番茄基因转化中抗生素筛选压力的确定方法

在以抗生素为筛选标记的基因转化中,确定适宜的筛选压力是提高基因转化率的前提。本研究以卡那霉素为例,通过在10mg/L,20mg/L,30mg/L,50mg/L,100mg/L的筛选压力下,转化和非转化番茄子叶外植体的生长表现、愈伤组织和芽的分化率,来确定适宜的筛选浓度。本实验以该方法找到的适宜的卡那霉素筛选浓度为50mg/L。以此浓度为筛选压力进行遗传转化所获得的部分再生苗经southernblot鉴定,均为转化株。

金鱼草基因转化中卡那霉素筛选压力的确定

在以抗生素为筛选标记的基因转化中,确定适宜的筛选压力是提高基因转化率的前提。本研究以卡那霉素为筛选标记,在10、20、30、50和100 mg/L的筛选压力下,根据金鱼草下胚轴外植体的生长表现、愈伤组织和芽的分化率确定适宜的筛选浓度。结果表明,适宜卡那霉素的筛选浓度为50 mg/L。以此浓度为筛选压力进行遗传转化所获得的部分再生苗经Southern blot鉴定,均为转化株。

基于底物压力法高效筛选葡萄霉菌病生防菌

为高效获得葡萄霉菌病生防菌菌株,以病原真菌细胞壁的关键组分几丁质和β-1,3-葡聚糖为唯一碳源,通过底物压力筛选法,选择性地富集同时具有几丁质酶活和β-1,3-葡聚糖酶活的目的菌株。结果表明,此筛选方法有效地富集了潜在的目标菌株。挑取的10株菌均具有几丁质酶活和β-1,3-葡聚糖酶活。其中,1号菌株单位菌体几丁质酶活和单位菌体β-1,3-葡聚糖酶活分别达到2. 52,0. 76 U/m L; 6号菌株的则分别为1. 45,3. 99 U/m L。酶学研究证明2株菌的酶均为诱导型,模拟自然条件下,2株菌在培养24或36 h酶活最高。经16S r DNA测序鉴定,2株菌均为假单胞菌,是一种极具生防潜力的内生细菌。

压力筛旋翼和筛框的新设计对脱墨浆筛选的效果

介绍了国外对压力筛转子旋翼和筛框网进行的新研究和新设计及其对脱墨浆筛选的良好影响。新旋翼和新筛框网设计相结合的最好的筛选结果是:⑴节约能耗超过10%～30%;⑵筛渣浓缩减少10%～20%以上;⑶生产能力增加20%～30%以上;⑷优良的筛选浆质量;⑸优良的可运行性。

改进脱墨浆筛选的新型高性能旋翼转子

介绍了新开发的压力筛转子新旋翼,它能改进筛选的质量和可运行性。

提高八楞海棠遗传转化植株再生率技术的研究

为进一步提高八楞海棠遗传转化效率,以八楞海棠试管苗不同组织部位(叶片、叶柄、节间茎段、破坏生长点的茎尖)为外植体,在含有0,1,3,5,10mg/L除草剂草丁膦(glufosinate)的分化培养基(MS+4mg/L6-BA+0.2mg/LNAA)上进行筛选压力的确定,其中3mg/L除草剂为适宜的筛选压力;在此筛选压力下,以八楞海棠不同外植体进行遗传转化,其中破坏生长点的茎尖处理组获得的再生芽效率最高,通过对部分再生苗进行PCR及Southern杂交检测,均鉴定为转化苗。

羽衣甘蓝下胚轴农杆菌介导遗传转化体系的优化

以红鸥羽衣甘蓝下胚轴为试材,首先优化了不定芽分化体系,其次探讨了农杆菌介导遗传转化过程中农杆菌侵染浓度、侵染时间对不定芽分化率的影响及不定芽分化和生根过程中潮霉素B筛选压力,最后对抗性植株进行了潮霉素B筛选基因的PCR检测。结果表明,在MS+6-BA 5.0 mg/L+Ag NO3 9.0 mg/L培养基中不定芽分化率最高,为84.17%;农杆菌侵染浓度OD600值为0.5、侵染5 min时利于遗传转化,分化率为69.17%;不定芽分化和生根过程中潮霉素B筛选压力分别为4.0 mg/L和30.0 mg/L;潮霉素B筛选基因的PCR鉴定结果,在预期的602 bp处出现了条带,初步证明潮霉素B筛选基因已整合到羽衣甘蓝基因组中。

