竹节参多糖通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路对急性肝损伤大鼠的影响

以竹节参(Panax japonicus)为原料,经水提醇沉法制备了竹节参多糖(PSPJ),通过观察和记录大鼠一般情况及肝脏指数(肝脏质量/体质量)探讨了PSPJ通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路干预CCl4诱导的急性肝损伤(ALI)大鼠的作用机制;采用苏木素-伊红(H&E)染色法评价了PSPJ对肝组织病理变化的改善作用;采用免疫组织化学(IHC)染色检测了肝脏组织NF-κB的表达情况;通过蛋白免疫印迹(Westernblot)检测考察了PSPJ对ALI大鼠肝脏PI3K/AKT/NF-κB信号通路相关蛋白及炎症指标的表达水平。结果表明,与空白对照组相比,模型组的体质量、肝脏质量和肝脏指数均显著上升(P<0.05,表示差异有统计学意义,下同),模型组出现大量肝组织炎症浸润,用药组肝脏病理变化明显缓解;与空白对照组比较,模型组大鼠肝组织p-PI3K蛋白表达显著下降(P<0.01),PI3K、p-AKT、p-NF-κB、IL-1β蛋白表达显著升高(P<0.05);药物组p-PI3K蛋白表达显著上升(P<0.05),p-AKT、IL-1β蛋白表达显著下降(分别为P<0.01、P<0.05)。PSPJ通过PI3K/AKT/NF-κB通路信号中的相关关键蛋白表达减轻了CCl4诱导的大鼠ALI症状。

鄂产竹节参多糖成分抗疲劳作用的研究

目的：研究鄂产竹节参多糖类成分对小鼠的抗疲劳作用。方法：取♂性昆明种小鼠，体重20～25g，随机分为低、中、高3组，经灌胃给予小鼠竹节参多糖提取物300，600，1200mg·kg^-1·d^-1。同时设空白对照组（纯化水），连续灌胃30d。分别观察小鼠的体重变化情况、负重游泳时间、血清尿素氮、肝糖原和血乳酸的含量。结果：低、中、高3个剂量组对实验小鼠体重变化均无影响，可显著延长小鼠的游泳时间，降低小鼠血清尿素氮的含量；中、高剂量组能明显降低运动后小鼠血乳酸含量并提高肝糖原的储备值。结论：鄂产竹节参多糖类成分具有抗疲劳的作用。

竹节参多糖抗脑衰老作用的实验研究

目的研究竹节参多糖的抗氧化和延缓衰老作用。方法颈背部皮下注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型,用自制的竹节参多糖分为低、中、高剂量的灌胃药物组,并用生理盐水灌胃作正常对照组,香菇菌多糖作阳性对照组,连续用药60d。结果中、高剂量竹节参多糖能明显提高脑组织中过氧化氢酶(CAT)的活性(P<0.01)、降低丙二醛(MDA)含量(P<0.01),同时能明显提高血液中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结论竹节参多糖具有较好的消除自由基、延缓脑衰老的作用。

竹节参多糖对肝细胞损伤的影响

目的探讨竹节参多糖对脂肪变性肝细胞的保护作用。方法制备竹节参多糖不同浓度(30%、60%及90%)乙醇洗脱部位,应用棕榈酸(PA)诱导HepG2脂肪变性的细胞模型,筛选药物的干预活性,采用MTT法观察细胞存活状况,油红O染色观察细胞脂肪变性情况,提取细胞总RNA检测相关因子的表达水平。结果 MTT法检测结果显示,30%醇沉组细胞存活率较模型组明显升高;油红O染色其细胞内泡状脂滴数目较模型组明显减少;RT-PCR检测结果显示,内质网应激相关基因葡萄糖调节蛋白、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白及炎性因子的表达较模型组明显降低。结论竹节参多糖30%乙醇洗脱部位能明显降低PA诱导的HepG2细胞脂肪变性,其机制可能是通过干预内质网应激反应实现。

