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利用寡核苷酸探针快速筛选重组克隆
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作者 卢一凡 邓继先 程萱 《生物技术通报》 CAS CSCD 1998年第2期35-37,共3页
提出了利用寡核苷酸探针快速筛选重组克隆的方法,在数小时内即可完成杂交和自显影的过程。以克隆羊β-乳球蛋白基因(BLG)第一内含子为例进行了说明。
关键词 寡核苷酸探针 筛选重组克隆 乳球蛋白基因
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一种基于改进型k-means聚类算法的退役电池组筛选重组方法 被引量:3
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作者 程阳阳 《能源工程》 2022年第4期36-42,55,共8页
随着新能源汽车保有量的逐渐增加,未来几年将会有大量的新能源汽车动力电池组退役,而这些达到退役寿命的电池同样具备潜在的利用价值。从电池单体容量、电量、内阻三个维度出发,针对电池组内单体状态差异性,提出了一种改进型k-means聚... 随着新能源汽车保有量的逐渐增加,未来几年将会有大量的新能源汽车动力电池组退役,而这些达到退役寿命的电池同样具备潜在的利用价值。从电池单体容量、电量、内阻三个维度出发,针对电池组内单体状态差异性,提出了一种改进型k-means聚类方法实现退役电池组的重组,即认为单体的容量、电量、内阻每个维度上的差异对电池组整体不一致性的影响程度不同,进而利用信息熵理论确定每个维度的权重;通过实验对聚类结果进行了验证,结果表明这种方法可以有效筛选出一致性较高的电池单体。在此基础上,进一步提出了梯次利用可能的应用场景,完善了电池组全生命周期的价值链。 展开更多
关键词 新能源汽车 退役电池组 不一致性 信息熵 聚类 筛选重组
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候选菌落直接进行PCR筛选重组子
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作者 唐微 朱明磊 +2 位作者 王珺 王燕 孙晓东 《郧阳医学院学报》 2007年第3期179-180,共2页
关键词 BAR基因 重组筛选
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鼻咽癌相关肿瘤抗原基因的筛选及鉴定 被引量:2
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作者 崔晓波 谢可 +3 位作者 梁传余 邓洪新 魏于全 田聆 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期800-803,共4页
目的通过筛选鼻咽癌肿瘤抗原,为鼻咽癌提供一个早期诊断指标;同时为进一步研究鼻咽癌的免疫治疗奠定基础。方法应用鼻咽癌细胞株异种免疫血清,采用血清学筛选重组cDNA表达文库(SEREX)技术对鼻咽癌cDNA表达文库进行筛选,对阳性克隆测序... 目的通过筛选鼻咽癌肿瘤抗原,为鼻咽癌提供一个早期诊断指标;同时为进一步研究鼻咽癌的免疫治疗奠定基础。方法应用鼻咽癌细胞株异种免疫血清,采用血清学筛选重组cDNA表达文库(SEREX)技术对鼻咽癌cDNA表达文库进行筛选,对阳性克隆测序并进行生物信息学分析。W estern B lot检测鼻咽癌及正常人血清中阳性克隆的抗体。结果共筛选出18个阳性克隆,其中包括M AGE基因、CREM基因、2β-微球蛋白以及核糖体蛋白等已知基因或表达序列标签(EST),另外有6个基因或EST在G enB ank数据库中没有同源性,可能是新基因或EST。选取NPC-14、NPC-15、NPC-18克隆进行鼻咽癌患者及正常人群血清的检测,结果显示鼻咽癌患者的阳性率明显高于正常人群。结论所获得的未知基因产物有可能成为早期诊断鼻咽癌的血清学标志物。 展开更多
关键词 鼻咽癌 肿瘤抗原 血清学筛选重组cDNA表达文库 CDNA表达文库
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SEREX方法筛选人胎盘抗原
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作者 蒋庆源 熊庆 +1 位作者 赵霞 邓洪新 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1032-1035,共4页
目的筛选并获得来自人胎盘有潜在应用价值的抗原。方法基于血清学筛选重组cDNA表达文库(serological analysis of recombinant cDNA expression library,SEREX)技术,制备人绒毛组织免疫的兔血清,利用该免疫血清筛选人胎盘组织cDNA表达文... 目的筛选并获得来自人胎盘有潜在应用价值的抗原。方法基于血清学筛选重组cDNA表达文库(serological analysis of recombinant cDNA expression library,SEREX)技术,制备人绒毛组织免疫的兔血清,利用该免疫血清筛选人胎盘组织cDNA表达文库,通过两轮筛选得到免疫反应阳性的单克隆重组噬菌体并测序,并对所得到的序列进行生物信息学分析。结果经过两轮筛选共得到69个阳性反应克隆,序列分析发现它们代表12种不同的基因序列,其中功能已知基因9个,功能未知基因3个,进一步分析发现绒毛膜生长催乳激素基因(CSH1和CSH2)有57个阳性反应克隆,占总数的82.6%,可能是一个具有重要功能的抗原基因,所筛选到的其他基因与胚胎生长发育相关。结论SEREX技术筛选胎盘抗原是行之有效的,本实验筛选出的抗原基因对研究胚胎生长发育具有一定的意义。 展开更多
