宫颈疾病液基细胞学和人乳头状瘤病毒脱氧核糖核酸联合检测及与组织学检查的对照研究

目的:探讨薄层液基细胞学技术(TCT)联合第2代杂交捕获乳头状瘤病毒核酸检测(HCII HPV DNA)检测诊断宫颈病变的价值,并总结TCT诊断中漏诊、误诊的原因。方法:收集上海市长宁区中心医院2006—2009年行TCT、HCII HPVDNA检测及阴道镜活检的病例共1050例,分别比较了TCT、HCII HPV DNA及TCT联合HCII HPV DNA检测的诊断效能。对照组织病理学诊断结果,分析了TCT漏诊、误诊的原因。结果:TCT中低度鳞状上皮细胞内病变(LSIL)/高度鳞状上皮细胞内病变(HSIL)与组织学的符合率显著高于未见癌细胞或癌前病变细胞(NILM)/不能明确意义的非典型鳞状上皮细胞(ASUCS),P<0.01;人乳头状瘤病毒(HPV)感染率随病变程度加重而逐步增加(P<0.01);TCT联合HCII HPV DNA检测的敏感性、阴性预测值均显著提高(P<0.01);TCT诊断假阳性的原因主要是对反应性细胞及变性细胞的误诊,而假阴性的原因则是对个别挖空细胞和异形细胞的漏诊。结论:TCT联合HCII HPV DNA检测可以显著提高宫颈病变诊断效能,有助于宫颈癌的早期预防、早期发现、早期治疗。正确的取材、规范的制片、准确的识别反应性细胞、挖空细胞和核深染的异形细胞,将有效地减少假阳性和假阴性率。

薄层液基细胞学技术联合第2代杂交捕获乳头状瘤病毒DNA检测在宫颈癌前病变及宫颈癌筛查的应用价值

目的探讨薄层液基细胞学(TCT)技术联合第2代杂交捕获乳头状瘤病毒DNA(HCⅡ-HPV)检测在宫颈癌前病变及宫颈癌筛查中的应用价值。方法选取110例进行筛查的女性,均行TCT、HCⅡ-HPV检测及阴道镜下病理检查,分析TCT、HCⅡ-HPV检测方法与病理结果的符合情况;以病理结果为金标准,分析TCT、HCⅡ-HPV及两者联合对宫颈癌前病变的诊断效能。结果 TCT检测中仅高度鳞状上皮内病变和鳞状上皮癌与对应的病理分级符合率均高(100%),HCⅡ-HPV仅与宫颈上皮内瘤样病变Ⅲ、原位癌两个病理分级的阳性符合率较高(80%以上),但联合诊断与病理诊断各项分级的阳性符合率均较高,均达90%以上。联合诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均高,且高于单一检测方法。结论 TCT和HCⅡ-HPV联合检测可提高诊断的灵敏度和特异度,增加宫颈癌及癌前病变的阳性检出率,降低漏诊率。

第二代杂交捕获法检测人乳头状瘤病毒DNA在宫颈癌筛查中的应用

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,2008年诺贝尔医学奖研究成果证明：子宫颈癌是由高危型人乳头状瘤病毒（HR-HPV）持续感染引起的恶性肿瘤,是唯一病因明确的肿瘤[1]。本文对我院开展第二代杂交捕获法（HC2）检测HPV DNA进行回顾性分析,探讨其在宫颈癌筛查中的作用及应用中的质量控制问题。

宫颈癌石蜡标本中人乳头状瘤病毒检测方法的初步探讨

目的:探讨适合检测宫颈癌石蜡包埋标本中高危型HPV的方法。方法:用高危型HPV-DNA HC2检测及PCR扩增联合DNA测序法,对25例宫颈癌(宫颈鳞癌23例,宫颈腺癌2例)进行高危型HPV检测。每例取石蜡包埋组织块中的癌组织,21例术前曾于门诊取材(新鲜脱落细胞)行高危型HPV-DNA HC2检洲。结果:(1)21例宫颈癌石蜡标本, PCR扩增法高危型HPV阳性检出率为66．7%;HC2高危型检测阳性检出率为47．6%;(2) PCR扩增法灵敏度为66．7%,特异度为33．3%,与参照标准的符合率为61．9%,阳性预测值为85．7%,阴性预测值为14．3%;(3)HC2检测法灵敏度为44．4%,特异度为33．3%,与参照标准的符合率为42．9%,阳性预测值为80．0%,阴性预测值为9．1%;(4)石蜡标本保存时间与HPV检出率有关。半年以内标本HPV检出率为92．3%(12/13),半年以上者为33．3% (4/12),两者差异有统计学意义(P=0．004)。结论:HPV-DNA扩增(PCR)联合测序法是目前回顾性研究宫颈癌石蜡包埋标本中HPV感染的可行方法;石蜡标本保存时间与HPV检出率有关,石蜡包埋时间越短、标本越新鲜,检出率越高。

