反向点杂交法检测中国人N-乙酰化酶基因型

目的 建立快速方便的反向点杂交法 (RDB)检测中国人N 乙酰化酶 (NAT2 )基因型。方法 采用PCR法扩增生物素标记的DNA片段 ,与固定在尼龙膜上的等位基因特异性寡核苷酸探针进行杂交 ,通过非同位素法显色检测杂交结果 ,分析NAT2 5种主要突变位点。用本法对 4 8名肺结核患者NAT2基因型进行了分析。结果 RDB法与等位基因特异扩增法结果完全一致。 4 8名肺结核患者NAT2 5、 6、 73种突变型等位基因的基因频率分别为 1 0 4 %、2 2 9%和 15 6 %。野生型纯合子、杂合子和突变型纯合子分别为 33 3%、5 4 2 %和 12 5 %。结论 RDB法检测NAT2基因型准确、方便 ,适用于指导临床合理用药。

α和β地中海贫血双重杂合子的基因诊断

目的 :探讨α和β地中海贫血双重杂合子的基因诊断。方法 :采用跨越缺失区断裂点的PCR方法检测α 地中海贫血 1基因。采用等位基因特异寡核苷酸探针 /反向点杂交 (ASO/RDB)技术检测 β 地中海贫血基因。 结果 :对地中海贫血筛查中发现的 3例疑为α和β地中海贫血双重杂合子进行基因诊断 ,均属于东南亚缺失型α 地中海贫血 1和β 地中海贫血双重杂合子 ,其中 1例为α 地中海贫血 1和β 2 8(A→G) ,1例为α 地中海贫血 1和βIVS Ⅱ 6 5 4 (C→T) ,1例为α 地中海贫血 1和HbE。结论 :α和 β地中海贫血双重杂合子的检出对临床准确进行地中海贫血的产前诊断有重要意义。

西藏珞巴族HLA-A,-B基因多态性研究

目的 调查西藏地区珞巴族群体HL A- A,- B基因的多态性。方法 用聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针反向斑点杂交技术,对西藏林芝地区3代内无血缘关系的92个珞巴族健康个体进行了HL A- A,- B位点的基因分型。结果 在HL A- A位点共检出10种等位基因,在HL A- B位点检出19种等位基因;在HL A- A位点高频等位基因是HL A- A* 11、- A* 0 2、- A* 2 4 ,它们的频率分别为36 .4 0 %、2 5 .5 0 %、2 3.90 % ,这3种等位基因共占珞巴族可检出等位基因的85 .80 %。在HL A- B位点高频基因为HL A- B* 4 0 (频率为2 7.2 0 % )、- B* 15 (11.4 0 % )和- B* 38(10 .90 % ) ,它们占等位基因的4 9.5 %。结论 珞巴族与其他各华人群体间都存在较大的差异,显示其HL A等位基因频率分布的民族独特性;但其HL A- A、- B等位基因多态性与藏族的很接近,这与民族学、历史学和社会学研究结果相一致。