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适用于棉花荧光原位杂交的DNA纤维高效制备技术 被引量:5
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作者 彭仁海 宋国立 +5 位作者 刘方 黎绍惠 王春英 张香娣 王玉红 王坤波 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期412-417,共6页
棉花富含酚类和多糖等高分子次生化合物,细胞质浓厚,且染色体形态小、数目多、制片困难,至今还未见棉花DNA纤维制备方面的报道。本研究用"刀切引流法",在含有Triton X-100和PVP40的冰冷细胞核提取缓冲液中,用锋利的刀片切割... 棉花富含酚类和多糖等高分子次生化合物,细胞质浓厚,且染色体形态小、数目多、制片困难,至今还未见棉花DNA纤维制备方面的报道。本研究用"刀切引流法",在含有Triton X-100和PVP40的冰冷细胞核提取缓冲液中,用锋利的刀片切割发育一周的棉花黄化子叶以释放棉花细胞核,所得细胞核干净完整杂质少,不需要研磨和巯基乙醇等处理,方便快捷无毒害,成功率达到100%。细胞核在室温下经温和碱裂解去除染色质上的蛋白质后,以前端导引裂解液铺展载玻片,即"引流法"拉伸制备DNA纤维,避免了液体表面张力的影响,消除了因载玻片推抹用力不均而导致的DNA纤维堆积和断裂,所制备的DNA纤维平直完整、伸展程度均匀、背景清晰。用基因组和45S rDNA分别标记探针进行杂交,结果表明所制备的棉花DNA纤维适用于荧光原位杂交。本研究探索出一套简单、高效、快捷、无毒害的适宜于棉花荧光原位杂交的DNA纤维制备技术,必将为棉花基因组研究和全基因组序列的最终完成提供强有力的技术支持。 展开更多
关键词 棉花 荧光原位杂交 dna纤维 高效制备
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苹果细菌人工染色体双色DNA纤维荧光原位杂交体系的建立及应用 被引量:1
2
作者 王三红 章镇 +1 位作者 蔡斌华 渠慎春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2205-2213,共9页
【目的】建立苹果DNA纤维荧光原位杂交(Fiber FISH)技术体系,从而为利用该技术确定苹果基因组DNA序列间的位置关系、构建精细物理图谱等方面的应用奠定基础。【方法】以‘Florina’苹果幼叶为试材,通过液氮研磨,尼龙膜过滤和TritonX-10... 【目的】建立苹果DNA纤维荧光原位杂交(Fiber FISH)技术体系,从而为利用该技术确定苹果基因组DNA序列间的位置关系、构建精细物理图谱等方面的应用奠定基础。【方法】以‘Florina’苹果幼叶为试材,通过液氮研磨,尼龙膜过滤和TritonX-100去除叶绿素等步骤提取细胞核。细胞核经碱裂解,采用盖玻片拉伸方法制备DNA纤维。比较细胞核不同裂解时间和在5种不同包被类型的载玻片上DNA纤维拉伸的效果。用碱裂解方法提取来自苹果‘Florina’自交不亲和S9基因座的4个细菌人工染色体(Bacterium Artificial Chromosome)BAC 34G16、BAC 45M19、BAC 70J19和BAC 69A4。提取的质粒经PEG纯化,用地高辛或生物素标记探针。探针与DNA纤维制片经过80℃变性、37℃杂交2—3 d和洗片,采用"三明治"方法进行信号放大和检测,在荧光显微镜下观察试验结果。【结果】建立了以苹果幼叶为材料,液氮研磨提取细胞核,碱裂解细胞核和盖玻片拉伸制备DNA纤维的试验方法。提取的细胞核纯净、结构完整,细胞核浓度>5×103个/μL。试验结果表明,细胞核裂解4 min,在多聚赖氨酸包被的载玻片上制备的DNA纤维平直、伸展均匀,纤维量多、细长,效果好。经原位杂交和信号检测,获得了清晰的、具有Fiber FISH典型特征的"念珠状"杂交信号。对已知大小和位置关系的两个BAC克隆BAC 34G16和BAC 45M19进行杂交信号测量和分析,得出BAC克隆大小(Y,Kb)与信号长度(X,μm)的相关方程为Y=3.47X(R2=0.9215),其斜率即为该试验技术体系Fiber FISH的分辨率3.47 kb·μm-1。试验对未知大小和位置关系的两个BAC克隆BAC 70J19和BAC 69A4成功地进行了鉴定,它们大小分别为(112.1±18.4)kb和(133.2±16.3)kb,之间有(90.2±7.3)kb的重叠区域。【结论】建立了以苹果幼叶提取细胞核,制备DNA纤维和原位杂交的方法,获得了高分辨率的苹果DNA纤维原位杂交试验技术体系。 展开更多
关键词 苹果 细菌人工染色体 dna纤维荧光原位杂交
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DNA纤维荧光原位杂交技术
3
作者 吕嵩 夏建川 张建华 《国外医学(遗传学分册)》 CAS 1997年第6期286-289,共4页
