血吸虫肺期童虫抗原的应用前景

候选抗原分子的筛选仍然是血吸虫病疫苗研究的重要内容之一。本文就血吸虫童虫抗原研究进展进行了综述 。

基于可溶性童虫抗原(SSA)的IHA法早期诊断日本血吸虫病的初步研究

目的建立基于可溶性童虫抗原(SSA)早期诊断日本血吸虫病的IHA法。方法收集日本血吸虫感染后第13d童虫,制备SSA;探索SSA致敏红细胞的最佳体积比例以及灭活补体阴性兔血清的最佳封闭浓度,制备基于SSA的IHA法诊断试剂(以下简称"SSA-IHA法"),并检测日本血吸虫感染前及感染后第1、2、3、4、5、6周兔血清。结果 SSA致敏红细胞的最佳体积比例为1:1,灭活补体阴性兔血清的最佳封闭浓度(V/V)为3%。SSA-IHA法检测日本血吸虫感染前及感染后第1、2、3、4、5、6周兔血清的阳性率依次为0%、0%、0%、90.91%、100%、100%和100%。结论基于可溶性童虫抗原(SSA)的IHA法在早期诊断日本血吸虫病方面具有一定的价值。

日本血吸虫可溶性虫卵和童虫抗原刺激RAW264.7巨噬细胞的初步分析

本文采用不同浓度的日本血吸虫虫卵抗原（SEA）、童虫抗原（SSA）刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264．7，结果显示SEA抗原能明显刺激巨噬细胞增殖分化（SI〉2），且多数巨噬细胞形态发生了改变并出现细胞死亡。实时定量荧光PCR结果显示，在SEA、SSA抗原刺激下，巨噬细胞TNF-α、IL-6、IL，10和CCL2的mRNA表达量都明显高于对照组。结果提示血吸虫抗原对巨噬细胞的刺激作用可能在宿主抗血吸虫感染的先天免疫应答和虫卵肉芽肿形成免疫调节中发挥了一定的作用。

血吸虫童虫抗原免疫酶染法诊断血吸虫病的初步研究

童虫抗原免疫酶染法（ＩＰＡ）诊断日本血吸虫病，检测５５例急性血吸虫病和８３例慢性血吸虫病患者阳性率分别为：９２．６％和８１．９％，５３例正常人血清假阳性率为５．６％，ＩＰＡ在检出率上与ＩＨＡ和ＥＬＩＳＡ符合程度高，并有较好的敏感性和特异性，其抗原制备简单，标本易保存，适合于现场应用。

筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原的研究

目的筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原及其表位。方法制备日本血吸虫可溶性童虫抗原(SSA),经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Westernblot后分别与日本血吸虫感染后10、21、42天兔血清进行酶联免疫印迹试验(EITB),筛选出能被早期感染血清所识别的抗原组分。用日本血吸虫感染后21天血清从噬菌体12随机肽库中筛选、富集、纯化、扩增与早期感染兔血清有高亲和力的噬菌体克隆,经动物实验初步评估其对日本血吸虫感染的早期诊断效果。结果SDS-PAGE显示SSA的总条带数多于可溶性成虫抗原(SAWA),但大多为共同抗原。EITB结果显示SSA共出现12条早期反应抗原带,其中97kDa和47kDa抗原分子只能被感染后10天兔血清特异性识别;SAWA仅出现7条反应带,未显示只能被感染后10天兔血清识别的期特异性抗原分子。挑选出3个与感染后21天兔血清具有高亲和力的单克隆噬菌体,混合后分别用于检测感染日本血吸虫10、21d鼠血清中IgG特异性抗体,阳性检出率分别为48.8%和64.4%。结论SSA中的97kDa和44kDa抗原分子及3个噬菌体随机12肽抗原模拟表位可能具有日本血吸虫感染早期诊断价值。

胶体金SPA双联抗体检测试纸条法诊断日本血吸虫病的初步研究

目的建立一种简便快速且可同时检测两种抗体的试纸条免疫诊断方法。方法用可溶性虫卵抗原(SEA)、童虫抗原(SSA)作检测抗原,建立胶体金SPA双联抗体检测试纸条法(F-SPA-dipstick),并与可溶性虫卵抗原胶体金染料试纸条法(SEA-DDIA)及间接血凝试验(IHA)作对比检测观察。结果用F-SPA-dipstick法检测急性血吸虫病人血清32份、慢性血吸虫病人血清78份,其敏感性分别为100%和94.87%;检测健康人血清85份,其特异性为97.65%;检测肝吸虫病人血清和肺吸虫病人各35份,其交叉反应率分别为2.86%和5.71%。检测结果与SEA-DDIA及IHA相似。结论F-SPA-dipstick法可作为一种血吸虫病快速诊断方法,具有较高的敏感性和特异性,操作简便快速,不需特殊仪器设备,有着较好的开发应用前景。