探讨妊娠合并甲状腺功能减退患者血清簇集素表达水平及与血脂、母婴预后的关系

目的:探讨妊娠合并甲状腺功能减退(overt hypothyroidism,OH)患者血清簇集素(clusterin,CLU)表达水平及血脂、母婴预后的关系。方法:选取我院2020年4月至2021年4月收治的92例OH孕妇,其中妊娠亚临床甲减(subclinical hypothyroidism,SCH)53例,OH39例;同时纳入45例甲状腺功能正常孕妇作为对照组。采取化学发光免疫分析法检测孕妇甲状腺功能指标,双抗体夹心酶联免疫法检测血清脂肪因子CLU水平,分析二者与母婴预后的关系。结果:相比对照组,OH组和SCH组TSH水平更高,FT_(4)、FT_(3)水平更低,且相比SCH组,OH组TSH水平更高,FT_(4)、FT_(3)水平更低(P<0.05);相比对照组,OH组和SCH组FPG、2hPG水平更高,CLU水平更低,OH组FPG、2hPG水平高于SCH组,CLU水平低于SCH组(P<0.05);相比对照组,OH组和SCH组TC、TG、LDL-C水平更高,HDL-C水平更低(P<0.05),且相比SCH组,OH组TC、TG、LDL-C水平更高,HDL-C水平更低(P<0.05);OH组和SCH组母婴不良结局高于对照组(P<0.05);CLU与TC、TG呈正相关(r=0.423、0.442,P<0.05),与LDL呈负相关(r=-0.412,P<0.05);与HDL无关(r=0.058,P=0.587);母婴不良结局组血清CLU、HDL-C水平低于母婴正常结局组,TC、TG、LDL-C水平高于母婴正常结局组(P<0.05)。结论:OH患者血清CLU明显低表达,血清CLU水平与TC、TG呈正相关,与LDL呈负相关;母婴不良结局孕妇血清CLU水平更低。

血清组织激肽释放酶6和簇集素在血管性痴呆患者中的表达及临床意义

目的探究血清组织激肽释放酶6(KLK6)和簇集素(CLU)在血管性痴呆(VD)患者中的表达及临床意义。方法选取2020年7月至2021年8月空军军医大学第二附属医院收治的95例VD患者作为VD组,另选取同期来该院体检的健康者90例作为对照组。比较不同组别中血清KLK6、CLU水平差异。通过Pearson相关分析KLK6、CLU与简易精神状态量表(MMSE)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估KLK6、CLU对VD患者预后发生重度功能障碍的诊断价值。结果VD组患者血清KLK6、CLU水平较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。随着VD患者病情严重程度的增加,血清KLK6和CLU水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。随着VD患者神经功能缺损程度的增加,血清KLK6和CLU水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。血清KLK6、CLU水平与MMSE评分呈负相关,而与NIHSS评分呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,KLK6和CLU检测的曲线下面积(AUC)分别为0.832、0.761(Z=7.221,P<0.05;Z=3.392,P<0.05)。KLK6、CLU两项指标联合检测的AUC为0.873(95%CI:0.838~0.945),其灵敏度和特异度分别为90.48%和79.73%(Z=7.219,P<0.05)。结论VD患者血清KLK6和CLU水平与病情程度及神经功能缺损程度关系密切,二者联合检测对VD患者预后发生重度功能障碍具有良好的诊断效能,可为临床实施早期干预治疗提供科学依据。

簇集素浓度与颅脑损伤严重程度的相关性分析

目的 分析血清、脑脊液中簇集素(clusterin,CLU)浓度与急性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)严重程度的相关性。方法 选取2019年9月至2020年10月嘉兴市第二医院收治的102例急性中重度TBI患者纳入研究,根据时间顺序分为两批,第一批20例通过Westernblot法检测伤后连续4d的血清CLU含量并获取其时间表达图;第二批82例参照血清CLU时间表达图于峰值时间收集血清、脑脊液并通过酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测CLU浓度,根据格拉斯哥昏迷评分(Glasgow coma score,GCS)、鹿特丹CT评分、脑挫裂伤体积分别分组,并比较组间血清、脑脊液CLU浓度的差异;通过Spearman相关系数分析CLU浓度与患者的一般资料、GCS评分、鹿特丹CT评分、脑挫裂伤体积的相关性;多元线性回归分析影响CLU浓度的因素。结果 TBI后患者的血清CLU浓度逐渐上升,并于伤后3d达到峰值;GCS评分分组两组间、鹿特丹CT评分分组三组间、脑挫裂伤体积分组两组间的血清CLU浓度均无统计学差异(P>0.05),脑脊液CLU浓度均存在统计学差异(P<0.05);脑脊液CLU浓度与GCS评分呈负相关(r=–0.542,P<0.05),与鹿特丹CT评分、脑挫裂伤体积呈正相关(r=0.414、0.738,P<0.05);脑挫裂伤体积对脑脊液CLU浓度的影响有统计学差异(β=8.074,P<0.001)。结论 脑脊液CLU浓度可反映TBI的严重程度,主要与脑挫裂伤体积有关。

