笃斯越橘花青素提取物对3T3-L1前脂肪细胞生长的抑制作用

目的:研究笃斯越橘花青素提取物对3T3-L1前脂肪细胞生长抑制作用及其作用机理。方法:采用MTT法观察细胞生长抑制并确定半数抑制浓度(IC50),LDH(lactate dehydrogenase)法评价提取物引起的细胞膜损伤,流式细胞计法测定细胞周期,荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学特征。结果:笃斯越橘花青素提取物能够有效地抑制3T3-L1前脂肪细胞的生长且IC50约为214μg/mL;LDH实验表明细胞LDH释放率在24、48、72h分别为89.0%、85.2%、67.8%,72h时相对24h或48h明显降低(P<0.05),提取物对3T3-L1前脂肪细胞膜的通透性未见明显增加;笃斯越橘花青素提取物能够有效诱导细胞凋亡,同时在S或G0/G1期产生阻滞,但是对细胞的G2/M期未见明显影响,荧光显微镜观察细胞出现典型凋亡特征。结论:笃斯越橘花青素提取物能有效抑制3T3-L1前脂肪细胞生长的作用,具有开发为天然抗肥胖功能因子的潜在可能。

笃斯越橘花色苷提取物对光损伤人视网膜色素上皮细胞的保护作用

目的:通过建立人视网膜色素上皮细胞(hRPE)光损伤模型评价笃斯越橘花色苷对眼睛的保护作用及机理。方法:光损伤设置光强、光照时间、后续培养时间3个影响因素,以细胞存活率和乳酸脱氢酶活性评价模型建立情况;根据越橘花色苷提取物的干预方式分为预防组、应激组和修复组,每组设高、中、低3个浓度,检测细胞存活率和血管内皮生长因子(VEGF)水平评价保护效果。结果:选择光照度2500lx,光照24h后培养24h作为最佳造模条件,细胞损伤率达20%;预防组和应激组能有效保护细胞活力(P<0.01),修复组没有效果,各组都能抑制由光损伤诱导hRPE细胞VEGF的过表达,但是不同浓度之间抑制能力有差异。结论:hRPE细胞光损伤程度呈光照强度和光照时间依赖性;越橘花色苷能通过保护hRPE的细胞活力和VEGF的过表达,实现保护眼科健康、预防眼科疾病的作用。

笃斯越橘果实花青素提取及稳定性研究

以笃斯越橘果实为材料,利用超声波辅助乙醇提取,并采用正交试验设计,对笃斯越橘果实花青素进行提取,确定其花青素最佳提取条件为:提取温度40℃,最佳料液比3:30(g/mL);最佳超声波功率200W,最佳提取液浓度65%的酸化乙醇。对笃斯越橘果实花青素的稳定性研究结果表明:笃斯越橘果实花青素对pH值敏感,笃斯越橘果实花青素对氧化剂稳定性较差;笃斯越橘果实花青素对还原剂稳定性较强;在pH值为3.0时笃斯越橘果实花青素对Ca^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)、Cu^(2+)、Al^(3+)较稳定;笃斯越橘果实花青素弱光稳定性较好,强光稳定性较差。

RP-HPLC法优化笃斯越橘花青素提取、纯化技术研究

通过对笃斯越橘花青素进行RP-HPLC分析,首先得到花青素提取率随盐酸浓度变化的规律,并得出盐酸-乙醇法提取花青素的最佳盐酸浓度为1.5mol/L。分别采用AB-8大孔树脂、聚酰胺树脂及AB-8大孔树脂与聚酰胺树脂联用对提取液进行了初步纯化,得到了4种纯化花青素样品,经过RP-HPLC法检测分析获得了4种纯化样品的花青素的纯度分别为13.36397%、36.95687%、13.21466%、8.559135%,可知采用聚酰胺树脂对笃斯越橘花青素的纯化效果明显优于AB-8树脂,纯度可提高23.5%。

响应曲面法优化笃斯越橘花青素提取工艺

目的:建立并优化乙醇浸提笃斯越橘花青素的最佳工艺条件,为笃斯越橘的工业化生产提供依据。方法:以笃斯越橘冻干粉为原料,以花青素提取率为考察指标,采用单因素和Box-Behnken组合试验,考察乙醇体积分数、料液比、温度、时间、pH值对笃斯越橘花青素提取率的影响。采用响应面法对乙醇提取笃斯越橘中花青素的工艺条件进行优化。结果:最佳工艺参数为乙醇体积分数50%、料液比1∶30(g/mL)、提取温度62℃、提取时间60min、pH=1.50,在此条件下花青素提取率为58.76%,模型的预测值为57.82%。相对误差为0.94%。结论:研究建立的响应面优化工艺具有较高的准确性和实用性,可用于笃斯越橘花青素的提取。

