基于温敏性N,N-二甲基丙烯酰胺/N-异丙基丙烯酰胺无规共聚物的毛细管无胶电泳筛分介质

本文合成了N,N-二甲基丙烯酰胺/N-异丙基丙烯酰胺无规共聚物(P(DMA-co-NIPAM))和聚N,N-二甲基丙烯酰胺(PDMA),并将二者共混制备毛细管无胶电泳筛分介质,旨在降低筛分介质粘度的同时增强其对DNA的分离性能。核磁共振氢谱(1H NMR)和傅里叶变换红外光谱(FT-IR)证明了2种聚合物的成功合成。表征了P(DMA-co-NIPAM)/PDMA共混物溶液的流体力学直径(Dh)、低剪切粘度和吸光度,结果表明,P(DMAco-NIPAM)聚合物具有温敏性,低临界溶解温度(LCST)为60~80℃。DNA筛分结果显示,PDMA中添加了10%P(DMA-co-NIPAM)的复合筛分介质性能最好,相比PDMA粘度降低19%以上,对大DNA片段的分辨率和理论塔板数均明显提高,分离时间缩短4%,显示了优良的分离性能。

含有金纳米粒子的筛分介质对不同长度DNA片段的毛细管电泳分离

探讨了含有金纳米粒子(GNPs)的筛分介质在毛细管电泳(CE)中对不同长度DNA片段的分离。以聚环氧乙烷(PEO)-金纳米粒子(GNPs)-TBE为CE筛分介质,用涂层的毛细管柱(37 cm×75μm,有效长度27 cm)分离DNAMarker D和1 kbp DNALadder Marker标准DNA片段,考察了CE过程中各参数(如筛分介质质量浓度、分离电压、温度和筛分介质pH值)对不同长度DNA片段分离的影响。对比了新型筛分介质与不含GNPs的PEO-TBE筛分介质的分离效果,并将新型筛分介质用于实际样品的检测。结果表明,在筛分介质中添加GNPs后能够改进CE的分离效果,且分离时间短。方法较适于分离较宽范围的DNA片段。

毛细管电泳无胶筛分介质分离DNA的机理

快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等。

用于毛细管电泳和芯片电泳DNA分离的筛分介质

毛细管电泳和微芯片电泳是用于核酸分子分离的强有力工具,其筛分介质的选择尤为重要,是目前研究的热点之一。本文是按照均聚物和共聚物的分类,综述了线性聚丙烯酰胺、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚环氧乙烷、聚 N,N-二甲基聚丙烯酰胺、丙烯酰胺与聚 N,N-二甲基聚丙烯酰胺的共聚物等各种筛分体系的性质,包括其优点以及缺点,并对各自在 DNA 等生物大分子分离方面的应用进展进行了评述。简要介绍了筛分机理以及添加剂的加入对提高聚合物的分离能力和稳定性的影响。

基于国产遗传分析仪的毛细管电泳筛分介质的制备

目的制备一种毛细管电泳筛分介质,将其应用于GA118-16A型遗传分析仪上。方法通过聚合反应、冷冻干燥得到白色固体聚丙烯酰胺(LPA),经溶胶缓冲液溶胀后获得所需的毛细管电泳筛分介质。对其分子量、结构等关键性能指标进行表征;并将其应用于GA118-16A型遗传分析仪上,根据空间校正、光谱校正及STR检测结果对其筛分性能进行评价。结果制备的筛分介质Mw 1.8×105Da,Mn 1.2×105Da,多分散性1.5;结构正确且纯度高;在GA118-16A型遗传分析仪上能够建立空间校正、光谱校正文件;能够有效分离相差1bp的DNA片段,峰型尖锐、无杂峰、无拖尾、无丢峰现象。结论该方法制备的筛分介质完全可应用于GA118-16A等国产遗传分析仪。

用于DNA分离的毛细管电泳无胶筛分介质研究进展

毛细管电泳是一种在生命科学应用最为广泛的生物分子分离技术,目前已广泛应用于DNA测序,SNP检测,DNA片段分析等。筛分介质是毛细管电泳性能的关键因素,筛分介质的种类、结构、分子量及所形成的溶液决定着生物分子的迁移特性、分辨率、读出长度、重现性等参数,对分离结果有重大影响。本文对近年来用于DNA分离的无胶筛分介质的研究和应用情况进行综述,希望能对相关研究和鉴定提供参考和借鉴。

无胶筛分毛细管电泳分离盐生盐杆菌DNA片段

由羟乙基纤维素和聚吡咯烷酮混合组成筛分介质 ,在涂敷聚硅氧烷的毛细管柱上 ,研究了LambdaDNA/EcoRⅠ +HindⅢ片段分离的最佳条件。实验表明 ,混合筛分介质与单一的羟乙基纤维素筛分介质相比 ,改变了筛分介质的孔径大小 ,抑制了毛细管壁对DNA的吸附 ,从而改善了分离 ,并首次在同一条件下将所含的 13个片段完全分离。方法简便、快速 ,曾应用于两组盐生盐杆菌DNA片段的分离及其碱基对数目的推测。

无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段的现状与展望

毛细管电泳已DNA片段分离分析的重要手段。本文简述了毛细管电泳中采用无胶筛分介质分离DNA片段的机理研究,介绍了筛分介质近年的研究发展状况,依据分离介质的化学组成,分单聚物、共聚物和混聚物等3个部分进行了评述,并对其发展前景进行了展望。

聚N-异丙基丙烯酰胺无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段

采用0.5%～6%聚N 异丙基丙烯酰胺作为筛分介质,对ΦΧ174/HaeⅢ酶切DNA片段毛细管电泳分离进行了研究,结果表明其筛分效果差,信噪比低。然而,添加适量甘露醇可以显著改善分离效率。在3%聚N 异丙基丙烯酰胺中添加2%～6%甘露醇可以取得较好的分离结果,并对甘露醇改善筛分能力的机制进行了探讨。

单链构象多态性毛细管电泳分析研究进展

基因突变的检测在临床疾病诊断中起十分重要的作用.单链构象多态性(Single Strand Conform ationPolym orphism,SSCP)分析是检测突变最流行的方法之一.SSCP分析与毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE)相结合的技术更是具有灵敏度高、花费低、简单、快速的优点.目前,这项技术已应用于人类原癌基因、抑癌基因以及其它致病基因的突变检测.主要综述了各种参数对CES-SCP分析的影响以及CES-SCP分析技术将来的发展方向.

添加剂在毛细管电泳分离DNA中的作用研究进展

使用无胶筛分介质的毛细管电泳(包括毛细管阵列电泳和微芯片电泳)是最重要的DNA分离技术之一。在低粘度的无胶筛分介质中加入某种添加剂是一种有效且简单的克服填充困难和提高DNA分离性能的方法。本文就各种添加剂(如多羟基化合物、粘土、金纳米粒子、乳胶粒等)对提高无胶筛分介质中DNA的分离性能的作用进行了综述。

叠层筛网透筛率计算

The paper introduces the calculating method of filtering ration of vibration multi-layer screen by calculating injection area with injection mold based on software. Pro/E, which provides powerful support for the design and selectionofmulti-layerscreen.[Descriptors] Multi-Layerscreen Filtering ration Injection