价值链重构视角下企业绿色生态位跃迁路径研究——“卡博特”和“阳煤”双案例研究

采用双案例的研究方法,以化工企业的绿色生态位跃迁为主线,基于价值链重构的视角,探讨绿色生态位跃迁的理论框架。研究表明,在压力筛选的作用下,卡博特(天津)和阳煤集团分别通过组织知识学习和组织变革对价值链重构来应对环境的压力,由此产生了两种不同的绿色生态位跃迁机制:前者通过对价值链内外部知识的整合实现绿色转型;后者通过整合价值链的上下游、横向纵向价值链的延伸发展自己的绿色能力。

枸杞炭疽病菌滤液对枸杞愈伤组织生长及分化的影响

采用Czapek-Dox培养液,通过振荡培养、过滤、离心,获得枸杞炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)培养滤液,配制含不同比例粗毒素液的枸杞愈伤组织培养与分化培养基,研究培养滤液对枸杞叶片愈伤组织生长和分化的影响。结果表明:枸杞炭疽病菌粗毒素液具有较强的生物活性,对枸杞愈伤组织生长及分化均具有一定的毒害和抑制作用;多步正选择法与一步正选择法相比,经过由低到高的选择压力逐级筛选后,可相对提高叶片愈伤组织对毒素的抗性,抗性细胞系筛选的上限浓度可定为浓度50%(v/v),抗性细胞变异系分化培养基中的粗毒素液含量可定为20%(v/v)。

农业农村部推介发布首批711份耐盐碱优异作物种质资源

日前,农业农村部向社会推介发布了第一批耐盐碱优异作物种质资源清单,涉及大豆、水稻、玉米、小麦等10种农作物,共计711份。此次向社会推介发布的首批耐盐碱优异作物种质资源,聚焦粮食和重要农产品稳产保供、种业创新重大需求,有三方面特点:一是鉴定数据准确可靠,这些种质资源都经过了多年多点耐盐碱鉴定和不同筛选压力下的循环选择。

西气东输二线天然气分输控制的探讨与优化

西气东输二线天然气分输站通过PID调节阀向下游用户进行分输控制,本文结合生产过程中天然气分输出现的问题进行分析探讨,提出PID逻辑优化、流量超速失速保护、压力反馈参数筛选等优化建议。

RfN 7012型紧固连接装置在除节机上的应用

对引进的双网压力洗浆机及压力筛选机的一段除节机中RfN7012型紧固连接装置的独特机构及其使用注意事项作一介绍。

全海深高能量密度锂电池组承压电子开关技术研究

针对电子开关在全海深耐压环境下工作的问题,深入研究了电子开关的结构、原理和功能,设计了在深海压力下工作的电子开关,并对电子开关的耐压性能进行了循环压力试验。试验结果表明,电子开关在全海深压力条件下能够正常开通和关断,保护电池组正常工作。

天下纵览

农业农村部推介发布首批耐盐碱优异作物种质资源清单近日,农业农村部向社会推介发布了第一批耐盐碱优异作物种质资源清单,涉及大豆、水稻、玉米、小麦等10种农作物,共计711份。此次向社会推介发布的首批耐盐碱优异资源有三方面特点:一是鉴定数据准确可靠,种质资源都经过了多年多点耐盐碱鉴定和不同筛选压力下的循环选择。

产酸丙酸杆菌耐酸菌株的选育及其应用

为了解除微生物发酵生产丙酸过程中代谢产物(丙酸)对菌体生长的抑制作用,以实验室保藏的产酸丙酸杆菌(耐30g/L丙酸)为出发菌株P-0,通过丙酸压力筛选获得了一株耐10g/L丙酸的产酸性能良好的菌株P-10,降低了发酵过程中丙酸对菌体生长的抑制作用。菌株P-10做摇瓶发酵,发酵周期168h,丙酸浓度为49.66g/L,产酸速率为0.30g/(L·h),较出发菌株P-0提高了53.04%;7L发酵罐实验表明,菌株P-10发酵周期168h,丙酸浓度为55.63g/L,产酸速率0.33g/(L·h)。同时对菌株P-10做二次接种实验,结果表明,84h为二次接种最适时间段,且84h进行二次接种时,丙酸浓度提高了17.77%,二次接种实验不但有利于有机酸的积累,而且可以提高菌株的产酸能力和耐酸能力;经过选育的菌株P-10具有优良的产酸稳定性,有利于菌种的工业化生产和应用,同时对后续的发酵分离耦合具有重要意义。