第三组代谢型谷氨酸受体亚型对神经病理性痛的影响

目的探讨第三组代谢型谷氨酸受体(mGluRs)亚型对神经病理性痛的调节作用。方法取30只SD大鼠,随机分为5组(n=6),于鞘内置管术后第5天分别给予单次鞘内注射等容量(10μL)生理盐水、L(+)-2-氨基-4-膦酰基丁酸(L-AP4)、VU0155041、AMN082和(S)-3,4-二甲酸苯基甘氨酸(DCPG),注药后每隔15 min和30 min分别测量大鼠50%机械缩足阈值(50%PWT)和缩足潜伏期(PWL)。另取30只SD大鼠,随机分为5组(n=6),鞘内置管并行脊神经根结扎(SNL),术后第7天给予单次鞘内注射生理盐水及同上药物10μL,注药后同法测量大鼠50%PWT和PWL。再取18只SD大鼠,随机分为空白对照组、SNL组、SNL+注药组(生理盐水、VU0155041、AMN082和DCPG)(n=3),注药组于30 min后与其余各组同取腰膨大处脊髓,Western blotting检测mGluR4、mGluR7和mGluR8的表达。结果 L-AP4、VU0155041、AMN082和DCPG对正常大鼠的痛域无影响(P>0.05);但对神经病理性痛大鼠有不同程度的镇痛作用(P<0.05),其中以VU0155041效果最为显著。与空白对照组相比,SNL组手术同侧脊髓只有mGluR4表达水平降低(P<0.05);与生理盐水组相比,其他注药组只有mGluR4表达水平升高(P<0.05);而mGluR7在各组中的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),mGluR8在脊髓基本不表达。结论第三组mGluRs中主要是mGluR4对神经病理性痛有调节作用。

大鼠颈上神经节中Ⅰ组代谢型谷氨酸受体表达及慢性间歇性低氧对其的影响

目的观察Ⅰ组代谢型谷氨酸受体(mGluR1/5)在大鼠颈上神经节(SCG)组织的表达、定位,及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR1/5蛋白水平的影响。方法12只雄性SD大鼠随机分为对照组(Ctrl)和CIH组(CIH),每组6只,模型制作6周。Western blotting检测CIH对mGluR1/5蛋白水平的影响,免疫组织化学法和免疫荧光共定位染色检测大鼠SCG中mGluR1/5的表达及分布。结果mGluR1/5表达于大鼠SCG,mGluR1分布于神经元和小强荧光(SIF)细胞,而在卫星胶质细胞(SGCs)、神经纤维和血管不表达;mGluR5主要分布于神经纤维,少量分布于神经元,而在SIF细胞、SGCs及血管不表达;CIH上调mGluR1/5的蛋白水平(P<0.01)。结论mGluR1和mGluR5均表达于大鼠SCG,但其表达部位有所不同,两者蛋白水平的升高可能参与了CIH诱导的血压升高。

代谢型谷氨酸受体在胶质瘤发展中的作用及其作为潜在治疗靶点的研究进展

代谢型谷氨酸受体(mGluRs)是中枢谷氨酸能系统中重要的受体之一,其广泛参与调控突触传递、突触可塑性、神经兴奋性和抑制性平衡等生理过程。mGluRs在介导胶质瘤的发生和发展中起重要作用,其介导的细胞内信号通路参与胶质瘤的进展、侵袭和复发过程,因此mGluRs作为胶质瘤的潜在药物靶点越来越受到关注。其中,mGluR1和mGluR3的体外药物阻断已被证明对于胶质瘤细胞具有抗细胞增殖和迁移的作用,mGluR3拮抗剂对于替莫唑胺有增加敏感性的作用,mGluR4和mGluR8可能成为治疗恶性胶质瘤的潜在靶点,但需要广泛的研究验证。未来应对不同类型的mGluRs在胶质瘤细胞中的作用进行深入探索,以为临床药物的研发提供理论依据。

