艾滋病毒重组抗原及第三代艾滋病毒抗体EIA诊断试剂盒的研制

近年来中国的艾滋病毒(HIV)感染人数以每年30%的速度增长,HIV感染者总数已超过60万人,感染者已从吸毒人员、献血员等高危人群扩展到社会各个阶层,我国已处于艾滋病泛滥前的关键时期.HIV诊断试剂盒是HIV防制工作中最重要的技术工具.用于人群筛检的HIV诊断试剂盒已历经三代,第一代试剂盒主要使用来自细胞培养的HIV病毒的裂解产物作为抗原;第二代产品使用基因工程重组抗原和/或人工合成肽作为抗原,使包被抗原中免疫优势区的比例明显增强,从而提高了试剂的灵敏度,而且标准化生产的相对更纯的抗原的使用使试剂的特异性和重复性均大为提高.前两代试剂均采用间接法原理,即先以抗原包被聚丙乙烯板,再加入待检血清,最后加入酶标记的抗人IgG抗体,因此均只能检测IgG抗体.1992年问世于美国的第三代试剂则采用双抗原夹心法,即先以抗原包被,再加入待检血清、酶标记的抗原,从而可同时检测所有类型的抗体,明显提高了试剂的灵敏度,同时由于采取了双抗原识别机制,特异性也得到了明显提高,因此在国外已取代间接法而成为主流试剂.

人类免疫缺陷病毒抗原抗体筛查联合免疫印迹或核酸补充实验的临床应用

目的对第四代人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗原抗体试剂筛查联合免疫印迹(Western blot,WB)或核酸补充实验的检测策略进行临床应用评价。方法回顾性分析2018年四川大学华西医院HIV抗原抗体筛查的所有样本资料,采用HIV第四代抗原抗体试剂筛查,用第三代抗体试剂对筛查阳性样本进行双份复检,复检样本均进行WB或HIV RNA的补充实验。结果HIV第四代抗原抗体试剂筛查217803例,其中筛查阳性718例,确证阳性513例,筛查阳性率为0.33%,确证阳性率为0.24%。所有筛查阳性样本经WB补充实验,确证阳性513例(71.45%)、阴性163例(22.70%)、不确定42例(5.85%);对于WB阴性和不确定的15例样本经HIV RNA检测6例阳性,随访4例患者有2例血清学转阳。第四代阳性+第三代阳性样本536例,经WB确证阳性513例(95.71%),阴性6例(1.12%),不确定17例(3.17%);第四代阳性+第三代阴性样本182例,经WB确证阳性0例(0.00%),阴性157例(86.26%),不确定25例(13.74%)。第四代阳性+第三代阳性样本的确证阳性率(95.71%,513/536)明显高于第四代阳性+第三代阴性样本(0.00%,0/182),差异有统计学意义(χ^2=610.091,P<0.001)。WB确证阳性条带以全带和次全带为主(占82.26%),条带数≥5条带组的临界值指数值更高(P<0.001)。结论第四代阳性+第三代阳性样本,确证阳性率高,需尽快做补充实验以明确诊断;第四代阳性+第三代阴性样本,确证阳性率低,但对于有高危史的患者,应尽快做HIV RNA实验进行早期诊断。