分泌型簇集素蛋白在肺癌细胞株中生物学行为的研究

背景与目的:簇集素蛋白(clusterin,CLU)在肺癌的发生、发展中发挥重要作用。本研究用分泌型CLU体外处理肺癌细胞株,旨在探讨分泌型CLU对肺癌细胞株的影响。方法:用真核表达纯化的分泌型CLU处理非小细胞肺癌细胞株H460、A549,采用Boyden小室试验检测细胞的迁移能力,用CCK8检测细胞的增殖能力,利用芯片技术分析CLU处理H460细胞的microRNA表达谱,然后采用实时荧光定量PCR检测分泌型CLU处理H460细胞中microRNA的表达,初步分析分泌型CLU执行肿瘤生物学功能的microRNA相关分子机制。结果:分泌型CLU处理组H460迁移的细胞是BSA处理组的3.10倍(P<0.000 1);分泌型CLU处理组A549迁移的细胞是BSA处理组的3.40倍(P<0.000 1);分泌型CLU抑制了肺癌细胞株H460/A549的生长(P<0.000 1);利用芯片技术发现microRNA-302b-3p、microRNA-23a-5p和microRNA-101-5p高表达。结论:在非小细胞肺癌细胞株H460/A549中,真核表达的分泌型CLU促进了细胞迁移、抑制了细胞生长,并且能引起microRNA表达谱的改变,本研究为探索分泌型CLU在非小细胞肺癌中的作用提供了重要的实验依据。

Stanford A型主动脉夹层患者主动脉壁中簇集素的表达水平及其临床意义

目的探讨Stanford A型主动脉夹层患者主动脉壁中簇集素(Clusterin)的表达水平及其临床意义。方法选择13例Stanford A型主动脉夹层患者为病例组,9例扩张型心肌病或冠心病患者为对照组。收集两组患者的主动脉壁标本,测量病例组患者各段主动脉直径。通过苏木精-伊红染色及EVG染色观察两组组织形态和弹力纤维断裂情况;检测两组标本中Clusterin mRNA和蛋白的表达水平;分析病例组患者Clusterin mRNA表达水平与各段主动脉直径的相关性。结果与对照组比较,病例组主动脉壁中平滑肌细胞明显减少、弹力纤维断裂增多,Clusterin mRNA和蛋白的相对表达水平均升高(均P<0.05)。免疫组化染色显示,Clusterin主要定位于细胞质及细胞外基质中,病例组主动脉壁中Clusterin的相对表达水平亦高于对照组(均P<0.05)。病例组患者Clusterin基因的相对表达水平与降主动脉、腹腔干处主动脉直径均呈正相关(均P<0.05)。结论Stanford A型主动脉夹层患者主动脉壁中Clusterin的基因和蛋白水平均升高;Clusterin表达水平上调可能与主动脉夹层的发生和发展均相关。

真核表达分泌型簇集素蛋白的纯化及其功能的初步研究

目的:本研究旨在通过纯化分泌型簇集素(secretory clusterin,sCLU)蛋白,并对其生物学功能进行初步探索。方法:以人肺癌NCI-H460细胞cDNA为模板,构建真核表达质粒pRAG5-ag-sCLU,并转染HEK-293F细胞表达目的蛋白;采用亲和层析柱纯化目的蛋白后,分别采用Flag抗体及clusterin抗体行蛋白质印迹法检测鉴定纯化的sCLU蛋白。采用不同浓度纯化的sCLU蛋白处理NCI-H460细胞,观察其对细胞形态的影响。采用Boyden小室法鉴定sCLU蛋白对肺癌LETP-a-2细胞迁移能力的影响。结果:成功纯化获得具有二级结构的sCLU蛋白;sCLU蛋白浓度为5.4μmol/L时可使NCI-H460细胞的形态发生改变,并促进LETP-a-2细胞的迁移(P=0.0021)。结论:sCLU蛋白可能通过上皮间质转化促进肺癌细胞的迁移,sCLU蛋白的纯化将为其进一步应用于临床研究奠定了良好的实验基础。

血清CLU、NRG-1水平与血管性痴呆患者认知功能障碍严重程度的关系及对预后的价值分析

目的:探讨血清簇集素(CLU)、神经调节蛋白-1(NRG-1)水平与血管性痴呆(VD)患者认知功能障碍严重程度的关系及对预后的价值。方法:选择2020年1月到2022年11月新疆医科大学第一附属医院收治的150例VD患者作为VD组。按照认知功能评分将血管性痴呆患者分为轻度痴呆组60例、中度痴呆组48例以及重度痴呆组42例。随访6个月,根据随访结果将VD患者分为预后良好组与预后不良组。另选同期在我院体检的健康志愿者150例作为对照组。比较VD组与对照组的血清CLU、NRG-1水平;对比不同痴呆程度组血清CLU、NRG-1水平。单因素及多因素Logistic分析VD患者预后不良的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清NRG-1、CLU预测VD患者预后不良的价值。结果:VD组血清CLU水平明显高于对照组,而NRG-1水平明显低于对照组(P<0.05)。中度及重度痴呆组的血清CLU比轻度痴呆组更高,而NRG-1比轻度痴呆组更低(P<0.05)。重度痴呆组的血清CLU比中度组更高,而NRG-1比中度组更低(P<0.05)。随访6个月,无失访病例,预后良好组105例,预后不良组45例。单因素分析显示,预后不良组的年龄、CLU、吸烟及合并高脂血症比例均相比预后良好组更高,而NRG-1、MMSE评分、Mo CA评分及NIHSS评分均相比预后良好组更低(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清CLU升高、合并高脂血症和年龄偏大为患者预后不良的危险因素(P<0.05),而血清NRG-1升高为患者预后不良的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析发现,血清NRG-1联合CLU对预后不良预测价值最高。结论:VD患者血清CLU升高,而血清NRG-1明显降低,与痴呆程度有关。血清NRG-1联合CLU对VD患者预后不良具有较高的预测价值,值得临床关注。