中国野生笃斯越橘花青素的初步分离和分析

采用反相高效液相色谱法和电喷雾质谱法对我国野生笃斯越橘中花青素组分进行了分离和分析.制备野生越橘花青素的粗提物,经大孔树脂柱层析得到花青素样品,其得率为0.72%.用香草醛法测得其总黄烷醇含量为95%.采用Alltima C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以2%甲酸水溶液(A)和2%甲酸/甲醇溶液(B)作为流动相,分2个梯度对花青素组分进行洗脱,将其主要洗脱峰在电喷雾正离子模式下进行分析,根据质谱的准分子离子[M+H](m/z)检测其聚合度.结果表明,我国野生越橘花青素的提取物被展开成8个主要的洗脱峰,以峰面积计算,主要洗脱峰总含量达85%.经质谱分析,判断为2个单体,3个二聚体,1个三聚体,2个四聚体.结果表明,我国野生笃斯越橘中含有较丰富的花青素,低聚体是其中的主要成分.本文首次报道了我国大兴安岭野生笃斯越橘花青素的组成情况,对于开展其后续的结构、功能、质量检测以及生产开发研究都具有一定的参考价值.

笃斯越橘酰化花青素稳定性分析

采用分光光度法,通过多梯度、多组合系列试验,对光照、温度、金属离子、氧化剂、还原剂等因素下的笃斯越橘酰化花青素和笃斯越橘花青素的稳定性进行比较分析。研究表明,与未酰化的花青素相比,酰化花青素耐光性提高,各种环境里的抗色素分解能力增加。Fe^(2+)、Fe^(3+)、Cu^(2+)对无论酰化与否的花青素都会产生不同程度的不利影响,在色素应用过程中(加工、保存及运输)应避免与其接触。结果证明,笃斯越橘酰化花青素稳定性优于未经修饰的花青素,有较高的开发应用和研究价值。

越橘提取物中花色苷及游离花青素的测定

目的研究建立越橘提取物中花色苷及游离花青素的检测标准。方法采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定花色苷类成分及游离花青素的含量。结果游离花青素的含量以矢车菊素为对照测定,其在4.75~475.24 ng的范围内线性关系良好(r=1.0000),加样回收率为101.7%,RSD为1.3%(n=9)。花色苷的含量以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为对照测定,其在51.03~5103.24 ng的范围内线性关系良好(r=1.0000),加样回收率为99.4%,RSD为0.5%(n=9)。结论本文建立的游离花青素检查方法及花色苷类成分含量测定方法简便、准确,可作为越橘提取物的质量控制标准。

响应面优化笃斯越橘花色苷提取研究

在液料比、超声波功率、乙醇浓度、提取时间、提取温度5个单因素试验基础上,利用响应面分析法,以提取液色价为指标,对超声波提取笃斯越橘花色苷的工艺条件进行了优化。最佳提取条件为:液料比20:l(mL:g),超声波功率135W,提取温度47℃,乙醇浓度72%,提取时间52min,在此条件下提取2次可达到94.6%提取率。

越橘提取物中花青素分析及其体外抗氧化活性

研究越橘提取物中花青素的组成与含量及其体外抗氧化活性。实验采用高效液相色谱与质谱联用法对越橘提取物中的花青素组成进行鉴定,并以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为标准品测定了花青素的含量。以VC为对照,测定越橘提取物对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基的清除能力和还原力。结果表明,越橘提取物中含有14种花青素,包括飞燕草素、矢车菊素、矮牵牛素、芍药素和锦葵素类;越橘提取物中花青素的总含量为408.74μg/mg,其中,矢车菊素类花青素含量最高,为159.93μg/mg,占总含量的39.12%;体外抗氧化实验表明,越橘提取物的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和羟基自由基清除能力的IC50分别为26.16、13.07、1.91 mg/mL,还原力在浓度为250μg/mL时达到0.617。本研究为越橘的开发利用提供一定理论与数据基础。

笃斯越橘花青苷合成酶基因(ANR)的克隆与序列分析

以笃斯越橘的盛花期花朵为试材,克隆了笃斯越橘花青苷合成途径ANR基因并对其进行序列分析,结果表明:笃斯越橘ANR基因的cDNA序列全长为1 226bp,其中包含1 035bp ORF,编码344个氨基酸,相对分子质量为38kd,等电点值为5.34。将其氨基酸序列与其他植物的ANR基因比对后发现,笃斯越橘ANR基因分别与桃、苹果、葡萄、野草莓的ANR基因序列的一致性达61%、62%、62%和59%,表明克隆到了正确的笃斯越橘ANR基因。该序列与其他植物的ANR基因序列构建的系统发育树表明,所克隆的笃斯越橘ANR基因分别与桃、苹果、野草莓等亲缘关系较近。