关键词 血清学筛选重组cDNA表达文库 人绒毛组织 人胎盘eDNA表达文库 抗原 免疫血清
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例谈教材中涉及的若干筛选问题
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作者 吴浩 《中学生物学》 2010年第9期53-56,共4页
归纳并介绍了教材中经常涉及的若干筛选问题,涉及筛选的原理、方法及应用等方面。
关键词 重组DNA筛选 单克隆抗体筛选 植物体细胞杂交筛选 微生物筛选
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人α-干扰素2b基因转化番茄、番木瓜的研究(Ⅰ)──—人α-干扰素2b基因植物表达载体构建方法的研究 被引量:4
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作者 周鹏 赵志英 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1998年第1期52-57,共6页
以PBV889(α-IFN-2b)为基因供体,利用EcoRⅠ/PstⅠ双酶切分离出基因α-IFN-2b,再利用现有的植物表达质粒ROKⅡ(带PRV-CP基因,35Spromoter/NPTⅡ),用XbaⅠ/SacⅠ双酶切分离出大片段(E6)作为基因受体,采用定向连接法... 以PBV889(α-IFN-2b)为基因供体,利用EcoRⅠ/PstⅠ双酶切分离出基因α-IFN-2b,再利用现有的植物表达质粒ROKⅡ(带PRV-CP基因,35Spromoter/NPTⅡ),用XbaⅠ/SacⅠ双酶切分离出大片段(E6)作为基因受体,采用定向连接法将α-IFN-2b拼接在E6上,完成植物表达载体构建。采用DNAdotblot、RNAdotblot对重组子进行筛选验证。 展开更多
关键词 转基因蔬菜 α干扰素2b 表达载体 重组筛选
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废旧动力电池梯次利用之应急储能设备技术研究 被引量:3
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作者 史甲森 李海鸽 邱焕益 《汽车实用技术》 2020年第10期4-7,共4页
研究首先从废旧动力电池梯次利用的现状展开阐述,利用比亚迪秦80废旧磷酸铁锂动力电池为研究对象,以其储能能力方面的价值为思路展开,根据已有动力电池衰减特性及查阅大量资料,对选用回收的废旧电池包进行彻底充放电、检验、外部结构拆... 研究首先从废旧动力电池梯次利用的现状展开阐述,利用比亚迪秦80废旧磷酸铁锂动力电池为研究对象,以其储能能力方面的价值为思路展开,根据已有动力电池衰减特性及查阅大量资料,对选用回收的废旧电池包进行彻底充放电、检验、外部结构拆解、电芯检测、电芯的利用和分级重组、内阻匹配、筛选分类、重新封装等试验过程,期间采取资料法、比较法、替代法、累积法、控制法、转换法、模型法、数学归纳法、实验推理法等实验方法,完成应急储能设备的制作和测试,达到实验研究的目的。 展开更多
关键词 电动汽车 废旧动力电池 梯次利用 筛选重组 储能设备
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INTRODUCTION OF THE HIGH THROUGHPUT SCREENING SYSTEM
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作者 李元 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2001年第3期179-181,共3页
In this article, we introduce the system of high throughput screening (HTS). Its role in new drug study and current development is described. The relationship between research achievements of genome study and new type... In this article, we introduce the system of high throughput screening (HTS). Its role in new drug study and current development is described. The relationship between research achievements of genome study and new type screening model of new drugs is emphasized. The personal opinions of current problems about HTS study in China are raised. 展开更多
关键词 high throughput screening new drug screening recombinant protein target automatic analysis
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重组酵母筛选法评估黑种草中酚性化合物的雌激素活性 被引量:1
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作者 龚苏晓 《国外医学(中医中药分册)》 2003年第1期41-41,共1页
