GC-IMS比较米泔水制苍术炮制过程中挥发性有机物的变化

目的:比较米泔水制苍术过程中挥发性小分子化合物的成分差异。方法:采用气相色谱-离子迁移谱法对苍术药材、生饮片、水制品、米泔水制品和家种苍术的挥发性有机物进行检测,采用直观比较及指纹图谱法对其进行比较和定性分析。结果:通过气味分析可明显区分苍术不同炮制品,明确定性的挥发性有机物有60个单体及部分化合物的二聚体、聚合物。壬醛、(E)-2-己烯醛、2-戊烯醛、3-甲基-2-丁烯醛和庚醛是苍术药材的特征性挥发性有机物;甲酸、乙酸甲酯是苍术饮片的特征性挥发性有机物;β-榄香烯、β-罗勒烯、柠檬烯、α-异松油烯和β-月桂烯是水制苍术的特征性挥发性有机物;3-甲基丁醛和2-甲基丁醛是米泔水制苍术的特征性挥发性有机物;乙偶姻、芳樟醇、异丁酸芳樟酯、α-松油醇是家种米泔水制苍术的特征性挥发性有机物;2-糠醛是苍术经热处理后的特征性挥发性有机物。结论:苍术不同炮制品挥发性有机物确有差异,米泔水的加入起到了减少萜类成分的作用,为更好地阐明经典名方中传统炮制方法原理提供参考。

基于“健脾降燥”理论的射干生品与米泔水炮制品的对比研究

目的观察对比射干生品及米泔水炮制品对正常大鼠一般状态、淀粉酶及胃泌素的影响,以进一步探讨经米泔水炮制后的射干是否具有健脾降燥作用。方法选取SPF级SD大鼠39只,随机分为3组(空白组及2个提取物组),药1为生品提取物,药2为米泔水制品提取物。药1和药2组分别给予各自提取物,折合成射干生药量为20g/kg,1次/d,共21d;空白组则给予等量生理盐水。每日称重、观察进食量及大鼠一般状态。计算脾指数,用ELISA法分别测定各组SD大鼠血清中淀粉酶及胃泌素的含量,并进行比较。结果药1组大鼠14d开始出现如萎靡倦怠、摄食量减少、体重降低、便软不成形等表现,药2组变化不明显;体重方面与空白组比较药1组有下降趋势,药2组则明显上升。此外,药1组脾脏指数低于空白组而药2组高于空白组。药2组血清淀粉酶含量高于空白组和药1组,与药1组比较差异有统计学意义;药1组与药2组胃泌素含量差异有统计学意义。结论射干经米泔水炮制后可能通过增加健脾降燥作用缓解了药物毒性。

基于肠道微生态的米泔水制苍术健脾止泻药效及其机制研究

目的:研究米泔水制苍术对大黄致脾虚泄泻大鼠的治疗作用及其对肠道菌群结构的影响。方法:将42只Wistar大鼠随机分成7组,分别为正常对照组、模型对照组、盐酸小檗碱片0.09 g/kg组、米泔水制苍术1.89、7.56 g/kg组和生苍术1.89、7.56 g/kg组。除正常对照组外,其余各组均按40 g/kg给予200%大黄水煎液灌胃建立脾虚泄泻模型。造模成功后,各组分别灌胃相应药物,正常及模型对照组灌胃生理盐水,连续7 d。观察大鼠给药前后精神状态,测定粪便含水率;采用HE染色观察大鼠结肠组织病理学变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清中胃动素(MTL)、D-乳酸和白细胞介素-1β(IL-1β)含量;基于16S rDNA高通量测序分析肠道菌群的结构和多样性。结果:与正常对照组比较,模型对照组粪便含水率显著升高,结肠结构损伤显著,血清MTL、D-乳酸和IL-1β含量显著升高(P<0.01);与模型对照组相比,米泔水制苍术7.56 g/kg组的粪便含水率显著降低,结肠病理结构显著改善(P<0.01),血清MTL、D-乳酸和IL-1β含量显著降低(P<0.05);脾虚泄泻模型对照组大鼠出现明显肠道菌群紊乱,米泔水制苍术7.56 g/kg组给药后可明显增加乳酸杆菌属、普雷沃菌属和拟杆菌属相对丰度,降低拟普雷沃菌属、瘤胃球菌属、考拉杆菌属、毛螺菌属细菌的相对丰度,并显著提高肠道菌群的丰富度和多样性(P<0.05)。结论:米泔水制苍术对脾虚泄泻模型大鼠有止泻、抑制肠道炎症、减轻胃肠蠕动和损伤的作用,其健脾止泻机制与肠道微生态密切相关。