越橘提取物可抑制大肠癌细胞

哈尔滨医科大学研究人员发现，越橘提取物中的黄酮醇、原花青素、萜类、酚类等有效成分，能显著抑制大肠癌细胞的增殖，降低其侵袭和转移能力。

越橘提取物可抑制大肠癌细胞

近日，哈尔滨医科大学研究人员发现，越橘提取物中的黄酮醇、原花青素、萜类、酚类等有效成分，能显著抑制大肠癌细胞的增殖，降低其侵袭和转移能力。

越橘提取物可抑制大肠癌细胞

近日，哈尔滨医科大学研究人员发现，越橘提取物中的黄酮醇、原花青素、萜类、酚类等有效成分，能显著抑制大肠癌细胞的增殖，降低其侵袭和转移能力。越橘为一种多年生灌木，原产于北欧、北美等地，我国从上世纪80年代开始对越橘进行引种驯化栽培。世界范围内，越橘曾被用于糖尿病和眼部疾病治疗。随着对越橘研究的不断增多，其广泛的抗肿瘤作用逐渐引起关注。一般认为这与原花青素及其他酚类、非酚类成分有关。

越橘提取物可抑制大肠癌细胞

近日,哈尔滨医科大学研究人员发现,越橘提取物中的黄酮醇、原花青素、萜类、酚类等有效成分,能显著抑制大肠癌细胞的增殖,降低其侵袭和转移能力。越橘为一种多年生灌木,原产于北欧、北美等地,我国从上世纪80年代开始对越橘进行引种驯化栽培。世界范围内,越橘曾被用于糖尿病和眼部疾病治疗。随着对越橘研究的不断增多,

基于标准提取物的欧洲越橘提取物质量控制方法及药效活性关联研究

目的建立对照品非依赖性的20种花青素类成分定量分析方法,并利用该法对市售欧洲越橘Vaccinium myrtillus提取物进行质量控制,同时筛选出代表性抗氧化活性成分。方法以欧洲越橘标准对照提取物替代对照品,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)联用技术,建立一种针对20种花青素类成分的定量方法,并利用该法对10批市售欧洲越橘提取物中的花青素类成分含量进行研究。采用DPPH自由基清除法和总抗氧化能力测试法评价不同欧洲越橘提取物的抗氧化能力。结果方法学验证结果显示,20种花青素类成分线性良好,r为0.9994~1.0000,精密度RSD为0.05%~4.23%,稳定性RSD为0.29%~3.38%,平均加样回收率为98.1%~102.1%,RSD为0.50%~4.12%。样品分析结果显示,不同样品中部分花青素类成分含量存在显著差异,其中锦葵素变化最大,RSD为18.23%。欧洲越橘提取物具有较好的DPPH自由基清除能力和总抗氧化能力。其中矢车菊素与DPPH自由基率相关性为0.94,芍药素-3-O-半乳糖苷与总抗氧化活性相关性为0.93。二者有望作为欧洲越橘提取物清除DPPH自由基活性和总抗氧化活性的潜在质控成分。结论基于UPLC-QQQ-MS/MS所建立的对照品非依赖性的欧洲越橘提取物中20种花青素类成分定量分析方法,灵敏度高,准确性好,方法简单,适用于欧洲越橘提取物中20种花青素类成分的含量测定,为中药对照提取物替代单体对照品在中药质量控制中的应用提供了数据支撑,为中药材质量控制研究提供新的研究思路。

笃斯越桔多酚提取物成分分析及其抗氧化活性的研究

研究笃斯越桔(Vaccinium uliginosum Linn)多酚提取物的成分、花青素组分和抗氧化能力。采用Bradford法和苯酚-硫酸法分别测定提取物中蛋白质和总糖的含量,Folin-ciocalteu法测定总多酚含量。进一步采用RP-HPLC分析笃斯越桔多酚提取物中花青素组分。结果表明,笃斯越桔多酚提取物中多酚含量占干质量的61.7%,花青素组分为5种,矢车菊素-3-葡萄糖苷为其主要成分。采用ABTS法和DPPH法评价提取物的抗氧化活性。结果显示,笃斯越桔多酚提取物清除ABTS和DPPH自由基的能力随提取物剂量的增加而升高,且EC50分别为114.1μg/mL和116.0μg/mL,而标准品Trolox的EC50分别为129.0μg/mL和130.6μg/mL。笃斯越桔多酚提取物多酚含量高,抗氧化能力强,是一种有效的天然抗氧化剂。

正交试验优选长白山笃斯越橘中花色苷提取工艺

目的:优选越橘中花色苷的提取工艺。方法:以提取温度、固液比、提取时间和提取次数为考察因素,以提取率为指标优选最佳工艺。结果:最佳提取工艺为提取温度60℃,提取料液比1∶5,提取时间60min,提取次数3次。结论:该工艺条件简便、稳定,可为进一步研究和开发利用越橘提供科学依据。

越橘提取物可抑制大肠癌细胞

近日，哈尔滨医科大学研究人员发现，越橘提取物中的黄酮醇、原花青素、萜类、酚类等有效成分能显著抑制大肠癌细胞的增殖，降低其侵袭和转移能力。越橘为一种多年生灌木，原产于北欧、北美等地，