抗代谢型谷氨酸受体1抗体相关性脑炎的研究进展

抗代谢型谷氨酸受体1抗体(mGluR1)是一种新发现的抗体,可引起自身免疫性脑炎,被称为抗代谢型谷氨酸受体1抗体相关性脑炎,主要表现为小脑共济失调,伴有认知障碍、精神和行为障碍、舞蹈样动作、味觉丧失、自主神经功能障碍、局灶性癫痫和睡眠障碍,还可能与血液系统恶性肿瘤和男性生殖系统恶性肿瘤以及系统性自身免疫性疾病(如干燥综合征和桥本甲状腺炎)有关。本研究旨在综述抗mGluR1抗体相关性脑炎的病因、发病机制、辅助检查、治疗及预后等方面的最新研究进展,以提高临床医生对该病的认识。

抗代谢性谷氨酸受体脑炎临床特点分析

目的 总结三类抗代谢性谷氨酸受体(mGluRs)脑炎的临床特征,以期加深对该类脑炎的认识,加强早期诊治并改善临床预后。方法 通过检索PubMed、Web of Science、中国知网、万方数据库,检索截至2023年10月之前发表的所有有关抗mGluRs脑炎的中英文文章,收集并归纳三种抗mGluRs脑炎的临床信息。结果 检索到关于抗mGluRs脑炎文章共49篇,最终纳入抗mGluR1脑炎40例,抗mGluR2脑炎3例,抗mGluR5脑炎43例。抗mGluR1脑炎好发中年女性,主要表现为小脑综合征(95.0%,38/40);22.5%(9/40)的患者发现肿瘤,以淋巴瘤多见(66.7%,6/9);首次头部MRI异常约占52.8%(19/36),其中约一半患者在随访中发现小脑萎缩。抗mGluR2脑炎主要表现为小脑综合征;肿瘤仅在2例国外患者中发现。抗mGluR5脑炎易累及中青年男性,边缘系统症状是其特征性表现,以精神行为异常与认知障碍最常见(74.4%,32/43);16.3%(7/43)的患者发生肿瘤,均为霍奇金淋巴瘤。结论 对于任何出现急性或亚急性小脑共济失调,伴有MRI小脑异常或萎缩的患者,都应高度怀疑抗mGluR1/2脑炎的可能性,而对于以精神行为异常和认知改变为突出或首发症状的患者,需警惕抗mGluR5脑炎的可能。

代谢型谷氨酸受体5与临床相关疾病的关系研究进展

代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)是中枢谷氨酸能系统的重要受体之一,在中枢神经系统方面发挥着重要作用,广泛参与调控突触传递、突触可塑性、神经兴奋性/抑制性平衡等生理过程。研究发现,mGluR5与多种不同的神经系统疾病和非神经系统疾病密切相关,因此其作为潜在的药物治疗靶点日益受到关注。本文旨在对mGluR5的结构、分布、生理功能以及mGluR5在神经系统疾病、非神经系统疾病中的作用进行概述,以期为mGluR5在临床相关疾病中的研究提供有意义的参考。