竹节参多糖对对乙酰氨基酚诱导的小鼠肝损伤的保护作用

目的:探究竹节参多糖(PSPJ)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的小鼠肝损伤的保护作用.方法:将32只小鼠随机分为对照组、模型组、PSPJ低(50 mg·kg^-1)、中(100 mg·kg^-1)、高(200 mg·kg^-1)剂量组,腹腔注射APAP(400 mg·kg^-1)建立肝损伤模型.通过检测实验小鼠的存活率,肝脏病理变化,血清中AST、ALT、LDH的水平,肝脏的GSH、MDA水平及炎症因子IL-1β、IL-6浓度变化情况来观察竹节参多糖对APAP诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用.结果:在连续7天灌胃给予竹节参多糖之后,小鼠生存率提高(P<0.05或P<0.01),肝脏病理变化明显缓解;竹节参多糖还显著降低了肝损伤小鼠血清中ALT、AST、LDH及炎症因子IL-1β和IL-6水平(P<0.05或P<0.01),增加了肝组织中GSH的水平并下调了MDA的含量(P<0.05或P<0.01).结论:竹节参多糖可能通过抗氧化和抗炎途径来减缓APAP诱导的急性肝损伤.

竹节参多糖、总皂苷对小鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的:通过实验研究竹节参多糖、总皂苷对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:采用四氯化碳肝损伤小鼠模型,以谷丙转氨酶和谷草转氨酶的变化为指标,观察竹节参多糖、总皂苷对肝损伤的保护作用。结果:竹节参多糖、总皂苷的高低剂量组均具有降低谷丙转氨酶和谷草转氨酶的显著性作用。结论:竹节参多糖、总皂苷具有明显的修复四氯化碳肝损伤的药理活性,而降脂药物辛伐他汀不具有修复四氯化碳损伤的活性,故竹节参多糖、总皂苷与辛伐他汀比较具有安全性的优势。

竹节参多糖对LPS/D-GalN诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:探究竹节参多糖对LPS/D-GalN诱导急性肝损伤小鼠的保护作用及其机制。方法:采用腹腔注射LPS(8μg/kg)和D-GalN(800 mg/kg)诱导小鼠急性肝损伤。记录小鼠死亡时间并绘制生存曲线和计算肝脏指数并观察肝脏组织病理学变化,检测动物血清中肝脏酶水平以及肝匀浆中氧化应激因子和炎症因子,评价竹节参多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用。结果:竹节参多糖能剂量依赖性地降低LPS/D-GalN诱导的肝损伤并提高肝损伤型动物在24 h内的生存率,剂量依赖性缓解肝脏病变。经竹节参多糖给药处理后,模型动物肝组织SOD、GSH活性升高,MDA、TNF-α、IL-1β和IL-6及血清ALT、AST均降低。结论:竹节参多糖能减轻LPS/D-GalN诱导的小鼠急性肝损伤,其作用机制可能与降低氧化应激和缓解炎症反应有关。

竹节参多糖对LPS致小胶质细胞炎症反应的作用

目的:探讨不同浓度竹节参多糖对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞炎症反应的保护作用及其机制。方法:采用MTT比色法筛选出竹节参多糖对小胶质细胞的安全用药范围;一氧化氮试剂盒检测小胶质细胞NO释放水平;PCR法检测炎症因子IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA表达水平;免疫荧光法检测小胶质细胞中NF-κB的表达及定位。结果:3.125~50μg/mL竹节参多糖及1μg/mL LPS单独或共同作用对小胶质细胞增殖无明显影响。与LPS模型组比较,3.125、6.25、12.5、25、50μg/mL竹节参多糖均能不同程度抑制NO释放量,并能减少炎症相关因子IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA表达;25、50μg/mL竹节参多糖均能有效抑制小胶质细胞中NF-κB的核转移。结论:竹节参多糖可减轻LPS诱导的小胶质细胞炎症反应,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。

竹节参多糖的免疫佐剂活性研究

目的研究不同醇沉竹节参多糖的免疫佐剂活性,探讨其中佐剂活性最强的部分。方法通过对竹节参总多糖进行不同浓度醇沉,得到30%醇沉物、60%醇沉多糖和90%醇沉多糖,将各段多糖分别与卵白蛋白混合注入小鼠体内进行免疫,每周免疫1次,共3次。最后1次免疫后5 d处死小鼠取血,测定抗体效价。对3种醇沉物质进行红外光谱扫描,初步确定多糖的类型。结果各段多糖的抗体效价与对照组比较均显著增加,尤以60%醇沉多糖最为明显。红外图谱分析表明,竹节参多糖的骨架中含有吡喃糖环结构。结论竹节参多糖的免疫佐剂效果显著,其中60%醇沉多糖的佐剂效果最强。