DNA纤维荧先原位杂交是一种分子细胞遗传学技术,现已应用于克隆排序、人类基因组高分辨物理图的绘制、染色体组织结构分析和致病基因的定位克隆等多个方面。本文总结了近年来该项技术在方法学、应用等方面的进展,并与其它染色体FISH... DNA纤维荧先原位杂交是一种分子细胞遗传学技术,现已应用于克隆排序、人类基因组高分辨物理图的绘制、染色体组织结构分析和致病基因的定位克隆等多个方面。本文总结了近年来该项技术在方法学、应用等方面的进展,并与其它染色体FISH方法进行比较。 展开更多
关键词 分子细胞遗传学 dna 纤维荧光 原位杂交
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在植物粗线期染色体和DNA纤维上的荧光原位杂交技术 被引量:18
4
作者 钟筱波 PaulFFransz +3 位作者 JannieWennekes AbvanKammen JHansdeJong PimZabel 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1998年第2期142-149,共8页
介绍了两种荧光原位杂交技术的详细实验步骤。第一种技术是在减数分裂粗线期染色体上的荧光原位杂交,包括从花粉母细胞中制备粗线期染色体和在这种染色体上定位DNA序列,其分辨率水平能够达到100kb。第二种技术是从植物细胞核... 介绍了两种荧光原位杂交技术的详细实验步骤。第一种技术是在减数分裂粗线期染色体上的荧光原位杂交,包括从花粉母细胞中制备粗线期染色体和在这种染色体上定位DNA序列,其分辨率水平能够达到100kb。第二种技术是从植物细胞核中制备DNA纤维,并在上面进行原位杂交,能够直接分析DNA序列的分子排列关系,其分辨率水平能达到几个kb。为了说明这两种原位杂交技术在研究基因组和染色体结构、构建高分辨率的DNA物理图谱上的能力,将展示用该技术直接分析番茄染色体端粒重复序列和端粒联接重复序列的染色体定位和DNA分子排列。 展开更多
关键词 荧光原位杂交 粗线期 染色体 dna纤维 番茄
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利用精密作图和DNA纤维荧光原位杂交把灯笼椒抗烟草花叶病毒属病毒L^3基因定位于含高度重复序列的类抗病基因簇的400kb区 被引量:1
5
作者 R.Tomita J.Murai +1 位作者 Y.Miura 戴静 《辣椒杂志》 2008年第4期42-45,共4页
我们用辣椒(Capsicum annuum)栽培种(已导入了灯笼椒Capsicum chinenseL3基因)的种内F2代群体(2016株)和种间F2代群体(3391株)(由灯笼椒与Capsicum frutescence杂交产生)对灯笼椒抗烟草花叶病毒属病毒的L3基因进行定位。通过L3基因抗性... 我们用辣椒(Capsicum annuum)栽培种(已导入了灯笼椒Capsicum chinenseL3基因)的种内F2代群体(2016株)和种间F2代群体(3391株)(由灯笼椒与Capsicum frutescence杂交产生)对灯笼椒抗烟草花叶病毒属病毒的L3基因进行定位。通过L3基因抗性紧密相关的AFLP分子标记的BAC文库的分析,揭示出番茄抗病同源基因I2的存在。通过简并PCR技术,对来自35株不同辣椒的同源基因I2的部分或全部编码序列进行克隆,且在种间组合中产生了17个遗传标记。图谱显示:L3基因位于I2同源基因标记IH1-04和BAC-end标记189D23M中间,L3基因定位于包含两个不同BAC重叠群的区内,这两个不同的BAC重叠群分别由4个和1个无性系组成。DNA纤维荧光原位杂交揭示这两个重叠群被约30kb隔开。DNA纤维荧光原位杂交结果和BAC无性系的Southern杂交表明在高度重复序列中富集包含L3基因位点的区。Southern杂交表明两个BAC重叠群包含多于十个的I2同源基因拷贝体。相反,对于种间F2代群体,,重组后代没有结合位点,在种内F2代群体中,该结合位点存在于两个不同的BAC重叠群内,这两个不同的BAC重叠群分别由7个和2个无性系组成。而且,两个群体间结合位点分配的不同表明在含有L基因位点的区域连锁不平衡。 展开更多
关键词 抗烟草花叶病毒 荧光原位杂交 高度重复序列 dna纤维 基因定位 基因簇 灯笼椒 SOUTHERN杂交
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利用精密作图和DNA纤维荧光原位杂交把灯笼椒抗烟草花叶病毒属病毒L^3基因定位于含高度重复序列的类抗病基因簇的400Kb区(连载)
6
作者 P.TOmita J.Murai +1 位作者 Y.Miura 戴静 《辣椒杂志》 2009年第1期47-50,共4页