骨化三醇改善早期1型糖尿病大鼠脂质代谢与代谢组学分析

目的探究骨化三醇喂食对早期1型糖尿病大鼠的改善效果与主要参与的代谢通路影响。方法于2022年3—10月将32只SPF等级SD大鼠采用随机数字表法分为正常对照(Control)组(n=8),模型(T1DM)组(n=12)和治疗(T1DM-Cal)组(n=12),T1DM组与T1DM-Cal组分别在1~4周腹腔注射链脲佐菌素(1次/周)诱导产生1型糖尿病,Control组给予同等体积的柠檬酸缓冲液,T1DM-Cal组从第1周开始每天喂食骨化三醇,T1DM组、Control组给予同等体积的花生油,持续饲养喂食6周后收集血浆样品进行血糖、血脂、脂蛋白酯酶、乙酰乙酸等浓度检测,并以液相色谱-串联质谱(LC-MSMS)进行代谢组学分析。结果与T1DM组相比,T1DM-Cal组的体质量[(326.73±39.86)g比(298.28±39.33)g]及其血浆中的总胆固醇[(1.77±0.28)mmol/L比(1.56±0.22)mmol/L]、高密度脂蛋白[(1.49±0.48)mmol/L比(1.10±0.46)mmol/L]水平显著升高(P<0.05),低密度脂蛋白[(0.17±0.05)mmol/L比(0.23±0.08)mmol/L]、脂蛋白酯酶[(0.23±0.07)mmol/L比(0.34±0.07)mmol/L]、乙酰乙酸[(0.25±0.18)μmol/L比(0.54±0.33)μmol/L]水平显著降低(P<0.05),且均不同程度的接近Control组,而血糖[(18.47±7.36)mmol/L比(19.64±6.16)mmol/L]和三酰甘油[(48.94±10.60)mg/dL比(50.27±14.42)mg/dL]则差异无统计学意义。代谢组学分析结果显示喂食骨化三醇改善了早期1型糖尿病引起的类固醇激素生物合成、初级胆汁酸的生物合成、花生四烯酸代谢、视黄醇代谢等通路的紊乱。结论骨化三醇喂食可改善早期1型糖尿病大鼠血脂组成及反转总胆固醇代谢紊乱,通过影响脂质代谢及调节炎症相关通路而达到一定的治疗效果。

代谢型谷氨酸受体5的纯化及纳米抗体的筛选

文章首先采用细胞表达抑制状态的代谢型谷氨酸受体5(Metabotropic glutamate receptor 5,m GluR5)蛋白免疫野生双峰驼,构建纳米抗体文库,运用M13噬菌体展示技术,筛选出与m Glu R5具有特异性结合的纳米抗体;其次用细胞对m GluR5蛋白进行表达纯化,然后对野生单峰驼进行7次免疫,对抽取骆驼的外淋巴细胞总RNA进行提取,经过反转录的方式转为c DNA,将用巢式PCR对VHH片段进行扩增并与p MECS噬菌粒载体进行连接,并电转化至TG1大肠杆菌中构建纳米抗体噬菌体展示文库;其三通过M13噬菌体展示技术对文库进行淘选,淘选出多个互补决定区3序列不同的纳米抗体;最后纯化出纯度较高的m GluR5蛋白,构建出库容量为5.47×10^(8)CFU/mL的噬菌体文库菌,经过两轮液相淘选,获得了12个互补决定区3序列不同的纳米抗体。研究成功筛选出12个与m GluR5特异性结合较高的纳米抗体,为m Glu R5的靶向药物研发和G蛋白偶联受体的信号通路研究奠定了基础。

大鼠颈上神经节代谢型谷氨酸受体7,8的表达及慢性间歇性低氧对其的影响

目的研究大鼠颈上神经节(SCG)组织中III组代谢型谷氨酸受体7和8(mGluR7/8)的表达、定位,以及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。方法选取8周龄雄性SD大鼠30只,免疫组织化学染色检测大鼠SCG组织中mGluR7和mGluR8的表达。免疫荧光共定位染色检测mGluR7和mGluR8的分布。核浆分离蛋白进行Western blot检测mGluR7和mGluR8在细胞浆和细胞核的分布情况。构建6周CIH大鼠模型,CIH组放于低氧小室中:首先向小室内充入100%氮气,使氧浓度分数逐渐降低至6%并维持30 s,然后充入100%氧气,使氧浓度分数回升至21%,作用周期为4 min/次,8 h/d,对照组放于常氧环境中。通过尾动脉血压检测大鼠收缩压、舒张压和平均动脉压的变化。Western blot检测CIH对SCG中mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。结果大鼠SCG表达mGluR7和mGluR8。mGluR7分布于神经元和小荧光(SIF)细胞,上述细胞胞浆和胞核中均染色阳性,而在卫星胶质细胞(SGCs)、神经纤维和血管中不表达;mGluR8定位于神经元和SIF细胞的胞浆中,而在SGCs、神经纤维和血管中不表达。大鼠SCG核浆蛋白检测结果进一步证实mGluR7不仅存在于胞浆也存在于胞核蛋白中,而mGluR8仅存在于胞浆蛋白中。动物实验结果显示,与对照组相比,CIH升高大鼠的收缩压(P<0.0001)、舒张压(P<0.001)和平均动脉压(P<0.0001)。CIH增加mGluR7和mGluR8的蛋白表达量(P<0.05)。结论mGluR7和mGluR8均表达于大鼠SCG,但是细胞定位方式不同,CIH升高大鼠血压并增加mGluR7和mGluR8蛋白在SCG的表达水平。