竹节参多糖的药理活性研究概况

随着民族特色药物的研究与发展,竹节参活性成分之一的竹节参多糖的药理活性研究亦越来越多,竹节参多糖具有抗炎、抗氧化、免疫调节、改善学习记忆、保护神经元、降血脂、护肝、抗疲劳及抗肿瘤等多种药理活性。笔者主要对近年来知网、维普、万方上关于竹节参多糖的药理活性研究进行概述,为今后关于竹节参多糖及其组分的分离纯化和药理研究的提供参考价值。

土家药竹节参多糖通过Nrf2-ARE信号通路对四氯化碳致大鼠急性肝损伤的抗氧化保护作用

目的基于核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)-抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)信号通路研究竹节参多糖(Panax japonicus polysaccharide)保护四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))所致大鼠急性肝损伤的作用机制。方法通过CCl_(4)间隔诱导法建立急性肝损伤大鼠模型,给予水提醇沉法制备的竹节参多糖治疗7 d后取材,通过苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;全自动生化仪检测大鼠血清中肝功能相关指标;ELISA法检测肝组织氧化应激水平;免疫组化法观察大鼠肝组织Nrf2表达;Western blotting测定大鼠肝组织Nrf2-ARE通路相关蛋白表达。结果与模型组比较,竹节参多糖组大鼠血清中肝功能相关指标呈不同程度的降低(P<0.05、0.01),肝组织中Nrf2-ARE信号通路明显激活(P<0.01),肝脏中脂类过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平降低(P<0.01),抗氧化酶活性明显升高(P<0.05、0.01),细胞质中氧化应激效应物Nrf2阳性的细胞数有所减少(P<0.01),大鼠肝脏损伤程度明显减轻。结论竹节参多糖可激活Nrf2-ARE信号通路,增强机体的抗氧化酶系表达,减轻CCl_(4)引起的氧化损伤。

3,5-二硝基水杨酸比色法测定竹节参中多糖的含量

建立了竹节参中多糖的含量测定方法,采用3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法),测定竹节参中的还原糖和总糖的含量,并计算出总多糖的含量。得出以葡萄糖为对照品,线性范围为80～320μg/mL(r=0.999 6),加样回收率为97.42%～103.00%;竹节参中总多糖含量9.66～10.86mg/g。该方法灵敏、稳定、重复性好,有助于竹节参质量控制方法的研究。

鄂产竹节参多糖的抗炎、镇痛活性

目的:提取分离竹节参多糖,初步研究其化学组成及评价抗炎镇痛的活性。方法:采用化学法测定竹节参多糖的成分,红外光谱分析其结构;采用二甲苯致耳肿胀模型、腹腔毛细血管通透性试验和小鼠热板、扭体试验分别考察其抗炎、镇痛效果。结果:分析显示竹节参多糖中含有α-吡喃糖环结构;竹节参多糖能够有效延长小鼠痛阈值,减少扭体次数,抑制耳肿胀,降低毛细血管通透性。结论:竹节参多糖为竹节参中抗炎镇痛活性成分之一。

竹节参多糖抗衰老作用研究

目的:研究竹节参多糖的抗衰老作用。方法:将昆明种小鼠按体质量随机分组,分别给予生理盐水、D-半乳糖、香菇菌多糖、竹节参多糖。测定胸腺和脾脏指数,取血、肝、脑测定丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶。结果:竹节参多糖可以拮抗胸腺和脾脏萎缩,显著降低丙二醛含量并提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活力。结论:竹节参多糖可通过小鼠调节机体免疫功能、清除自由基等方面发挥其延缓衰老的作用。

酶法提取竹节参中多糖成分的工艺研究

目的:研究酶法提取竹节参中多糖成分的工艺。方法:以多糖得率为考察指标,采用正交试验法对竹节参中多糖成分酶法的提取工艺进行优选。结果:优化后的提取工艺为pH 5.0,50℃,料液比为1:50,纤维素酶的质量分数1.2%,果胶酶的质量分数1.0%,酶解时间2h,90℃灭酶和浸提2h,多糖得率为14.3%。结论:酶法能有效提高竹节参多糖成分的得率。