结果 L^3基因的初步定位 我们首先利用NK群体定位了L^3基因,NK群体是辣椒栽培品种(C.annuumcultivar)和从灯笼椒(C.chinense)PI152225导入的含有L^3基因的衍生品种种内杂交的F2代群体。对抗PMMoV及敏感的F2后代的大量DNA进行三... 结果 L^3基因的初步定位 我们首先利用NK群体定位了L^3基因,NK群体是辣椒栽培品种(C.annuumcultivar)和从灯笼椒(C.chinense)PI152225导入的含有L^3基因的衍生品种种内杂交的F2代群体。对抗PMMoV及敏感的F2后代的大量DNA进行三轮AFLP分析发现了应用7个组合的选择性PCR引物扩增到8个多态性DNA片段。从其中得到了两个SCAR标记。 展开更多
关键词 抗烟草花叶病毒 dna纤维 基因定位 基因簇 高度重复序列 荧光原位杂交 灯笼椒 连载
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荧光原位杂交技术的发展与应用 被引量:33
7
作者 王玲 宁顺斌 +1 位作者 宋运淳 吕应堂 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第11期1101-1107,共7页
The techniques of in situ hybridization (ISH) are widely adopted for analyzing the genetic make_up and RNA expression patterns of individual cells. There are four main criterions for evaluating this technique, includi... The techniques of in situ hybridization (ISH) are widely adopted for analyzing the genetic make_up and RNA expression patterns of individual cells. There are four main criterions for evaluating this technique, including detection sensitivity, resolution, capacity and specificity. This review focuses on a number of advances made over the last years in the fluorescence in situ hybridization (FISH). These advances can be catagorized into several branches as follows: (1) Multicolor_FISH (mFISH), including conventional mFISH, combinatorial FISH, ratio labelling FISH, multicolor chromosome painting and comparative genomic hybridization (CGH); (2) Extended DNA fiber_FISH (EDF_FISH), including quantitative DNA fiber mapping (QDFM), molecular combing (MC) and dynamic molecular combing (DMC); (3) In situ PCR_based FISH; (4) Bacterial (or yeast) artificial chromosome_FISH (BAC_FISH or YAC_FISH); (5) Tyramide signal amplification_FISH (TSA_FISH); (6) Polypeptide nucleic acid_FISH (PNA_FISH) and (7) padlock_FISH. 展开更多
关键词 荧光原位杂交 多色荧光原位杂交 dna纤维 分辨率
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荧光原位杂交技术的研究进展及其在染色体识别应用中的展望 被引量:8
8
作者 卢军 李乐玉 +1 位作者 朱利泉 王小佳 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第3期911-913,共3页
荧光原位杂交技术是一门新兴的分子细胞遗传学技术,主要介绍了该技术的产生过程、基本原理、探针类型和标记方法以及发展历史,并对该技术在染色体识别中的应用作出展望。
关键词 dna纤维-FISH 多彩色荧光原位杂交 染色体识别
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荧光原位杂交技术及其应用 被引量:21
9
作者 马莉贞 《青海大学学报(自然科学版)》 2001年第1期18-21,共4页
荧光原位杂交技术是一门新兴的分子细胞遗传学技术 ,广泛应用于基因定位及病毒感染、DNA物理图谱的构建、产前诊断等许多领域。本文对其基本原理和近年来的应用进行了阐述。