Ⅲ型代谢型谷氨酸受体在痛觉调控中的作用

代谢型谷氨酸受体(mGluR)是G蛋白偶联受体,通过与谷氨酸这一主要中枢神经递质结合后而激活。目前已有8种不同的mGluR亚型被鉴定出来,并根据其分子结构、药理学特性和信号转导机制分为Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型。mGluR介导了多种生理功能,如神经元兴奋性和突触可塑性,但它们同时也参与了如疼痛等多种病理条件下的调控。mGluR广泛表达于外周及中枢痛觉调控通路中,近些年来,随着Ⅲ型mGluR新的选择性配体及正性变构调节剂的开发,使得Ⅲ型mGluR在痛觉中的生理及病理性调控作用及机制逐渐明确,提示Ⅲ型mGluR可能是治疗病理性疼痛的潜在靶点。本文就Ⅲ型mGluR在痛觉调控中的作用进行综述。

针刺对缺血性脑血管病模型大鼠脑组织代谢型谷氨酸受体的影响

目的:观察针刺对缺血性脑血管病模型大鼠脑组织代谢型谷氨酸受体的影响。方法:将大鼠分为对照组(Ⅰ组),模型组(Ⅱ组),模型+针刺组(Ⅲ组),每组30只。采用颈内动脉插入线栓法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,处死前30min行针刺干预,观察脑组织代谢型谷氨酸受体的变化。结果:模型组出现受体表达水平增加,随着时间的增加,表达水平呈上升水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。模型+针刺组同样出现表达水平的增加,24h时mGluR1、mGluR3、mGluR8的表达水平较模型组同时段降低,差异具有统计学意义,提示经针刺干预后mGluR1、mGluR3、mGluR8的表达受到抑制。结论:针刺可抑制缺血性脑血管病模型大鼠脑组织代谢型谷氨酸受体的表达,从而减轻脑组织的进一步损伤。

大鼠脊髓后角内5型代谢型谷氨酸受体与C纤维的关系——免疫组织化学及电镜研究

目的 揭示大鼠脊髓后角内 5型代谢型谷氨酸受体 (mGluR5 )与一级传入C纤维的关系。 方法 在大鼠单侧足底注射福尔马林作为疼痛刺激 ,应用免疫组织化学技术光镜下观察疼痛对脊髓后角内mGluR5的影响 ;在大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素 ,以毁损C纤维 ,用免疫电镜技术观察大鼠脊髓后角浅层内mGluR5阳性结构与C纤维间的超微结构关系。 结果 脊髓后角疼痛刺激侧Ⅰ～Ⅱ层内mGluR5免疫反应性较对照侧明显增强 ;在蛛网膜下腔注射辣椒素的大鼠 ,电镜下可见其后角浅层内大量变性的C纤维轴突终末与 1至多个含mGluR5的树突形成突触联系。 结论 提示脊髓后角浅层内mGluR5主要作为突触后受体参与介导和调节C纤维内对伤害性信息的传入。

