针刺对端粒酶敲除小鼠大脑海马区、皮质区Trk-B信号调节激酶表达的影响

目的:探讨临床常用的不同针刺方法,手针、电针干预对端粒酶敲除小鼠大脑海马区、皮质区Trk-B信号调节激酶表达的影响。方法:端粒酶敲除小鼠按随机数字表法分为手针组、电针组、空白对照组各6只。电针组使用一对华佗牌不锈钢针具(0.3 mm×0.25 mm)对双侧足三里进行针刺干预,交替频率,强度0.5~1.2 mA,幅度2/100 HZ,每日30 min,连续干预7 d。手针组使用华佗牌不锈钢针具(0.3 mm×0.25 mm)对双侧足三里进行针刺干预,每5 min捻转1次,每次30 min,空白对照组不做任何干预。采用Western blot法检测大脑海马和皮质区域Trk-B的表达情况。结果:手针组小鼠在干预后自主活动程度较空白组均有所增加,海马区电针组与空白组对照组比较Trk-B表达明显增高;手针组与空白对照组比较Trk-B表达明显增高;但在皮质区电针组与手针组比较Trk-B表达明显降低;电针组与空白对照组比较表达明显降低。结论:电针对不同脑区Trk-B表达的影响不同,电针可促进海马区Trk-B的表达,相同的穴位刺激电针和手针的作用机制不同,可能与酪氨酸B(Trk-B)信号调节激酶表达有关。

端粒酶基因敲除小鼠行为学特征的增龄性变化研究

目的通过对端粒酶基因敲除小鼠衰老特点的初步认识,为衰老领域的相关研究提供实验依据。方法分别选用2、3、5、7和9月龄的纯合子与同月龄的野生型端粒酶基因敲除小鼠相对照,从老化度评分、Morris水迷宫实验和自主活动实验等方面观察纯合子小鼠行为活动的增龄性变化。结果与野生型小鼠比较,纯合子小鼠随月龄增加其老化度评分呈升高趋势,且5、7和9月龄的老化度评分高于同龄野生型小鼠(P<0.05);Morris水迷宫实验中,相比较野生型小鼠,纯合子小鼠定位航行试验的逃避潜伏期随月龄增加而有增长趋势,且7和9月龄的逃避潜伏期长于同龄野生型小鼠(P<0.05),而在空间探索试验的逃避潜伏期目标象限时间随月龄增加而呈下降趋势,与野生型小鼠比较差异有统计学意义(P<0.05);自主活动实验结果显示,2、3和5月龄纯合子小鼠固定时间内自主活动次数与同龄野生型小鼠比较无显著变化,而7和9月龄纯合子小鼠与同龄野生型小鼠比较固定时间内自主活动次数减少(P<0.05)。结论与同龄野生型端粒酶基因敲除小鼠比较,纯合子端粒酶基因敲除小鼠随月龄增大,其行为活动出现明显增龄性变化,表现出系列衰老特征,尤其7和9月龄衰老表现更为明显。

针刺足三里对端粒酶基因敲除小鼠免疫细胞因子表达影响的研究

目的:观察针刺足三里对端粒酶基因敲除小鼠免疫功能的影响。方法:将经聚合酶链式反应鉴定基因型后的端粒酶基因敲除小鼠,且月龄为3个月的纯合子型端粒酶基因敲除小鼠随机分为空白组、足三里组和非经非穴组,每组6只,共18只,空白组仅给予抓取动作,足三里组和非经非穴组采用针刺干预。指标检测采用细胞因子芯片技术检测小鼠血清中IL-6、IP-10、MCP-1、KC等的达水平。结果:针刺组细胞因子IL-6表达大于空白组(P<0.05);针刺足三里组细胞因子IP-10表达升高(P<0.05);针刺足三里mcp-1表达没有变化,非穴组表达下降(P<0.05);针刺足三里组细胞因子KC表达下降(P<0.05);以上具有统计学意义。针刺足三里组、非穴组和空白组细胞因子IFN-γ及G-CSF(P>0.05),无统计学意义。结论:针刺足三里对端粒酶基因敲除小鼠血清中的细胞因子IL-6、IP-10、MCP-1、KC存在调节作用。

针刺足三里对端粒酶基因敲除小鼠小脑BDNF及其受体表达的影响

目的探讨针刺对Terc-/-小鼠小脑脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体表达的影响。方法采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定端粒酶基因敲除小鼠的基因表型,选取3-4月龄纯合子型端粒酶基因敲除小鼠18只,随机分为空白组、足三里组和非经非穴组,每组6只,空白组仅模拟抓取动作,足三里组和非经非穴组进行针刺干预,每日1次,连续干预4天。指标检测采用Western Blot检测小鼠小脑BDNF表达量和免疫组化检测小鼠小脑BDNF受体酪氨酸激酶受体B(Tyrosine Receptor Kinase B,Trk-B)和P75神经营养因子受体(the p75 neurotrophin receptor,P75NTR)蛋白的表达水平。结果经针刺干预后,Western Blot检测结果显示,足三里组较空白组小脑BDNF的表达增强,差异有统计学意义(P<0.05);同时受体Trk-B的表达经免疫组化检测在小脑的表达呈同步升高且有统计学意义(P<0.05),但其另一受体P75NTR则无显著性差异(P>0.05)。结论针刺能促进端粒酶基因敲除小鼠小脑BDNF和Trk-B的表达,通过BDNF/Trk-B信号转导途径发挥其神经生物学效应。