关键词 荧光原位杂交技术 dna纤维 基因定位 物理图谱 产前诊断 分子细胞遗传学
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玉米DNA纤维的制备及端粒DNA的Fiber-FISH
10
作者 赵丽娟 刘良科 李立家 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第6期2251-2252,2258,共3页
[目的]建立了一种快速制备DNA纤维的方法,用端粒DNA在玉米纤维上进行物理定位。[方法]采用刀切法从玉米嫩叶中提取细胞核。以端粒DNA为探针,在玉米DNA纤维上进行伸展DNA纤维的荧光原位杂交(Fiber-FISH),研究端粒DNA重复序列在玉米染... [目的]建立了一种快速制备DNA纤维的方法,用端粒DNA在玉米纤维上进行物理定位。[方法]采用刀切法从玉米嫩叶中提取细胞核。以端粒DNA为探针,在玉米DNA纤维上进行伸展DNA纤维的荧光原位杂交(Fiber-FISH),研究端粒DNA重复序列在玉米染色体上的拷贝数。[结果]用刀切法提取玉米细胞核,提高了核的完整性,并改善了DNA纤维的制备效果。玉米细胞核裂解的最佳时间为8-9 min。玉米的Fiber-FISH试验结果表明,杂交信号为伸展的念珠状长链,玉米各条染色体端粒DNA的长度为7-103μm,各染色体端粒重复序列的拷贝数存在显著差异(为15~230 kb)。[结论]玉米各染色体中端粒的长度可能不同,而且随着玉米生长及环境的变化,各条染色体端粒DNA长度的变化也不一致。 展开更多
关键词 玉米 端粒dna纤维荧光原位杂交 拷贝数
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利用粗线期染色体和DNA纤维的FISH分析水稻端粒序列(英文) 被引量:3
11
作者 李宗芸 覃瑞 +2 位作者 金危危 熊志勇 宋运淳 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期832-836,共5页
利用粗线期染色体和DNA纤维的荧光原位杂交(FISH)技术分析了水稻广陆矮四号(Oryzasativassp.indicacv.GuangluaiNo.4)的端粒序列。粗线期染色体荧光原位杂交结果表明,大多数染色体的末端都有端粒串联重复,但信号的强度在不同染色体上是... 利用粗线期染色体和DNA纤维的荧光原位杂交(FISH)技术分析了水稻广陆矮四号(Oryzasativassp.indicacv.GuangluaiNo.4)的端粒序列。粗线期染色体荧光原位杂交结果表明,大多数染色体的末端都有端粒串联重复,但信号的强度在不同染色体上是不同的。伸展DNA纤维荧光原位杂交结果显示,端粒最长的线状信号长度为6.55μm,最短的为1.82μm,依据2.51kb/μm的标准,它们分别相当于16.44kb和4.56kb。端粒的平均信号长度为3.62±1.32μm,相当于9.09±3.31kb。由此可以估计,最长的、最短的和平均长度的端粒拷贝数约为2349、651和1298±473。 展开更多
关键词 端粒序列 dna纤维 粗线期染色体 荧光原位杂交
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大麦45S和5SrDNA定位及5SrDNA伸展纤维的FISH分析 被引量:14
12
作者 赵丽娟 李立家 +2 位作者 覃瑞 熊怀阳 宋运淳 《武汉植物学研究》 CSCD 北大核心 2005年第1期15-19,共5页
用荧光原位杂交技术对45S和5SrDNA在大麦(HordeumvulgareL.)有丝分裂中期染色体进行了确定分析,较强的45SrDNA信号共有2对,分别分布在大麦的第1染色体的短臂和第2染色体的长臂。而5SrDNA则只有1对杂交信号,位于第3染色体的长臂,但信号... 用荧光原位杂交技术对45S和5SrDNA在大麦(HordeumvulgareL.)有丝分裂中期染色体进行了确定分析,较强的45SrDNA信号共有2对,分别分布在大麦的第1染色体的短臂和第2染色体的长臂。而5SrDNA则只有1对杂交信号,位于第3染色体的长臂,但信号较弱。用伸展DNA纤维的荧光原位杂交(Fiber-FISH)技术测定了5SrDNA在大麦的基因组中的拷贝数,计算出5SrDNA的拷贝数约为408~416。对大麦品种中rDNA位点数目的可变性进行了讨论。 展开更多
关键词 大麦 Rdna FISH定位 dna纤维荧光原位杂交
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端粒DNA长度检测方法 被引量:3
13
作者 葛璐璐 陈晓晖 +1 位作者 刘超 王穗保 《中国法医学杂志》 CSCD 2002年第5期314-316,共3页
端粒(Telomeres)位于染色体末端,由高度重复的DM序列(人类为TTAGGG)和结合蛋白所构成,保护染色体免遭熔合、重组和降解.