神经元型一氧化氮合酶在Ⅱ组代谢型谷氨酸受体介导的脑缺血耐受中的作用

目的:探讨神经元型一氧化氮合酶(nNOS)催化产生的一氧化氮(NO)在Ⅱ组代谢型谷氨酸受体(mGluR2/3)介导的脑缺血预处理(CIP)保护机制中的作用。方法:36只永久凝闭椎动脉的SD大鼠随机分为6组(n=6):sham、CIP、损伤性缺血、CIP+损伤性缺血、MTPG+CIP和MTPG+CIP+损伤性缺血组。采用硫堇染色和免疫组化观察海马CA1区迟发性神经元死亡(DND)和nNOS表达的变化。结果:与Sham组相比,CIP组海马nNOS表达出现一定程度的上调,而损伤性脑缺血组则出现nNOS表达的明显上调,预先给与CIP可一定程度上防止损伤性脑缺血所致的nNOS表达的过度升高。在MTPG+CIP组,预先侧脑室注射mGluR2/3阻断剂MTPG,可阻断CIP引起的nNOS表达增加,但对神经元的存活无影响。而在MTPG+CIP+损伤性缺血组中,出现大量锥体神经元DND,同时nNOS的表达较MTPG+CIP组明显增加,该增加为损伤性脑缺血所致,而非MTPG的作用。结论:nNOS催化产生的NO作为mGluR2/3的下游分子参与脑缺血预处理过程中mGluR2/3介导的脑缺血耐受的形成。

强迫谱系障碍与第Ⅱ组代谢型谷氨酸受体相关候选基因位点的连锁分析

目的了解代谢型谷氨酸受体mGlu2受体(mGluR2)基因、mGlu3受体(mGluR3)基因等与强迫谱系障碍(OCSDs)的连锁关系。方法选取一个连续三代发病的强迫谱系障碍家系,采集到该家系中12个正常个体,8个受累个体的血样,选取mGluR2、mGluR3基因附近7对微卫星标记引物,采用两点和多点非参数分析的方法对该家系进行连锁分析。结果7对微卫星标记位点的两点和多点非参数分析LOD值(NPL值),位于mGluR3基因附近的标记D7S644两点非参数分析NPL值为1.719(P=0.078),多点非参数分析NPL值为1.712(P=0.078),达到验证性连锁的阈值(NPL=1.2),但未达到提示性连锁的阈值(NPL=2.2),D7S2481两点非参数分析NPL值为0.628(P=0.179),多点非参数分析NPL值为0.852(P=0.141),接近验证性连锁的阈值,其余5对微卫星标记位点非参数分析NPL值均未达到验证性连锁的阈值。结论提示mGluR3基因与OCSDs可能存在连锁关系,不能排除mGluR2基因与OCSDs的相关性。

Ⅱ、Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体激动剂逆转1-甲基-4-苯基吡啶离子抑制星形胶质细胞摄取谷氨酸

目的 :探讨Ⅱ、Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体(metabotropicglutamatereceptors ,mGluRs)激动剂对 1 甲基 4 苯基吡啶离子 (1 methyl 4 phenylpyridinium ,MPP+ )抑制星形胶质细胞摄取谷氨酸 (Glu)的影响。方法 :应用同位素标记法测定星形胶质细胞对培养液中 [3 H] D ,L 谷氨酸的摄取 ,应用四氮唑 (MTT)比色法检测星形胶质细胞的活性。结果 :MPP+ 15 0、2 0 0 μmol·L-1可以明显抑制星形胶质细胞摄取Glu ,抑制率达 5 8.3%和 70 .1% ,但并不影响细胞活性 ;Ⅱ组mGluRs激动剂 (2S ,2’R ,3’R) 2 (2’ ,3’ dicar boxycyclopropyl)glycine (DCG IV ) 0 .1、 1、 10 ,10 0 μmol·L-1和Ⅲ组mGluRs激动剂L(+) 2 amino 4 phosphonobutyricacid (L AP4 ) 1、10、10 0 μmol·L-1可以逆转MPP+ 对星形胶质细胞摄取Glu的抑制作用。结论 :MPP+ 抑制星形胶质细胞摄取Glu可能与直接影响谷氨酸转运体 (GluTs)的功能有关 ,激活星形胶质细胞上的Ⅱ、Ⅲ组mGluRs可以通过促进GluTs摄取Glu、进而降低细胞外液的Glu浓度而发挥神经保护作用。

代谢型谷氨酸受体Ⅰ组在成年大鼠脑的神经生发区SVZ的表达

成年哺乳动物侧脑室外侧壁的脑室下带(SVZ)具有持续性的神经生发功能。但其受哪些物质调节还不清楚。本研究采 用原位杂交和免疫组织化学方法,显示了代谢型谷氨酸受体I组的mGluR1和mGluR5在SVZ及其邻近室管膜细胞有明显表 达,mGluR5还在侧脑室内侧壁室管膜细胞表达。本研究结果提示,脑室下带细胞可能受谷氨酸的调节。