攀枝花地区妇女高危型人乳头状瘤病毒感染现状调查及相关因素分析

目的建立攀枝花地区妇女宫颈HR-HPV感染方面的基础数据。方法对2012年3月-2016年3月,攀枝花地区10291例18-65岁妇女用第二代杂交捕获法（HC2 HPV DNA）检测技术进行宫颈HPV感染调查,同时进行妇科检查、液基细胞学检查和问卷调查。结果 （1）10291例妇女HPV总感染率为18.16%。（2）各年龄组间HPV感染的检出率不同,30岁前为第一个感染高峰,〈20岁为25%,20-30岁为22.15%。第二个高峰为50-60岁为19.5%。（3）结合基本信息调查问卷显示HPV感染率与认知程度有一定相关性,与吸烟、饮酒、初次性行为年龄无明确关联。（4）不同细胞学类型的HPV感染率不同,随着宫颈细胞学病变程度的加重,感染率也越高。结论 HPV感染是宫颈病变的主要原因,应加强对已婚妇女的健康教育宣教,增强自我保护意识,定期体检。及早发现HPV感染患者,及时采取相应的医疗干预措施,防治宫颈癌的发生。

高危人类乳头瘤病毒第2代杂交捕获法检测对绝经后不典型鳞状细胞分流的监测意义

目的 探讨高危人类乳头瘤病毒（HPV）第2代杂交捕获实验（hc2）检测应用于绝经后未明确意义的不典型鳞状细胞（ASCUS）分流监测的临床意义.方法 用hc2检测子宫颈脱落细胞,以病理诊断作为金标准对检测结果进行分析和评价,对绝经期前后的阳性率对比分析,对绝经后HPV hc2的特异度、敏感度、准确性、预测值等检测并分析.结果 绝经前ASCUS诊断率为4.47％,占所有绝经前细胞学阳性的52.1％,组织病理学符合率达61.4％;绝经后ASCUS诊断率为9.07％,占所有绝经后细胞学阳性的62.5％,组织病理学符合率仅为8.55％.ASCUS绝经后患者组织病理学对比HPV hc2灵敏度为84.6％,特异性为85.6％,阳性预测值为33.3％,阴性预测值为98.3％.结论 hc2法检测高危型HPV的感染状况为绝经后无明确意义的非典型细胞的改变（ASCUS）提供了有效的分流监测途径.

HC2法检测宫颈HPV感染效能评价

目的 探讨HC2法检测宫颈HPV感染效能遥。方法 收集2014年12月至2015年5月南通大学附属医院妇产科1096例宫颈脱落细胞标本，实时荧光定量PCR法和HC2测定宫颈HPV。以实时荧光定量PCR法作为参照。检验HC2法测定HPV的效能。 结果HC2测定的HPV结果380 例阳性，716例阴性遥PCR测定的HPV结果398例阳性，698例阴性。尚不能认为HC2测定和实时荧光定量PCR测定两种检测方法不同（p=0.069）。HC2阳性结果在1和2之间的假阳性率偏高为22.22%（P约0.001）。HC2阳性结果在1和0.5之间的假阴性率偏高为13.18%（P约0.001）。结论 临床医生在获得患者HC2法HPV检测值在0.5至2之间时，需要结合其他临床表现结果才能分辨出HC2法检测值是否是假阳性或假阴性。

HC2 HPV检测在宫颈病变筛查中的临床应用

目的:对育龄妇女人乳头瘤病毒(HPV)感染的情况分析及探讨宫颈病变筛查临床路径策略。方法:随机选择体检者2070例,妇科门诊就医的患者1405例,采用杂交捕获2代技术(HC2)高危型HPV DNA检测。从1405例妇科门诊患者中抽取297例同时进行HC2 HPV和液基细胞学检查(TCT)患者分析HPVDNA检测预测情况。结果:①体检组、门诊组HPV总的感染阳性率分别为:12.17%、21.28%,差异有统计学意义(P<0.01)。门诊组30～39岁,40～49岁,≥50岁3组的HPV感染阳性率明显高于体检组(P<0.01);体检组以20～29岁感染率最高(20.00%),门诊组以≥50岁组感染率最高(36.50%)。②门诊组HC2HPV与TCT同时检查,以TCT初诊结果≥LSIL为阳性时,HPV阳性预测值15.87%(30/189),阴性预测值100%(108/108)。结论:妇科门诊患者HPV检查有利于宫颈病变筛查。HC2高危型HPVDNA检测阳性后,再进行第二步细胞学检查可以作为宫颈病变筛查的临床路径思路。

