、SAH 3 d组与SAH 5 d组、SAH 3 d组与SAH 7 d组差异具有统计学意义(P<0.01),SAH5 d组与SAH 7 d组相比差异具无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析显示PAR1平均光密度与SAH后基底动脉横截面积之间存在负相关(r为-0.779,P<0.01)。结论本实验中SAH大鼠模型基底动脉PAR1表达上调,并与CVS严重程度呈负相关关系,凝血酶受体PAR1在CVS发生发展过程中表达上调,提示凝血酶参与了SAH后CVS的病理过程。

脑血康对脑出血蛋白酶激活受体-1表达的影响

目的:探讨脑出血后蛋白酶激活受体1(PAR1)的动态表达及脑血康的干预作用。方法:72只大鼠随机分为正常组、脑出血模型6h、24h、3d、7d组和脑血康治疗6h、24h、3d、7d组。用S型胶原酶诱导大鼠脑出血模型。免疫组化方法测定各时间点大鼠脑出血后血肿周围水肿组织PAR1蛋白表达;逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测PAR1mRNA表达。结果:正常组大鼠大脑PAR1蛋白和PAR1mRNA表达轻度阳性;模型组6h时PAR1蛋白和PAR1mRNA表达强度开始增强,24h表达进一步增加,于3d达到高峰,然后开始下降,7d时明显下降。在6h、24h、3d、7d各时间点,模型组和脑血康组PAR1阳性细胞数、PAR1mRNA吸光度(A)比值升高,与正常组比较差异均有显著性(P<0.05或P<0.01);脑血康组PAR1阳性细胞数、PAR1mRNAA比值降低,与模型组各时间点比较差异均有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:脑出血后PAR1受到凝血酶的持续活化,脑出血后凝血酶的作用可能通过PAR1介导;脑血康可抑制PAR1活化,这可能是脑血康治疗脑出血的主要机制之一。

蛋白酶激活受体1激动剂对神经病理性疼痛大鼠行为学的影响

目的探讨蛋白酶激活受体1激动剂对神经病理性疼痛(NP)大鼠行为学的影响。方法选取SD大鼠40例,采用随机数表法分为对照组、假手术组(Sham组)、坐骨神经慢性结扎损伤(CCI)组和CCI+PAR1组,每组10只。CCI大鼠建模:结扎左结扎坐骨神经中段,假手术组只钝性分离肌肉,使坐骨神经充分暴露而不结扎。分别于术前、术后7 d观察各组大鼠行为学变化,并采用电子vonFrey测痛仪测定各组大鼠缩足反射阈值(MWT)。结果对照组和假手术组大鼠未观察到行为学变化。CCI大鼠术后健康状况均良好,体质量未见明显减轻,毛发光泽性良好,进食饮水习惯未见明显变化。建模术后,大鼠逐渐出现痛敏体征。术后CCI+PAR1组大鼠的自发疼痛行为明显减少。CCI大鼠在术后第1天时左后肢对机械刺激的敏感性增加,机械触压痛阈值下降。CCI组术后第7天左侧后肢机械触压痛阈值为(26.3±4.0) g,与假手术组的(48.1±0.5) g比较下降45.3%,差异有统计学意义(P<0.05);对照组大鼠在各时间点与sham组及术前相比差异均无统计学意义(P>0.05);CCI+PAR1组与CCI组相比,大鼠术后痛阈值明显增加,术后7 d左侧后肢机械触压痛阈值为(36.7±5.5) g,比CCI组痛阈提高39.5%,但与术前痛阈(47.5±1.4) g相比,差异仍有统计学意义(P<0.05)。结论 PAR1受体激动剂可减轻NP大鼠左后肢对机械刺激的敏感性,提高机械触压痛阈值。

大鼠脑出血后蛋白酶激活受体-1与细胞凋亡关系的实验研究

目的研究大鼠脑出血(ICH)后血肿周围蛋白酶激活受体-1(PAR-1)、神经细胞凋亡等的表达。方法将60只SD大鼠分为假手术组和ICH组,采用立体定位仪定位注射自体不凝血制造大鼠ICH模型,分别于术后6h、1d、2d、3d、5d、7d处死,免疫组织化学法检测血肿周围PAR-1、TUNEL阳性细胞(凋亡细胞)数及小胶质细胞的表达。结果假手术组PAR-1少量表达,偶见凋亡细胞;ICH组自6h起PAR-1、凋亡细胞及小胶质细胞数量大量增加,3d达高峰,PAR-1在7d基本降至假手术组水平,但凋亡细胞、小胶质细胞仍处于较高水平,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ICH后血肿周围存在大量PAR-1表达上调、神经细胞凋亡、小胶质细胞增加。