关键词 端粒 dna长度 检测方法 荧光标记原位杂交 年龄鉴定 法医学
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双色FISH和DNA纤维FISH方法的建立与应用 被引量:1
14
作者 李永青 朱传炳 +2 位作者 袁婺洲 王跃群 吴秀山 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-4,共4页
在构建了含毛细胞白血病相关的结构性倒位inv(5)(p13.1q13.3)的细胞系后,为了确定该新建细胞系在建株过程中其倒位断裂点关键区遗传物质是否发生改变,以生物素或地高辛标记的cCI5-216和cCI5-267黏粒DNA为探针,进行染色体中期、间期和DN... 在构建了含毛细胞白血病相关的结构性倒位inv(5)(p13.1q13.3)的细胞系后,为了确定该新建细胞系在建株过程中其倒位断裂点关键区遗传物质是否发生改变,以生物素或地高辛标记的cCI5-216和cCI5-267黏粒DNA为探针,进行染色体中期、间期和DNA纤维3种双色荧光原位杂交的分析。结果表明:该新建细胞系的3种双色荧光原位杂交结果,均与该细胞系的原代细胞的完全相同,证实了该细胞系倒位断裂点关键区的遗传物质结构未发生改变。该细胞系是揭示毛细胞白血病发病的分子机理的重要研究材料。 展开更多
关键词 双色FISH dna纤维FISH方法 应用 毛细胞白血病 细胞素 双色荧光原位杂交 结构性倒立
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食管癌癌变过程中端粒DNA长度与细胞DNA含量的变化及意义 被引量:1
15
作者 王大虎 左静 张祥宏 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1793-1795,共3页
目的探讨在食管癌癌变过程中端粒DNA长度和细胞DNA含量的变化及意义。方法采用流式细胞术荧光原位杂交、碘化丙啶DNA荧光染色法定量检测100例食管上皮脱落细胞(其中食管上皮正常18例,轻度增生16例,重度增生35例,癌31例)中端粒DNA长度、... 目的探讨在食管癌癌变过程中端粒DNA长度和细胞DNA含量的变化及意义。方法采用流式细胞术荧光原位杂交、碘化丙啶DNA荧光染色法定量检测100例食管上皮脱落细胞(其中食管上皮正常18例,轻度增生16例,重度增生35例,癌31例)中端粒DNA长度、细胞内DNA含量和细胞周期分布。结果流式细胞术荧光原位杂交检测各组的端粒长度,Q-FISH值分别为正常组(50.83±8.86)、轻度增生(49.51±3.16)、重度增生(36.96±8.02)和癌组(27.81±6.59);癌组端粒长度明显短于重度增生组、轻度增生和正常组(P<0.01),同时重度增生组短于轻度增生组和正常组(P<0.01);端粒DNA长度Q-FISH值与细胞学分级呈显著负相关(r=-0.79,P<0.01)。正常组、轻度增生组、重度增生组和癌组细胞中DNA指数(DI)分别为(1.01±0.32)、(1.04±0.21)、(1.10±0.28)和(1.51±0.36),正常组、轻度增生组和重度增生组的DI值相比,差异无显著性意义,而癌组的DI值明显高于其他三组;DI值与细胞学分级呈显著正相关(r=0.60,P<0.01)。端粒长度Q-FISH值与DI值呈显著负相关(r=-0.46,P<0.01)。结论端粒DNA长度缩短、细胞DNA含量升高可能参与了食管上皮的癌变过程。 展开更多
关键词 食管癌 端粒长度 dna含量 荧光原位杂交 流式细胞术
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DNA纤维上的原位杂交技术 被引量:1
16
作者 王永强 刘榜 李奎 《国外医学(分子生物学分册)》 CSCD 2000年第1期14-17,共4页
DNA纤维上的荧光原位杂交(Fiber-FISH)技术是一种非常重要的分子细胞遗传学技术。对于高分辨物理图的绘制、基因组和染色体结构的研究、致病基因的定位克隆等都有很大作用,本文介绍了该技术的基本操作和应用,以及与引物原位DNA合成(PRI... DNA纤维上的荧光原位杂交(Fiber-FISH)技术是一种非常重要的分子细胞遗传学技术。对于高分辨物理图的绘制、基因组和染色体结构的研究、致病基因的定位克隆等都有很大作用,本文介绍了该技术的基本操作和应用,以及与引物原位DNA合成(PRINS)等技术相结合进行更精确基因定位的潜力。 展开更多