毛茛科植物黑种草(Nigella damascena)为生长于欧洲温带草原的常见草本植物。其种子芳香,与家黑种草(N. sativa)相同,在地中海以东国家被广泛用作面包和奶酪中的调味剂,民间用于调经。主要成分有生物碱、萜类和一些常见黄酮类化合物。... 毛茛科植物黑种草(Nigella damascena)为生长于欧洲温带草原的常见草本植物。其种子芳香,与家黑种草(N. sativa)相同,在地中海以东国家被广泛用作面包和奶酪中的调味剂,民间用于调经。主要成分有生物碱、萜类和一些常见黄酮类化合物。据报道从黑种草种子极性溶剂提取物中分离出一些简单的酚性化合物。本次采用含有人雌激素受体的体外酵母雌激素筛选法(YES),检测了黑种草种子提取物及其酚性成分的雌激素活性。 展开更多
关键词 重组酵母筛选 评估 黑种草 酚性化合物 雌激素活性
原文传递
De novo Assembly of Pen Shell(Atrina pectinata) Transcriptome and Screening of Its Genic Microsatellites 被引量:3
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作者 SUN Xiujun LI Dongming +3 位作者 LIU Zhihong ZHOU Liqing WU Biao YANG Aiguo 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2017年第5期882-888,共7页
The pen shell(Atrina pectinata) is a large wedge-shaped bivalve, which belongs to family Pinnidae. Due to its large and nutritious adductor muscle, it is the popular seafood with high commercial value in Asia-Pacific ... The pen shell(Atrina pectinata) is a large wedge-shaped bivalve, which belongs to family Pinnidae. Due to its large and nutritious adductor muscle, it is the popular seafood with high commercial value in Asia-Pacific countries. However, limiting genomic and transcriptomic data have hampered its genetic investigations. In this study, the transcriptome of A. pectinata was deeply sequenced using Illumina pair-end sequencing technology. After assembling, a total of 127263 unigenes were obtained. Functional annotation indicated that the highest percentage of unigenes(18.60%) was annotated on GO database, followed by 18.44% on PFAM database and 17.04% on NR database. There were 270 biological pathways matched with those in KEGG database. Furthermore, a total of 23452 potential simple sequence repeats(SSRs) were identified, of them the most abundant type was mono-nucleotide repeats(12902, 55.01%), which was followed by di-nucleotide(8132, 34.68%), tri-nucleotide(2010, 8.57%), tetra-nucleotide(401, 1.71%), and penta-nucleotide(7, 0.03%) repeats. Sixty SSRs were selected for validating and developing genic SSR markers, of them 23 showed polymorphism in a cultured population with the average observed and expected heterozygosities of 0.412 and 0.579, respectively. In this study, we established the first comprehensive transcript dataset of A. pectinata genes. Our results demonstrated that RNA-Seq is a fast and cost-effective method for genic SSR development in non-model species. 展开更多
关键词 SSRs Screening repeats heterozygosity sequencing transcript abundant assembling genomic belongs