尖锐湿疣中蛋白酶激活受体-1表达与血管增生的关系及意义

目的:探讨尖锐湿疣(CA)组织中蛋白酶激活受体(protease-activated receptor,PAR)-1的表达与血管生成的关系及意义。方法:对28例CA患者病变组织行常规组织病理切片和苏木精-伊红染色,并对其进行血管计数,应用反转录(RT)-PCR和免疫组化法检测PAR-1的表达情况,同时以17份正常包皮组织作为对照。结果:CA皮损组织的血管数比正常包皮组织明显增多(t=5.192,P<0.001);CA皮损组织中PAR-1mRNA平均表达水平显著高于正常包皮组织(t=7.26,P<0.001);PAR-1蛋白在CA组织中的表达较正常包皮组织显著增强(χ2=16.218,P<0.001),PAR-1在CA皮损中从基底层至角质层下方均有表达,而正常包皮仅在基底层有弱阳性表达,且PAR-1蛋白表达与血管数存在显著正相关(r=0.823,P<0.001)。结论:PAR-1在CA皮损组织中的过度表达以及与血管数的正相关提示PAR-1与血管生成有关,PAR-1在CA发病中起一定的作用。

蛋白酶激活受体-1在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的:观察并探讨蛋白酶激活受体-1(proteinase activated receptor-1,PAR-1)在结肠癌组织中表达的临床意义。方法:用免疫组织化学方法检测65例结肠癌及其癌旁肠组织中PAR-1的表达情况。结果:PAR-1的表达在结肠癌组织中高于癌旁肠组织,随肌壁癌组织浸润度和淋巴结转移程度的提升而增高,均有显著差异(P<0.01);PAR-1的表达虽随着癌分化程度降低而增高,但无显著差异(P>0.05)。结论:PAR-1的表达与结肠癌发展及临床病理分期有关,可作为结肠癌临床预后指标之一。

蛋白酶激活受体拮抗剂在抗血小板领域的研究进展

蛋白酶激活受体(protease activated receptors,PARs)是G蛋白偶联受体的家族成员之一。研究发现蛋白酶激活受体可经凝血酶激活诱导血小板的聚集,参与血栓形成过程。人类血小板主要表达蛋白酶激活受体-1和蛋白酶激活受体-4两种受体,因此蛋白酶激活受体-1和蛋白酶激活受体-4可作为抗血小板药物的新靶点。本文介绍了凝血酶诱导蛋白酶激活受体-1、蛋白酶激活受体-4活化的作用机制,并对近年来蛋白酶激活受体-1和蛋白酶激活受体-4小分子拮抗剂的结构、药理活性的研究进展进行总结。

蛋白酶激活受体1介导人肺上皮细胞分泌MCP-1

目的探讨蛋白酶激活受体1(protease-activated receptors1,PAR1)激动肽和凝血酶对人肺上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)分泌的影响。方法人肺上皮细胞系A549细胞分别接种于12孔培养板各孔内,并分别用不同浓度的PAR1激动肽SFLLR和反PAR1激动肽RLLFS以及不同浓度的凝血酶和/或凝血酶抑制剂水蛭素进行刺激,刺激时间为2、16 h。用ELISA方法检测上清液中的MCP-1水平。结果经过16 h的培养,PAR1激动剂SFLLR可引起浓度相关性MCP-1的释放增加,增加到300μmol/L时诱导MCP-1的释放量比基础分泌量增加了近12倍,反PAR1激动剂RLLFS不能引起MCP-1的释放增加。凝血酶也可引起浓度相关性MCP-1释放,凝血酶在浓度3 000 U/L时就可引起MCP-1释放量增加,10 000 U/L时诱导MCP-1的释放量达高峰,为基础分泌量的5倍。凝血酶抑制剂水蛭素可以抑制凝血酶对MCP-1的释放作用。时间相关曲线表明,从2 h起即可引起PAR1介导的MCP-1释放增加,16 h达高峰。结论PAR1激动肽和凝血酶可促进人肺上皮细胞分泌MCP-1,PAR1拮抗剂和凝血酶抑制剂可能具有抗炎作用。