关键词 dna纤维 荧光原位杂交 引物原位dna 合成
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眼斑拟石首鱼重复DNA序列的染色体定位 被引量:2
17
作者 朱齐春 郑娇 +3 位作者 张静 刘贤德 王志勇 蔡明夷 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1218-1224,共7页
针对眼斑拟石首鱼Sciaenops ocellatus染色体标记匮乏的问题,利用荧光原位杂交(FISH)定位了眼斑拟石首鱼的18S r DNA、5S r DNA和端粒序列。结果显示,眼斑拟石首鱼的核型公式为2n=48t;仅有1对18S r DNA位点,位于第1对染色体的次缢痕部位... 针对眼斑拟石首鱼Sciaenops ocellatus染色体标记匮乏的问题,利用荧光原位杂交(FISH)定位了眼斑拟石首鱼的18S r DNA、5S r DNA和端粒序列。结果显示,眼斑拟石首鱼的核型公式为2n=48t;仅有1对18S r DNA位点,位于第1对染色体的次缢痕部位;有2对5S r DNA位点,FISH信号强度不等,强信号位于第8对染色体的近着丝粒端,弱信号位于第3对染色体的臂间。端粒FISH信号出现于所有染色体的两端,但表现出染色体两端信号不平衡的特点,着丝粒端FISH信号明显强于远端信号。这一特点为判定染色体的方向提供了便利。结合其他石首鱼的核型数据可以推断,2n=48t的核型及单对近着丝粒分布的18S r DNA位点是石首鱼的共同祖征;在石首鱼进化过程中,曾发生活跃但不影响宏观核型的小规模重排。研究结果丰富了眼斑拟石首鱼染色体的辨识标记,并为研究石首鱼染色体进化提供了基础数据。 展开更多
关键词 眼斑拟石首鱼 核型 染色体 荧光原位杂交 核糖体dna 端粒
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液基细胞学、HPV检测及hTERC基因检测在宫颈癌筛查中的应用价值 被引量:22
18
作者 刚小青 张菊新 《国际妇产科学杂志》 CAS 2011年第6期588-590,604,共4页
目的:研究液基细胞学、人乳头瘤病毒(HPV)检测及人类染色体端粒酶(hTERC)基因检测在宫颈癌筛查中的应用价值。方法:选取2010年12月—2011年3月满足条件的河南省人民医院妇产科就诊者1000例,对其分别进行液基细胞学(TCT)检测、HPV-DNA检... 目的:研究液基细胞学、人乳头瘤病毒(HPV)检测及人类染色体端粒酶(hTERC)基因检测在宫颈癌筛查中的应用价值。方法:选取2010年12月—2011年3月满足条件的河南省人民医院妇产科就诊者1000例,对其分别进行液基细胞学(TCT)检测、HPV-DNA检测(SPR法)、hTERC基因检测[荧光原位杂交(FISH)技术],对以上3种检测任一结果阳性者行阴道镜下宫颈活检,以病理学为金标准,评价3种方法对宫颈癌筛查的敏感度、特异度、约登指数及符合率。结果:1000例患者中,平均年龄为(41±9)岁,TCT结果异常者119例,占11.9%;HPV阳性者共136例,占13.6%;hTERC基因扩增阳性共58例,占5.8%。229例行阴道镜下宫颈活检,其中宫颈上皮内瘤变(CIN)共36例,其中CINⅠ13例(5.68%),CINⅡ13例(5.68%),CINⅢ8例(3.49%),宫颈鳞状细胞癌(SCC)2例(0.87%)。单独应用一种筛查方案时,TCT的敏感度最高(83.3%)。应用任两种方案联合筛查时,TCT+HPV的敏感度最高(94.4%),但特异度最低(29.6%);TCT或HPV与hTERC基因检测联合都可使敏感度和特异度同时升高。随着病理级别的升高,各筛查方案检出率逐渐升高(P<0.05)。结论:联合筛查方案优于单一筛查方案;HPV检测+hTERC基因检测联合筛查效果最佳,但成本最高。TCT+HPV检测联合筛查不失为一种经济而相对高效的筛查方案,可作为基本筛查进行。应根据经济条件及筛查成本选择适合的筛查方案。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 早期诊断 组织细胞学制备技术 染色体 端粒 末端转移酶 dna探针 HPV 原位杂交 荧光 HTERC基因
