胃癌细胞中端粒位置效应研究

目的 研究插入端粒片段的荧光素酶报道质粒在胃癌细胞的转染及它对相邻荧光素酶报道基因表达的影响,探讨胃癌细胞中端粒位置效应的存在。方法 将pTET OFF调节质粒和携带荧光素酶报道基因的pTRE2 Hyg Luciferase反应质粒共转染胃癌细胞SGC790 1,经强力霉素(deoxycyline)诱导2 4h后检测报道基因活性,观察强力霉素诱导的抑制反应。然后将插入有端粒片段的荧光素酶报道质粒pBX质粒和对照质粒pBX ntf (noteloemerefragment)分别与pTET OFF调节质粒共转染细胞,在强力霉素诱导下,检测报道基因活性的改变。结果 共转染pTET OFF和pTRE Hyg Luciferase质粒的SGC790 1细胞,在强力霉素作用下荧光素酶报道基因的活性逐渐降低。强力霉素诱导分别共转染有pTET OFF和pBX质粒或pTET OFF和pBX ntf的细胞时,前者荧光素酶活性较后者降低4倍。结论 转染TET OFF基因表达调控系统的胃癌细胞SGC790 1受强力霉素的诱导抑制;转染入胃癌细胞中的端粒片段降低了存在它附近荧光素酶报道基因的表达水平。

端粒位置效应与人类衰老

端粒随细胞分裂进行性缩短不但防止了人类肿瘤的发展,而且与人类的衰老密切相关。另外,端粒中存在一种特殊的现象:端粒位置效应,它首先在酵母中发现,表现为靠近端粒序列附近的基因表达因端粒的位置效应而沉默。在人类细胞中也存在端粒位置效应,并且有多种因子参与此效应,它可能对细胞生长停止、肿瘤以及衰老发生时等许多随端粒缩短密切相关基因的程序性表达产生重要作用。