大鼠脊髓背角内第5型代谢型谷氨酸受体免疫组织化学特征

应用免疫组织化学方法在光镜下观察到 ,大鼠脊髓内第 5型代谢型谷氨酸受体 (m Glu R5 )主要分布在背角 ～ 层内 ;行单侧背根 (L1～ L6 )切断术后 ,未见术侧 m Glu R5免疫反应性明显变化 ;脊神经节内仅见极少数神经元呈 m Glu R5免疫反应弱阳性。由此提示 ,脊髓背角内 m Glu R5的主要来源为非一级传入神经元。免疫电镜研究显示 ,在脊髓背角浅层内 ,m Glu R5主要定位在部分神经元胞体和大量树突内 ,并常见部分含 m Glu R5的树突与具有一级传入C纤维终末形态特征的轴突终末构成突触小球。 m Glu R5在脊髓背角浅层内的超微定位特征表明 ,脊髓背角内的m Glu R5可能主要作为突触后受体介导或调节谷氨酸传递一级感觉 (包括痛觉 )

Ⅰ组代谢型谷氨酸受体拮抗剂对吗啡耐受大鼠热痛阈的影响

目的观察鞘内注射Ⅰ组代谢型谷氨酸受体(mGluRs)拮抗剂对吗啡耐受大鼠热痛阈的影响。方法 36只雄性Spague-Dawley大鼠随机均分为6组,鞘内置管后第4天开始给药。0.9%氯化钠溶液组(C组)予0.9%氯化钠溶液10μL。吗啡耐受组(M组)予吗啡10μg。吗啡+1-胺塞茚满-1,5-二羟酸(AIDA)组(MA组)予吗啡10μg+AIDA60nmol。吗啡+2-甲基-6-苯基苯乙炔-吡啶(MPEP)组(MM组)予吗啡10μg+MPEP60nmol。AIDA组予AIDA60nmol。MPEP组予MPEP60nmol。连续给药7d,每天2次。给药前和给药后30min测定大鼠甩尾潜伏期(TFL)以观察各组热痛阈的变化。结果 M组在第1、2天的TFL显著高于C组(P值均<0.05),随着用药天数增加,M组TFL逐渐缩短,到第7天与C组的差异无统计学意义(P>0.05)。MA组和MM组的TFL也呈下降趋势,但明显缓于M组。MA组第3～7天的TFL高于MM组,但差异均无统计学意义(P值均>0.05)。AIDA组和MPEP组TFL的变化不大,与C组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论Ⅰ组mGluRs拮抗剂有抑制吗啡耐受的作用。

Ⅰ组代谢型谷氨酸受体拮抗药AIDA对吗啡耐受大鼠脊髓pCREB表达的影响

目的观察I组代谢型谷氨酸受体拮抗药AIDA对吗啡耐受大鼠脊髓背角磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白(pCREB)表达的影响。方法24只雄性SD大鼠,随机均分为四组:吗啡耐受组(M组)、AIDA组(A组)、吗啡加AIDA组(MA组)和对照组(C组)。每组连续给药8d,每天2次。行为学上测定大鼠甩尾潜伏期(TFL)观察大鼠吗啡耐受情况,根据公式计算最大镇痛效应百分比(MPE%)。8d后处死动物,采用Westernblot方法测定并比较每组脊髓背角蛋白pCREB表达量。结果第1、2天M组和MA组MPE%明显高于C组(P<0·01),但随着用药天数增加,M组的MPE%逐渐下降,第7天后与C组比较差异无统计学意义。用药后第3至第8天MA组MPE%显著高于M组(P<0·01)。MA组各时点MPE%均显著高于A组和C组(P<0·01)。M组脊髓背角pCREB表达量明显高于其他三组(P<0·01)。MA组pCREB表达量亦较C组和A组升高(P<0·05)。结论吗啡耐受时pCREB表达上调。AIDA可以延缓吗啡耐受形成,其机制与抑制pCREB表达有关。