竹节参多糖对高血脂模型小鼠的影响作用

目的:研究竹节参多糖(D1)降血脂的药理活性。方法:腹腔注射75%蛋黄生理盐水溶液0.02mL.g-1建立小鼠高血脂动物模型。随机分为空白对照组、高脂模型组、2个阳性对照组(血脂康组及辛伐他汀组)和2个试验组(D1高剂量组及D1低剂量组)。空白对照组给予生理盐水,高脂模型组给予蛋黄乳溶液和生理盐水,阳性对照组和试验组以羧甲基纤维素钠混悬,配成混悬药液样品。测定给药后动物血浆中TG、TC、LDL-C、HDL-C的浓度。结果:阳性对照组和试验组各项指标与模型组比较,差异均有显著性。结论:竹节参多糖具有一定的降血脂的作用,并存在量效关系。

竹节参多糖抗血栓活性的研究

目的 观察竹节参多糖的抗血栓活性.方法 采用大鼠腹主动脉插管取血,体外试管法测定竹节参多糖对大鼠血凝块的溶解作用;采用比浊法测定竹节参多糖对人血小板聚集的影响;采用胶原蛋白-肾上腺素诱导的血栓形成模型和血瘀证大鼠模型,观察竹节参多糖的体内抗血栓作用并探讨其作用机制.结果 体外研究时,低、中、高剂量竹节参多糖对血凝块的溶解率分别达到53.08%、57.03%和68.15%,对人血小板聚集的抑制率则分别为6.78%、29.49%和40.30%,与对照组比较差异均有统计学意义,且其血凝块溶解作用和血小板聚集抑制作用均与给药剂量呈正相关.肺血栓小鼠模型中,竹节参多糖低、中、高剂量组小鼠死亡数分别为2、2、1只,小鼠偏瘫数分别为5、4、4只,肺指数则分别为1.89%、1.71%和1.43%,均表现出显著的抗血栓作用.低、中、高剂量竹节参多糖作用于血瘀证大鼠模型后,血小板最大聚集率分别降至45.62%、41.33%和31.40%,体现了明显的抗血小板聚集作用;与模型组比较竹节参多糖低剂量组对组织型纤维溶酶激活剂（t-PA）、6-酮前列腺素F1α（6-Keto-PGF1α）的含量无明显影响,中、高剂量组可显著升高t-PA、6-Keto-PGF1α的含量,竹节参多糖各组均可显著降低大鼠体内血栓素B2（TXB2）、纤溶酶原激活物抑制因子（PAI）的含量.结论 竹节参多糖高、中、低剂量组均有显著的体外和体内抗血栓活性,其抗血栓作用可能与影响血小板功能和提高纤溶系统活性有关.

竹节参多糖对小鼠血液SOD、CAT、MDA影响的研究

目的:通过测定小鼠血液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活力和丙二醛(MDA)含量来研究鄂产竹节参多糖对小鼠抗衰老的作用。方法:取昆明种小鼠按体质量随机分组,分别给予生理盐水、D-半乳糖、香菇菌多糖、竹节参多糖。连续给药灌胃60d后,检测相关衰老指标。结果:各剂量组能提高小鼠血液中SOD、CAT的活性,并能降低MDA的含量,以中剂量组作用差异有极显著性。结论:鄂产竹节参多糖类成分具有较好的消除自由基、抗衰老的作用。

竹节参粗多糖的初步纯化工艺研究

先用乙醇对竹节参粗多糖进行分步醇沉以脱除色素,利用Sevag法、TCA法和木瓜蛋白酶法对其进行脱蛋白,以多糖回收率和蛋白损失率为考察指标,比较三种方法对竹节参粗多糖脱蛋白的效果。实验结果表明,进行5次醇沉,最终乙醇浓度为50%时沉淀出乳白色的粗多糖。Sevag法脱蛋白率80.5%,多糖回收率24%;TCA法脱蛋白率59.8%,多糖回收率47.3%;木瓜蛋白酶法脱蛋白率86.7%,多糖回收率为87.9%。可见,木瓜蛋白酶法能有效去除竹节参粗多糖中的蛋白质。