2020年适用于宫颈癌初筛的人乳头状瘤病毒检测方法清单

采用高危型人乳头状瘤病毒(hrHPV)检测进行宫颈癌筛查可有效降低宫颈癌发病率和死亡率,但只有经过临床验证的人乳头状瘤病毒(HPV)检测方法才能用于宫颈癌筛查。2020年,全球至少有254种不同的HPV检测方法,其中超过90%缺乏监管评估或并未进行临床验证。基于此,该研究以国际验证标准(Meijer-2009)推荐的第二代杂交捕获法(HC2)和以GP5+/6+为引物的PCR-酶免疫测定法(PCR-EIA)为标准对照,对目前的HPV检测方法进行评估,在2015年系统综述的基础上更新符合国际验证标准(Meijer-2009)的hrHPV检测方法清单。

液基细胞学剩余标本筛查子宫颈病变中人乳头状瘤病毒DNA的应用

目的 评价人乳头状瘤病毒脱氧核糖核酸(HPVDNA)第二代杂交捕获法(HC -Ⅱ)检测液基细胞学剩余标本中高危型(CINⅡ以上)HPVDNA用于筛查宫颈病变的可行性。方法 用HC Ⅱ方法分别对山西襄垣县研究组人群972份液基细胞检查剩余样品和对照组人群5 797份HPV直接取样标本进行高危型HPVDNA检测,以病理学为标准评定2次筛查结果。结果 2次筛查人群中HPV感染率分别为17 .5%和20 .1%。研究组HPVDNA检测检出宫颈高度病变以上的灵敏度和特异度为97 .2%和85. 6%;对照组为96 .6%和83 .2%。2种方法的差异无统计学意义(P>0 .05 )。结论 用HC II检测液基细胞学检查剩余标本中的HPVDNA,可替代HPV直接取样法,该方法也是一种有较好的子宫颈癌筛查方法。

762例妇女宫颈高危型HPV感染与宫颈病变的相关性研究

目的研究妇女宫颈高危型人乳头瘤病毒(hrHPV)感染现状及宫颈病变的感染率,并分析762例妇女年龄与HPV感染及宫颈病变的相关性。方法对762例18～65岁妇女行第2代基因杂交捕获技术(HC2-HPV-DNA)和超薄液基细胞学检测技术(TCT)两种方法联合检测及电子阴道镜下病理活检,并以病理结果为诊断宫颈病变的金标准。结果 762例妇女hrHPV检测阳性率为35.96%(274/762);病理组织学诊断出宫颈癌及癌前病变(CIN)85例;HPV阳性患者的宫颈癌及癌前病变为79例,敏感性为92.94%(79/85)。hrHPV感染情况在不同年龄段分布差异有统计学意义,hrHPV病毒载量及阳性表达率越高宫颈病变的程度越高。结论 HC2-HPV-DNA检测是目前宫颈癌及癌前病变筛查的最好方法;不同年龄段hrHPV感染情况不同;HC2-HPV-DNA检测hrHPV病毒载量及阳性表达率与CIN以及宫颈癌发生有关,但与宫颈病变的严重程度无关。

宁波镇海区女性健康普查及相应HPV检测分析

目的通过对宁波镇海区女性宫颈液基薄层细胞学(TCT)健康普查及相应二代基因杂交捕获法高危型人乳头状瘤病毒基因检测(HC2-HPV-DNA),探讨两种技术联合应用在宫颈癌筛查中的价值。方法对3 216例女性行宫颈TCT检查及相应HC2-HPV-DNA检测,并与病理活检结果进行对照分析。结果在3 216例女性中,TCT检查异常者630例,阳性率19.6%(630/3216);在630例TCT检查异常者中HC2-HPV-DNA检测阳性者383例,阳性率60.8%(383/630)。TCT检查及HC2-HPVDNA检测均阳性的383例行宫颈活检,病理诊断为CIN符合率为97.1%;TCT检查为阳性,HC2-HPV-DNA检测为阴性的247例行宫颈活检,病理诊断为CIN符合率为66.4%,经比较差异有统计学意义(x^2=9.40,P<0.01)。结论宫颈TCT检查与宫颈HC2-HPV-DNA检测的联合应用对有效筛查宫颈癌尤为重要。

