血小板输注无效患者HLA等位基因特异性抗体及其表位的分析

目的分析血小板输注无效(PTR)患者中HLA等位基因特异性抗体的特异性和表位情况。方法采用PCR-SBT方法检测患者HLA-A、B基因型,Luminex单抗原微珠包被法检测患者血清中HLA-Ⅰ类抗体。采用HLA比对软件寻找等位基因特异性抗体存在的差异氨基酸,HLA Eplet数据库分析注册表位。结果在82例PTR患者中发现12例患者存在HLA等位基因特异性抗体。经序列比对,共发现了19E>19K、166D>116E、167G>167W等18个差异氨基酸。在这些差异氨基酸中,检索到19E>19K、95I>95L、113YD>113HD等16个注册表位,另有166DG>166EW、70Q>70H、67S>67Y、94I>94T、82LR>82RG、211G>211A可能为尚未注册的新表位。A11、A24、B15、B27、B38等抗原可以进一步细分为HLA窄特异性抗原。结论发现PTR患者存在HLA等位基因特异性抗体,提示PTR的HLA配合性输注中宜对这类患者和血小板捐献者进行HLA-A、-B位点高分辨分型。

HLA⁃A2反应性抗体的产生原因及其eplets分析

目的分析输注相同血清学血小板后产生HLA等位基因特异性抗体的患者与血小板供者的eplets差异。方法利用PCR⁃SBT法检测患者和供者的HLA基因型;借助Luminex单抗原微珠包被法对患者血清中存在的HLA⁃Ⅰ类抗体进行筛选;再通过HLA Matchmaker对患者和供者等位基因上的差异氨基酸和功能性表位进行对比与分析。结果该患者携带HLA⁃A∗02∶03等位基因,输注A2亚型血小板(A∗02∶01、A∗02∶06、A∗02∶07)后体内产生了HLA⁃A2抗体。经序列对比发现,A∗02∶03与血清学同组血小板在第149位氨基酸上存在差异,导致其eplets不同,进而诱导相关抗体的产生。结论HLA抗体对HLA等位基因间因氨基酸差异而导致结构差异的抗原表位具有特异性,宜对患者和供者进行HLA⁃A、⁃B位点高分辨分型,基于表位而不是抗原来确定HLA的可接受错配,以减少同种异体免疫反应和提高血小板输注后计数。