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鮸染色体的识别及核型特征分析 被引量:2
19
作者 邹禹 郑娇 +3 位作者 张静 刘贤德 王志勇 蔡明夷 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期208-213,共6页
鮸(Miichthys miiuy)是我国南方重要的海水养殖种类.针对鮸细胞遗传标记匮乏的问题,利用荧光染色、硝酸银染色(银染)、荧光原位杂交(FISH)等方法分析了鮸的核型特征,发现鮸的核型含24对端部着丝粒染色体(2n=48t),鮸染色体经碘化丙啶(PI... 鮸(Miichthys miiuy)是我国南方重要的海水养殖种类.针对鮸细胞遗传标记匮乏的问题,利用荧光染色、硝酸银染色(银染)、荧光原位杂交(FISH)等方法分析了鮸的核型特征,发现鮸的核型含24对端部着丝粒染色体(2n=48t),鮸染色体经碘化丙啶(PI)染色后,荧光强度呈现特定的二维分布模式;利用图像分析软件可转化为更直观的3D-光强度图,为鮸染色体的识别、配对提供了丰富的信息.18SrDNA和5SrDNA双色FISH结果显示,鮸的18SrDNA和5S rDNA均只有1对位点,分别位于1号染色体的近着丝粒区域和2号染色体的着丝粒区域.银染显示鮸的核仁组织区域(NOR)和4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色显示的暗带,均与18SrDNA位点的位置相同.鮸的端粒序列FISH信号分布于所有染色体的两端,未发现臂间端粒信号.综上,通过PI染色和图像分析软件解决了鮸染色体识别困难的问题,并使用FISH方法分析了鮸的核型特征,研究结果丰富了鮸的细胞遗传学标记,也为研究石首鱼类染色体进化提供了基础数据. 展开更多
关键词 核型 荧光原位杂交 核糖体dna 端粒序列
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不明原因智力障碍/脑发育迟缓患儿染色体亚端粒重组突变的检测 被引量:6
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作者 吴晔 姜玉武 +6 位作者 王小竹 王慧芳 王静敏 杨艳玲 秦炯 钟南 吴希如 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期906-911,共6页
目的联合应用多重连接依赖的探针扩增法和荧光原位杂交法检测染色体亚端粒重组,进行不明原因智力障碍/脑发育迟缓(mental retardation/developmental delay,MR/DD)的病因学研究。方法入选病例必须满足:①中~重度 MR/DD;②无明确围产期... 目的联合应用多重连接依赖的探针扩增法和荧光原位杂交法检测染色体亚端粒重组,进行不明原因智力障碍/脑发育迟缓(mental retardation/developmental delay,MR/DD)的病因学研究。方法入选病例必须满足:①中~重度 MR/DD;②无明确围产期异常病史;③无明确生后中毒、缺氧、中枢神经系统感染及头颅外伤等病史;④常规核型分析显示正常;⑤头颅影像及尿有机酸、氨基酸分析未提示典型遗传代谢性疾病或神经变性病;⑥男性患儿 FMR1基因检测未提示脆性 X 综合征。并至少符合以下条件之一:①MR 家族史阳性;②反复流产或围产期死亡家族史阳性;③体格发育异常;④面部畸形;⑤非面部畸形或发育异常。联合应用多重连接依赖的探针扩增法过筛和荧光原位杂交技术验证对患儿及父母标本进行染色体亚端粒重组检测。结果入组39例中发现4例阳性病例,重组分别为:①新发 der(2)t(2;4)(pter;pter),文献未见报道;②新发8pter 缺失,国外曾有报道,但临床表型不同;③新发15q11.2缺失,属中间重组,结合患儿临床表型,Angelman 综合征可能性大;④新发11qter 缺失,文献未见报道。结论首次报道2种新重组,其新发出现提示致病性可能性大;染色体亚端粒重组是遗传性 MR/DD 的重要病因,临床表型差异大,对原因不明的常规染色体检查无异常的 MR/DD 患者均应进行检测,联合应用多重连接依赖的探针扩增法和荧光原位杂交法是相对经济的确诊手段。 展开更多
关键词 精神发育迟滞 染色体结构 端粒 重组 遗传 dna探针 原位杂交 荧光
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