转录因子Nkx2.5、ISL-1表达与小鼠胚胎心的早期发育

目的：探讨转录因子Nkx2.5和ISL-1的表达与小鼠胚胎早期心发育的关系.方法：胚龄7.5～13d小鼠胚胎连续石蜡切片,用抗α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、抗心肌肌球蛋白重链（MHC）、抗转录因子ISL-1、抗Nkx2.5抗体,进行免疫组织化学显色.结果：转录因子Nkx2.5在胚龄7.5d生心板表达早于心肌特异性蛋白MHC及SMA.随心外形建立,Nkx2.5在心各部表达逐渐增强.胚龄9d, Nkx2.5阳性表达从原始心管动脉端延伸至心包腔背侧脏壁中胚层及咽周围轴旁中胚层.Isl-1开始表达于胚龄8d原始心管心背系膜及前肠腹侧脏壁中胚层间充质,阳性细胞数量在11～12d达顶峰,形成前肠腹侧连接流出道远端和心房背侧壁的ISL-1阳性细胞带.11～12d,流出道远端出现Nkx2.5和MHC阴性,ISL-1、SMA阳性表达区.胚龄13d后,Nkx2.5和ISL-1在心和前肠腹侧间充质的表达强度下降.结论：Nkx2.5是原始生心区心肌前体细胞早期分化的标记蛋白,在第2生心区表达限于胚龄9d、咽周脏壁和轴旁中胚层心肌前体细胞亚群.第2生心区标记蛋白ISL-1主要表达在胚龄8～12d前肠腹侧脏壁中胚层心肌前体细胞,并向心管添加心肌细胞,参与流出道发育及心管成襻.11d后,第2生心区间充质细胞开始分化为升主动脉和肺动脉干平滑肌.

转录因子GATA4与原始心管的形成和静脉端的发育

目的：探讨GATA4表达和原始心管形成及心静脉端发育的关系。方法：用抗转录因子GATA4、抗α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、抗α-横纹肌肌节肌动蛋白（α-SCA）、抗心肌肌球蛋白重链（MHC）抗体，对胎龄7．5～12d小鼠胚胎心连续切片进行免疫组织化学PAP法显色。结果：GATA4在7．5d小鼠胚胎生心板及原始心管呈较强表达，少数细胞显较弱MHC、α-SCA表达，α-SMA表达阴性。胎龄8．5d，第2生心区来源的胚胎心流出道和静脉端明显可辨，强α-SMA表达延伸至流出道、静脉端与心包腔脏壁中胚层的返折处，GATA4和MHC的表达主要集中在“S”型心的左、右心室，随发育逐渐向流出道和静脉端远侧延伸，但GATA4表达先于MHC和mSCA。胎龄9．5d后，静脉窦的形态发生以及窦壁心肌化在并入右心房的过程中逐渐完成。第11天，近右心房的上主静脉壁间充质增生分化形成GATA4和α-SMA阳性的窦房结原基，第12天获得较强MHC表达。间充质细胞向心肌细胞的分化在右下主静脉壁也可见到。结论：GATA4是原始生心区心肌前体细胞向心肌细胞分化的较早的标志蛋白。α-SMA是第2生心区来源的心肌细胞早期分化的标志蛋白，它的表达可能不受GATA4调节。GATA4主要调节定向后心肌细胞的增生和分化以及心管静脉端的正确成襻。