脑源性神经营养因子与心脏微血管内皮细胞的管状形成

背景:研究发现脑源性神经营养因子可促进内皮细胞的存活,诱导血管新生,但其促进血管新生的细胞与分子机制尚不清楚。目的:观察脑源性神经营养因子在3D体外管状形成模型中对心脏微血管内皮细胞管状结构形成的影响。方法:分离提取大鼠心脏微血管内皮细胞并培养使之形成细胞小球,将心脏微血管内皮细胞小球接种于Ⅰ型胶原-甲基纤维素的3D环境中培养,然后分别加入50,70,100μg/L的脑源性神经营养因子继续培养,于培养24,48h观察并测量心脏微血管内皮细胞的分枝长度和分枝条数。结果与结论:经分离的大鼠心脏微血管内皮细胞小球在Ⅰ型胶原-甲基纤维素3D环境中培养24h,均可见管状分枝,且脑源性神经营养因子可促进管状分枝生长,以100μg/L的脑源性神经营养因子的促生长效果最明显,分枝也最多。培养至48h,心脏微血管内皮细胞小球的分枝更长。说明脑源性神经营养因子在3D体外管状形成模型中可促进大鼠心脏微血管内皮细胞发芽及管状结构的形成,且具有剂量依赖性。

华蟾素注射液对人淋巴管内皮细胞增殖及管状结构形成的影响

背景与目的:华蟾素注射液是一种传统抗肿瘤中药制剂,目前药效机制尚不明确。本研究旨在探讨华蟾素注射液对人淋巴管内皮细胞(human lymphatic endothelial cells,HLEC)增殖、迁移和管状结构形成的影响。方法:通过绘制细胞生长曲线,观察华蟾素注射液对HLEC增殖的影响;通过细胞迁移实验观察华蟾素注射液对HLEC迁移的影响;通过基质胶实验观察华蟾素注射液对HLEC管状结构形成的影响;采用蛋白质印迹法(Western blot)观察华蟾素注射液对HLEC中VEGFR-3及HGF蛋白表达的影响。结果:随着华蟾素注射液药物浓度增加(0.105、0.21和0.42μg/mL),HLEC抑制率逐渐增高,迁移率分别为0.87±0.07、0.69±0.05、0.37±0.02,对照组为1±0.03;HLEC成管率为0.90±0.06、0.83±0.02、0.63±0.05,对照组为1±0.02,VEGFR-3/β-actin光密度比值为0.440±0.017、0.618±0.100、0.803±0.091,对照组为1.030±0.017;HGF/β-actin光密度比值为0.293±0.021、0.540±0.027、0.760±0.087,对照组为0.940±0.020(P<0.05)。结论:华蟾素注射液能够显著抑制HLEC增殖、迁移及管状结构形成,并下调VEGFR-3和HGF蛋白的表达,对VFGFR-3信号转导通路的影响可能是抑制肿瘤淋巴道转移的机制之一。

人肝癌HepG-2细胞对人淋巴管内皮细胞增殖及管状结构形成的影响

目的探讨人肝癌HepG-2细胞对人淋巴内皮细胞(HLEC)增殖、迁移和管状结构形成的影响。方法采用transwell方法建立HepG-2细胞与HLEC共培养系统;通过绘制细胞生长曲线,观察HepG-2细胞对HLEC增殖的影响;通过细胞迁移实验,观察HepG-2细胞对HLEC迁移的影响;通过基质胶实验,观察HepG-2细胞对HLEC管状结构形成的影响。结果 HepG-2细胞能够显著促进HLEC增殖(P<0.05),迁移(P<0.05)及管状结构形成(P<0.05),呈剂量依赖性。结论 HepG-2细胞促进HLEC增殖、迁移及管状结构形成可能是肿瘤淋巴道转移的机制之一。

高脂蛋白(a)的冠心病患者内皮祖细胞功能受损

目的比较高脂蛋白(a)[Lp(a)]的冠心病患者和低Lp(a)的冠心病患者内皮祖细胞(EPC)的功能差异。方法酶联免疫法测定Lp(a),差速贴壁法分离EPC,Dil-ac-LDL吞噬及lectin结合鉴定EPC并计数。MTT法检测EPC存活与增殖,改良Boyden小室检测细胞迁移,明胶玻片法检测细胞黏附,杂交瘤皿上观察并计数单个细胞克隆数,基质胶上测量管状结构形成长度。结果高Lp(a)的冠心病患者循环EPC数显著低于低Lp(a)的冠心病患者(109.4±13.8个/视野比384.0±37.0个/视野,P=0.0023);MTT分析显示,低Lp(a)组OD值为0.77±0.05,而高Lp(a)组OD值为0.23±0.04(P=0.0018),表明高Lp(a)的冠心病患者EPC的生存状态较差,这一点在凋亡检测中进一步得到体现,高Lp(a)组EPC凋亡率显著高于低Lp(a)组(14.9%±3.3%比4.1%±0.8%,P=0.035)。与低Lp(a)组比较,高Lp(a)组EPC的黏附(25.3±4.6个/视野比78.6±6.8个/视野,P=0.0030)、迁移(22.0±2.6个/视野比56.0±4.9个/视野,P=0.0037)、克隆形成(2.4±0.4个/视野比11.0±1.3个/视野,P=0.0003)、管状结构形成(7.4±1.2 mm/field比33.3±2.6 mm/field,P=0.0001)均显著受损。结论与低Lp(a)的冠心病患者相比,高Lp(a)的冠心病患者EPC功能受损更严重。

华蟾素注射液对与人肝癌HepG-2细胞共培养下人淋巴管内皮细胞的增殖及管状结构形成的影响

目的探讨华蟾素注射液对与人肝癌HepG-2细胞共培养下人淋巴内皮细胞增殖、迁移及管状结构形成的影响。方法采用Transwell方法建立HepG-2细胞与人淋巴内皮细胞共培养系统;通过绘制细胞生长曲线,观察华蟾素注射液对共培养系统中人淋巴内皮细胞增殖的影响;通过细胞迁移实验,观察华蟾素注射液对共培养系统中人淋巴内皮细胞迁移的影响;通过基质胶实验,观察华蟾素注射液对共培养系统中人淋巴内皮细胞管状结构形成的影响。结果华蟾素注射液能够显著抑制与HepG-2细胞共培养下人淋巴内皮细胞增殖(P<0.05),迁移(P<0.05)及管状结构形成(P<0.05),呈剂量依赖性。结论华蟾素注射液抑制与HepG-2细胞共培养下人淋巴内皮细胞增殖,迁移及管状结构形成,可能是华蟾素注射液抑制肿瘤淋巴道转移的机制之一。

抗肿瘤多肽AP25体外活性研究

目的研究抗肿瘤多肽AP25的体外活性。方法通过MTT实验、细胞迁移实验、管状结构形成实验检测AP25体外活性。结果 AP25对HUVEC、MGC-803、HeLa、HCT116、MDA-MB-231细胞增殖均有明显的抑制作用,对HU-VEC细胞迁移和管状结构形成有明显的抑制作用。结论AP25主要通过抑制内皮细胞的增殖、迁移和管状结构形成,来抑制肿瘤新生血管的生成,进而发挥其抗肿瘤活性,同时AP25也具有直接抑制肿瘤细胞生长的活性。