目的:本研究旨在检测金属络合物四硫代钼酸铵(ATTM)的硫化氢(H2S)释放能力并进一步观察其减轻氧化应激诱导的皮肤细胞损伤的作用。方法:反应瓶法检测ATTM在细胞培养基中释放的H2S,二氯二氢荧光素二乙酸酯或罗丹明123染色结合荧光...目的:本研究旨在检测金属络合物四硫代钼酸铵(ATTM)的硫化氢(H2S)释放能力并进一步观察其减轻氧化应激诱导的皮肤细胞损伤的作用。方法:反应瓶法检测ATTM在细胞培养基中释放的H2S,二氯二氢荧光素二乙酸酯或罗丹明123染色结合荧光显微镜照相术分别检测细胞内活性氧簇(ROS)的含量和线粒体膜电位(ΔΨm),用试剂盒检测细胞存活率和乳酸脱氢酶(LDH)的释放。结果:与H2S供体GYY4137类似,ATTM在细胞培养基中可剂量依赖性地释放H2S。在25~400μmol/L的浓度范围内,ATTM处理对人皮肤细胞(Ha Ca T细胞)的存活率无明显影响(P〉0.05)。紫外线照射或外源性给予ROS供体(过氧化氢,H2O2)处理均可增加Ha Ca T细胞内ROS的含量。400μmol/L H2O2处理可明显降低Ha Ca T细胞的存活率(P〈0.01),而在H2O2处理前给予ATTM预处理,细胞存活率明显提高,其中在100和200μmol/L浓度时ATTM具有最好的细胞保护作用(P〈0.01)。400μmol/L H2O2处理还可损害细胞的ΔΨm和细胞膜并使LDH释放增加(P〈0.01)。而在细胞遭受损伤前给予200μmol/L ATTM预处理可明显改善ΔΨm的水平(P〈0.05)并抑制LDH从细胞内释放(P〈0.01)。结论:ATTM具有释放H2S的能力并可保护人皮肤细胞对抗氧化应激诱导的损伤效应。展开更多
文摘目的:本研究旨在检测金属络合物四硫代钼酸铵(ATTM)的硫化氢(H2S)释放能力并进一步观察其减轻氧化应激诱导的皮肤细胞损伤的作用。方法:反应瓶法检测ATTM在细胞培养基中释放的H2S,二氯二氢荧光素二乙酸酯或罗丹明123染色结合荧光显微镜照相术分别检测细胞内活性氧簇(ROS)的含量和线粒体膜电位(ΔΨm),用试剂盒检测细胞存活率和乳酸脱氢酶(LDH)的释放。结果:与H2S供体GYY4137类似,ATTM在细胞培养基中可剂量依赖性地释放H2S。在25~400μmol/L的浓度范围内,ATTM处理对人皮肤细胞(Ha Ca T细胞)的存活率无明显影响(P〉0.05)。紫外线照射或外源性给予ROS供体(过氧化氢,H2O2)处理均可增加Ha Ca T细胞内ROS的含量。400μmol/L H2O2处理可明显降低Ha Ca T细胞的存活率(P〈0.01),而在H2O2处理前给予ATTM预处理,细胞存活率明显提高,其中在100和200μmol/L浓度时ATTM具有最好的细胞保护作用(P〈0.01)。400μmol/L H2O2处理还可损害细胞的ΔΨm和细胞膜并使LDH释放增加(P〈0.01)。而在细胞遭受损伤前给予200μmol/L ATTM预处理可明显改善ΔΨm的水平(P〈0.05)并抑制LDH从细胞内释放(P〈0.01)。结论:ATTM具有释放H2S的能力并可保护人皮肤细胞对抗氧化应激诱导的损伤效应。