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用重组酵母筛选模型评价黑种草中酚类成分的雌激素样活性
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作者 王莹 《国外医药(植物药分册)》 2002年第6期251-252,共2页
黑种草 Nigella damascena L.种子的主要成分为生物碱、萜类和黄酮类。作者采用重组酵母雌激素实验法研究了该植物种子的多种提取物及酚类成分的雌激素样活性。试药为该植物种子的甲醇、氯仿-甲醇和水提取物及3种酚类成分2,4-二羟基苯乙... 黑种草 Nigella damascena L.种子的主要成分为生物碱、萜类和黄酮类。作者采用重组酵母雌激素实验法研究了该植物种子的多种提取物及酚类成分的雌激素样活性。试药为该植物种子的甲醇、氯仿-甲醇和水提取物及3种酚类成分2,4-二羟基苯乙酸(1)、3,4-二羟基-β-苯乙醇(2)和2,4-二羟基苯乙酸甲酯(3),17β-雌二醇作阳性对照。 展开更多
关键词 酚类 重组酵母筛选模型 评价 黑种草 雌激素样活性
原文传递
构建定向T载体用于基因克隆和表达 被引量:10
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作者 钟星 翟超 +5 位作者 陈亮 余晓岚 蒋思婧 严红 杨登想 马立新 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期510-519,共10页
传统的T载体克隆方法需要烦琐的后续步骤来筛选和鉴定重组子,并且无法实现目的基因的定向克隆。为了克服这些问题,本研究在pET-23a(+)的基础上构建了定向T载体pETG,首先通过定点诱变消除pET-23a(+)上的两个BfuⅠ位点得到PET-23aM;设计... 传统的T载体克隆方法需要烦琐的后续步骤来筛选和鉴定重组子,并且无法实现目的基因的定向克隆。为了克服这些问题,本研究在pET-23a(+)的基础上构建了定向T载体pETG,首先通过定点诱变消除pET-23a(+)上的两个BfuⅠ位点得到PET-23aM;设计一对引物在5端各引入一个BfuⅠ位点,下游引物紧邻BfuⅠ位点引入13 bp的部分LacO序列,用该引物从pHBM2002上扩增Prrn-gfp表达盒,插入PET-23aM的NdeⅠ和XhoⅠ位点,得到定向T载体pETG。PCR扩增的目的基因通过下游引物引入7 bp剩余的LacO序列,该基因片段与BfuⅠ酶切制备的定向T载体连接、转化大肠杆菌DH10β感受态细胞,通过补加了X-gal的平板筛选蓝色重组子。质粒酶切和PCR鉴定表明蓝色菌落全部为定向插入的重组子,重组效率100%,利用本方法成功地定向克隆了103个人类肝蛋白编码基因cDNA,克隆过程无需复杂的步骤筛选鉴定重组子。随机选择了其中的8个基因的克隆进行表达,结果显示8个克隆均在大肠杆菌中获得成功表达。该结果表明定向T载体构建成功,并且该载体非常适合基因的克隆和表达。 展开更多
关键词 TA克隆 PCR克隆 重组筛选 蛋白质表达
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基于马梨形虫地方虫株EMA和Bc48基因蛋白抗原的间接ELISA检测方法建立及其应用 被引量:4
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作者 王莉君 宋瑞其 +4 位作者 呼尔查 吾力江·卡马力 樊新丽 党娜娜 巴音查汗 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2350-2355,共6页
以筛选马梨形虫地方虫株EMA和Bc48基因最佳抗原蛋白建立间接ELISA检测方法及其临床应用研究为目的,对已构建保存的pGEX4T-1/EMA1、PET-28a/EMA1、PET-28a/EMA2、PET-28a/EMA3、pGEX4T-1/Bc48和PET-28a/Bc48质粒进行优化表达,经KCl方法... 以筛选马梨形虫地方虫株EMA和Bc48基因最佳抗原蛋白建立间接ELISA检测方法及其临床应用研究为目的,对已构建保存的pGEX4T-1/EMA1、PET-28a/EMA1、PET-28a/EMA2、PET-28a/EMA3、pGEX4T-1/Bc48和PET-28a/Bc48质粒进行优化表达,经KCl方法切胶纯化后作为间接ELISA包被抗原,经表达量、特异性、敏感性、重复性、符合性试验验证,筛选最佳重组抗原蛋白,优化、建立间接ELISA检测方法,并用于临床样品(n=1584)的抗体检测。结果显示,筛选出的最佳重组抗原蛋白为GST-EMA1和His-Bc48,其可溶性蛋白表达量相比之下较高;以GST-EMA1、His-Bc48蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA可明显区分马梨形虫标准阴性和阳性血清;阳性血清梯度效价可达1∶800;批内重复率分别为96%和94%;与商品化cELISA试剂盒检测结果的符合率为96%。所检测的血清样品中,新疆昭苏、米泉、富蕴、阿克苏及和静样品混合感染率分别为2.27%,6.90%,1.72%,0.74%和1.18%;不同年龄马匹之间感染存在显著性差异(P=0.000<0.05)。试验筛选出GST-EMA1、His-Bc48为最佳抗原蛋白,经临床试验验证所建立间接ELISA检测方法的特异性强和灵敏度高,为后期马梨形虫病血清学诊断用间接ELISA商品化试剂盒研制提供实验材料和技术支持。 展开更多
关键词 马梨形虫 EMA基因 Bc48基因 重组抗原筛选 间接ELISA
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