LCL161联合多西他赛对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖、凋亡的影响及机制

目的观察LCL161联合多西他赛对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 CCK-8法测算1～5μmol/L浓度的LCL161作用于MCF-7细胞24 h后的细胞存活率,选取对细胞增殖无明显抑制作用、细胞毒性较小的2μmol/L浓度的LCL161用于后续实验。将MCF-7细胞分为4组,LCL161组加入2μmol/L的LCL161,多西他赛组加入0. 6 mg/L的多西他赛,LCL161联用多西他赛组加入0. 6 mg/L的多西他赛和2μmol/L的LCL161,对照组加入不含药物的培养液。采用CCK-8法测算各组细胞存活率,采用细胞集落克隆实验检测各组细胞集落克隆能力;采用Hoechst33258染色法观察各组细胞晚期凋亡情况,采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组细胞凋亡抑制蛋白c IAP1、c IAP2及程序性坏死蛋白RIP1。结果LCL161组、多西他赛组、LCL161联用多西他赛组、对照组的细胞存活率分别为86. 84%±3. 83%、81. 29%±6. 71%、46. 91%±4. 76%和92. 77%±2. 18%,集落数目分别为(117±14)、(95±9)、(61±12)、(132±7)个,LCL161组与对照组相比,P> 0. 05;其余组间两两相比,P均<0. 05。LCL161组细胞膜通透性增加,染色质固缩,部分细胞发生了核碎裂;多西他赛组和对照组的细胞核均匀淡染,细胞核形态呈椭圆形,细胞膜相对完整; LCL161联用多西他赛组细胞数量明显减少,细胞核碎裂,部分发生了核解体。LCL161组、多西他赛组、LCL161联用多西他赛组、对照组细胞凋亡率分别为15. 16%±2. 26%、21. 42%±1. 17%、34. 38%±3. 27%、5. 18%±0. 89%,LCL161组与对照组相比,P> 0. 05;其余组间两两相比,P均<0. 05。LCL161组、多西他赛组、LCL161联用多西他赛组、对照组c IAP1蛋白的相对表达量分别为0. 41±0. 09、0. 29±0. 11、0. 11±0. 04、0. 62±0. 17,c IAP2蛋白的相对表达量分别为0. 86±0. 11、0. 77±0. 15、0. 51±0. 12、0. 98±0. 01,LCL161组与对照组相比,P> 0. 05;其余组间两两相比,P均<0. 05。LCL161组、多西他赛组、LCL161联用多西他赛组、对照组RIP1蛋白的相对表达量分别为1. 97±0. 22、1. 84±0. 19、3. 17±0. 26、1. 00±0. 07,LCL161组与多西他赛组相比,P> 0. 05;其余组间两两相比,P均<0. 05。结论LCL161联合多西他赛可抑制乳腺癌细胞的增殖,促进其凋亡; LCL161联合多西他赛可通过下调凋亡抑制蛋白、上调程序性坏死蛋白的表达,诱导乳腺癌细胞的凋亡及程序性坏死来发挥抗肿瘤作用。