星形细胞肿瘤血管内皮生长因子和蛋白酶激活受体-1的表达

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和蛋白酶激活受体-1(PAR-1)的表达与星形细胞肿瘤病理分级的关系以及两者的相关性。方法:用半定量RT-PCR方法检测50例星形细胞肿瘤和10例正常脑组织中VEGF和PAR-1的表达水平。结果:在正常脑组织中VEGF和PAR-1的表达与星形细胞肿瘤比较差异有统计学意义;VEGF和PAR-1在星形细胞肿瘤Ⅱ级、Ⅲ级与Ⅳ级中的表达水平,差别具有统计学意义。经Spearm an等级相关分析VEGF和PAR-1两者的表达指数正相关(r=0.355,P<0.05)。结论:VEGF和PAR-1的表达与星形细胞肿瘤的侵袭性密切相关,可作为临床判断胶质瘤恶性程度、侵袭性的重要指标。

大承气汤对心脏骤停后综合征兔心肺组织蛋白酶激活受体1活性的抑制作用

目的:探讨大承气汤对心脏骤停后综合征(PCAS)兔心、肺组织蛋白酶激活受体1(PAR-1)激活的影响。方法:采用窒息性心脏骤停制备兔PCAS模型,复苏成功兔随机分为PCAS组、大承气汤组,另选5只健康兔作为正常对照组。在ROSC后15 min,大承气汤组给予大承气汤15 g/(kg·d)灌胃。48 h取动物血液检测,后处死动物,取心肺组织,采用Western blot测定PAR-1蛋白含量。结果:PCAS组兔心肺组织中PAR-1蛋白含量降低(均P<0.01)。大承气汤组心肺组织中PAR-1蛋白含量较PCAS组升高(P<0.05)。结论:PCAS发生时,心肺组织存在PAR-1过度激活,大承气汤对PCAS兔PAR1激活有抑制作用。

蛋白酶激活受体-1在肺纤维化大鼠肺组织中的表达

目的探讨在博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型肺组织中蛋白酶激活受体-1的表达。方法将体重180-250g的SD清洁级雄性大鼠48只,按完全随机方法分为对照组及博莱霉素(BLM)组,BLM组大鼠气管内注入0.9-1.25ml博莱霉素A5(BLMA5,5mg/kg),对照组在同样条件下向气管内注入等量的生理盐水。两组动物于气管灌注后第7、14、28、40d分别随机处死6只。组化方法检测肺组织PAR-1的表达;Masson染色检测肺组织纤维化,按Ashcroft评分法,评估肺纤维化的严重程度,结果(1)对照组无明显胶原沉积,BLM组随着时间的延长,可见明显胶原沉积,BLM组/对照组两组在第7、14、28、40d肺间质纤维化Ashcroft评分分别为24±3.72/3±0.63、46.4±4.09/4±0.63、69.3±3.78/3±1.41、64.5±5.96/3±1.67,两组有显著性差异(P﹤0.05)。(2)BLM组/对照组两组在第7、14、28、40d平均每高倍镜视野肺组织PAR-1阳性细胞数分别为:9.93±1.47/2.5±1.52、16.67±2.16/1.83±1.17、17.67±2.16/2.17±0.75、16.0±2.28/2.17±1.17。BLM组各时间点肺组织PAR-1阳性细胞数较正常对照组增多,两组具有显著统计学差异(P﹤0.05)。(3)肺间质纤维化程度与PAR-1阳性细胞数呈正相关(r=0.76)。结论博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型肺组织中蛋白酶激活受体-1的表达增强;蛋白酶激活受体-1的表达可能在博来霉素所致肺纤维化中其重要作用。

蛋白酶激活受体-2激活剂对人脐静脉内皮细胞释放IL-1α的影响

目的研究蛋白酶激活受体-2(protease-activated receptor-2,PAR2)激活剂对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)释放白细胞介素(IL)-1α的影响。方法分离、培养原代HU-VECs。胰蛋白酶和PAR2激活肽刺激HUVECs 16 h,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HUVECs培养上清中的IL-1α水平。结果胰蛋白酶和PAR2激活肽诱导HUVECs培养上清中IL-1α水平显著升高,升高水平分别为基础水平的4.8和4.6倍。相应浓度的对照肽则不能够诱导HUVECs释放IL-1α。大豆胰蛋白酶抑制剂和PAR2抑制肽能够显著抑制胰蛋白酶和PAR2激活肽诱导的IL-1α分泌。结论 PAR2激活剂能够通过诱导HUVECs释放IL-1α参与炎症反应。