用竞争结合法检测HLAⅠ类分子抗原呈递能力

目的 建立弱酸处理后荧光素标记肽竞争结合法分析MHCⅠ类分子抗原呈递能力的方法 ,并评估其实用性。方法 pH2 .7～ 3.1的柠檬酸缓冲液对B淋巴母细胞进行短时处理后 ,即用IMDM培养液中和pH ,然后加入β2微球蛋白、荧光素标记的 9肽及竞争肽共同孵育 ,FACs检测细胞表面的平均荧光强度 ,以达到 5 0 %抑制所需的竞争肽浓度作为衡量竞争肽与MHC分子结合能力的指标。结果 通过不同pH的柠檬酸缓冲液处理、处理后不同时间加 β2微球蛋白和 /或荧光素标记肽、加入不同稀释度的竞争肽等角度 ,对方法进行评估 ,结果显示本方法操作简便、结果可靠、非特异性吸附小。结论 在排除其它MHCⅠ类分子的干扰后 ,本方法适合在国情条件下广泛开展MHCⅠ类分子抗原呈递能力及T细胞肽表位筛选等研究。

竞争性蛋白结合法检测囊尾蚴病患者血浆中cAMP含量

人体感染囊尾蚴后,患者血清中具有高水平的总IgE;并与特异性IgE同步增加。经间接非特异性及特异性肥大细胞脱颗粒试验进一步证实,囊尾蚴病患者的血清中确实存在特异性IgE,致敏的肥大细胞在囊尾蚴抗原作用下发生脱颗粒反应;释放出组织胺等生物活性物质。鉴于IgE及其介导的免疫反应还涉及cAMP的含量,因此。