两种分子生物学试剂检测高危型HPV不相符结果的验证分析

目的对杂交捕获2代试验(hc2)与荧光聚合酶链反应(PCR)检测高危型人乳头状瘤病毒(HPV)的9例不相符结果进行验证与比对。方法用简并引物-巢式PCR检测样本中是否存在HPV DNA;用DNA测序及反向斑点杂交法对标本中的HPV进行分型。结果通过引物MY09/11和GP5/6进行巢式PCR扩增,9例样本扩增产物电泳后均可见清晰单一的DNA条带。DNA测序证实,在9例样本中HPV高危型3例,低危型5例,另有1例测序结果不清晰者经反向斑点杂交法检测为高危型HPV59与低危型HPV40混合感染。结论hc2法具备较高的真阴性率,其特异性较好;荧光PCR具较高的真阳性率,其敏感性较高。

多重核酸扩增荧光检测技术在宫颈癌筛查中的效果评价

[目的]评价高危型人乳头瘤病毒(HPV)多重核酸扩增(Multiplex PCR)荧光检测技术在宫颈癌筛查中的作用。[方法]2007年10月至2008年6月,对深圳市30～59岁两社区人群(上梅林社区、紫薇社区)和两医院人群(北京大学深圳医院、深圳市妇幼保健院)中合格妇女进行宫颈癌筛查。对每位妇女同时取3份宫颈脱落细胞标本,分别用于第二代杂交捕获试验(HC-Ⅱ)、高危型HPV Multiplex PCR荧光检测和细胞学检查。对两种HPV检测方法任一阳性或细胞学结果异常的妇女行阴道镜下直接活检。以病理诊断为金标准,评价Multiplex PCR荧光检测筛查宫颈癌及宫颈鳞状上皮内高度病变(CINⅡ/Ⅲ)的准确性,并与HC-Ⅱ结果进行一致性比较。[结果]在1988例有效样本中,CINⅡ/Ⅲ和宫颈癌占4.0%。Multiplex PCR荧光检测和HC-Ⅱ的HPV阳性率分别为19.8%和17.8%。Multiplex PCR荧光检测的灵敏度、特异度、Yonden指数、阳性预测值和阴性预测值分别为92.3%、83.1%、75.4%、18.3%和99.6%,HC-Ⅱ的以上各指标分别为97.4%、85.5%、82.9%、21.5%和99.9%。两种方法的一致率为87.8%,Kappa值为0.60。两种检测方法测定的HPV病毒载量均随病变程度加重而增加(P<0.0001)。[结论]高危型HPV Multiplex PCR荧光检测技术的灵敏度和特异度高,与HC-Ⅱ相比两者具有较好的一致性,有较好的临床应用价值。

高危型HPV检测在无颈管/转化区液基标本中的应用

目的评价HPV检测对无EC/TZS成分、涂片阴性的妇女中进行疾病风险评估的价值。方法我们对2009年1月和2012年1月44192例宫颈液基结果进行回顾性分析。依据年龄和有无EC/TZ成分对低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)和高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)进行分组,对高危型人乳头状瘤病毒(hrHPV)DNA检出率进行比较。结果共44192份子宫颈涂片标本,有EC/TZ及无EC/TZ所占比例分别为62.87%、37.13%;整体LSIL检出率为0.78%,HSIL检出率为0.32%。在44192份样本中,总体比较,有EC/TZ组LSIL(P<0.001)、HSIL(P<0.001)检出率高于无EC/TZ组,差异显著;在LSIL组,各年龄段间,以及总体比较,有EC/TZ组HPV检出率与无EC/TZ组无显著差异(P=0.125)。在HSIL组,总体比较,有EC/TZ组HPV检出率与无EC/TZ组无显著差异(P=0.438)。即LSILs和HSILs妇女按照EC/TZS进行分组后,hrHPV检出率没有显著的差异。结论 hrHPV DNA检测对有或无EC/TZS妇女可进行客观有效的分层,是对无EC/TZS成分、涂片阴性的妇女进行疾病风险评估的有用的辅助工具。

贵州地区宫颈癌机会性筛查资料分析

目的探讨贵州地区进行宫颈癌机会性筛查的价值。方法回顾性分析2010年11月-2011年10月贵州省人民医院妇科门诊及住院进行宫颈癌机会性筛查的1 842例患者资料,筛查方法包括液基细胞学技术、宫颈刮片、人乳头瘤病毒(HPV)分型检测、HPV第2代捕获杂交法检测、阴道镜检查,以病理确诊宫颈癌前病变及宫颈癌。结果贵州地区女性人群的HPV平均感染率为21.87%。共检出宫颈癌前病变39例(2.12%),宫颈癌2例(0.11%)。结论医院内就诊女性宫颈病变检出率高,应高度重视其机会性筛查,有助于早期干预治疗。