北苍术米泔水炮制前后化学成分变化及其对脾虚泄泻大鼠肠道真菌菌群的影响

目的 探究北苍术Atractylodes chinensis米泔水炮制前后成分变化及其对大黄所致脾虚泄泻模型大鼠肠道真菌菌群的影响。方法 采用气相色谱串联四极杆质谱仪联用技术(GC-MS)和HPLC法对北苍术生品及其米泔水炮制品化学成分进行对比分析,利用ITS高通量测序技术,探究其对大黄所致脾虚泄泻模型大鼠肠道真菌群落变化的影响。结果 GC-MS和HPLC结果显示,炮制前后化学成分类型没有改变,而成分含量多有变化,其中挥发油类(茅术醇、β-桉叶醇、α-红药没醇、苍术酮)炮制后含量显著降低(P<0.05),多数酯类成分炮制后含量增加,可能与北苍术“炮制减燥”有关。高通量测序结果显示,属水平上,生北苍术组真菌群落结构与模型组相似,而米泔水制北苍术组更接近于空白组,说明米泔水制北苍术能够调节大黄所致的脾虚型腹泻,对于肠道真菌菌群的调控能力优于生北苍术。Pearson相关性分析表明,部分真菌菌群与活性成分含量相关,如线黑粉酵母属Filobasidium sp.、链格孢属Alternaria sp.真菌与米泔水制北苍术中白术内酯II含量显著正相关(P<0.05),与苍术酮含量呈显著负相关(P<0.05)。结论 北苍术米泔水炮制前后化学成分含量存在差异,其中茅术醇、β-桉叶醇、苍术酮与北苍术炮制减燥及治疗脾虚泄泻疾病有密切关系,米泔水制北苍术对模型大鼠肠道真菌调控能力优于生北苍术,该研究结果可为扩大米泔水制苍术临床应用提供理论参考。

基于药效学和代谢组学考察北苍术不同炮制品对脾虚大鼠的影响

目的:通过北苍术生品、麸炒品和米泔水制品对脾虚大鼠药效学和代谢组学研究,明确北苍术不同炮制品的药效和作用机制的差异。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、生苍术组、麸炒苍术组、米泔水制苍术组和参苓白术散组,每组10只,采用疲劳过度加饮食不节法造成大鼠脾虚模型。除空白组和模型组外,上述给药组分别给予生苍术(3.75 g·kg^(-1))、麸炒苍术(3.75 g·kg^(-1))、米泔水制苍术(3.75 g·kg^(-1))和参苓白术散(6.7 g·kg^(-1))混悬液,考察各组大鼠的免疫器官系数,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血浆中与消化道炎症有关指标白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白(Ig)G,与消化系统相关的指标淀粉酶(AMS)、胃动素(MTL)、胃泌素(GAS),与燥性相关的指标Na^(+)-K^(+)-三磷酸腺苷(ATP)酶、大鼠肾组织中水通道蛋白2(AQP2)、大鼠结肠组织中水通道蛋白3(AQP3)与水通道蛋白8(AQP8)的水平。采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)结合正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)寻找脾虚大鼠血浆样品中的生物标志物[P<0.05和变量重要性投影(VIP)值>1],比较3种炮制品对脾虚生物标志物的不同调节作用,并通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库进行代谢通路分析。结果:与空白组比较,模型组大鼠胸腺指数和脾脏指数均明显降低(P<0.05),IL-6、TNF-α、Ig G与AQP2含量明显升高(P<0.05),AMS、GAS、MTL、AQP3、AQP8与Na^(+)-K^(+)-ATP酶含量明显降低(P<0.05)。与模型组比较,生苍术、麸炒苍术和米泔水制苍术均能提高胸腺指数和脾脏指数(P<0.05),降低IL-6、TNF-α、Ig G和AQP2(P<0.05),不同程度地提高AMS、GAS、MTL、AQP3、AQP8和Na^(+)-K^(+)-ATP酶水平。与空白组比较,模型组共筛选出176个差异代谢物,生苍术、麸炒苍术和米泔水制苍术分别回调了其中的75、72、84个生物标志物(P<0.05,P<0.01)。生苍术主要影响了甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢。麸炒苍术主要影响了丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢。米泔水制苍术主要影响了甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,柠檬酸循环,硫胺素代谢,D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢。结论:生苍术、麸炒苍术和米泔水制苍术均有较好的健脾作用,其中麸炒苍术和米泔水制苍术的作用更强。同时,生苍术燥性最强,麸炒苍术其次,米泔水制苍术燥性最弱。3种苍术炮制品能够显著回调脾虚大鼠代谢异常,其机制可能与调节机体甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等氨基酸代谢有关。

3种炮制方法对湖北茅苍术挥发油的化学成分的影响

目的:分析比较湖北茅苍术麸炒、米泔水制、清炒3种不同炮制品中挥发油的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取3种不同的湖北茅苍术炮制品挥发油成分,通过气相色谱-质谱法(GC-MS)进行化学成分分析及鉴定,并采用峰面积归一化法计算各成分的相对质量分数。结果:从3种挥发油中共分离88种组分,鉴定出87种挥发性化学成分,其共有成分51种,鉴定出的各样本化学成分平均占其总挥发油的94.61%。结论:3种不同湖北茅苍术炮制品中挥发性化学成分及含量存在一定差异。