猪源肉孢子虫双重套式PCR检测方法的建立

为了准确快速检测猪源肉孢子虫的种类,本研究根据米氏肉孢子虫和猪人肉孢子虫的18S rRNA基因序列设计双重套式PCR引物,优化并建立能够同时检测这两种猪源肉孢子虫的双重套式PCR方法。结果显示,双重套式PCR对米氏肉孢子虫和猪人肉孢子虫扩增产物的大小分别为415 bp和591 bp,而对枯氏肉孢子虫、刚地弓形虫、犬新孢子虫的检测结果均为阴性,对两种猪源肉孢子虫重组质粒标准品的检测下限均为5拷贝/μL,表明该双重套式PCR具有较强的特异性和较高的敏感性。利用本研究建立的方法随机对22份猪肉样品的检测结果显示,本研究建立的方法与肌肉压片镜检法的阳性符合率为100%,阴性符合率为89.5%,总符合率为90.9%,本研究建立的双重套式PCR方法可以实现对猪肉样品中米氏肉孢子虫和猪人肉孢子虫的快速检测。