米非司酮(RU486)的临床应用及前景

黄体激素,即孕酮(P)对妊娠的建立和维持起重要作用。在形成分泌期内膜时,必须有孕酮存在,否则胚胎不能着床及获得营养。月经中期促黄体激素(LH)浓度升高是排卵的信号。此外,孕酮还有抑制子宫肌层收缩的作用,保证妊娠子宫处于安静状态,雌激素(E)和孕酮的平衡向雌激素侧重时,促使前列腺素产生增加,启动足月或接近足月的妊娠分娩。在正常妊娠的最后几周内,孕酮可能与宫颈的成熟有关。孕酮在生殖过程中有多种重要的作用,从而使黄体激素拮抗剂(抗P)

米非司酮(Ru486)流产与人工流产适应证的对比

目的 :通过临床观察 ,证实药物流产的有效性与可靠性。方法 :随机将 480例妊娠妇女分为观察组 35 2例行药物流产与对照组 1 2 8例行人工流产进行对比 ;结果 :药物流产对早、中期妊娠各种情况均较人工流产组成功率高 ,经统计学检验 ,有显著差异 (P<0 .0 1 )。结论 :药物流产是终止早、中期妊娠安全。

RU486对早孕妇女蜕膜组织级体激素受体含量及血清激素水平的影响

RU486是法国Roussel Uclaf公司合成的一种孕酮受体水平拮抗剂,临床实践证明该化合物具有较好的催经止孕效果。为进一步明确RU486的作用机理,本文测定了早孕妇女服用RU486后蜕膜组织孕、雌激素受体含量及血清激素水平。结果表明,一次口服RU486 600mg可使早孕5—7周妇女蜕膜组织细胞核内孕、雌激素受体含量增加,细胞浆内孕激素受体含量减少,血清雌二醇(E_2)、睾酮(T)含量上升而对FSH、HCG和孕酮(P)含量无明显影响。本研究结果进一步证实,大剂量的抗孕激素RU486能竞争性地结合蜕膜组织孕激素受体,使早孕期高浓度的内源性孕酮与其受体的正常结合受到干扰,从而达到抗早孕目的。

RU_（486）对大鼠早、中期妊娠影响的研究

应用光、电镜方法观察ＲＵ４８６对早期和中期妊娠大鼠脑垂体、卵巢、子宫、胎盘及肝脏的影响。妊娠大鼠分别在受孕第７天（ｄ７）和第１０天（ｄ１０）给药１．２５ｍｇ／只。中期妊娠大鼠给药后２４ｈ全部流产，蜕膜坏死；４８ｈ子宫内膜修复正常。黄体细胞内脂滴增多、退变。血清孕酮水平低于对照组。早期妊娠大鼠给药后４８ｈ，个别胚胎发育与对照组相似，其余胚胎和胎盘均解体，其中２例子宫已修复。黄体和脑垂体促性腺激素细胞的结构及血清孕酮水平与对照组比较无明显差异。提示：ＲＵ４８６对大鼠抗中期妊娠效果比抗早孕好。

RU486对人早孕绒毛中纤维蛋白溶酶原激活与抑制系统的影响

目的：探讨ＲＵ４８６对离体培养人早孕绒毛滋养细胞分泌ＰＡｓ及ＰＡＩ┐１、ＰＡＩ┐２的影响，比较药物流产与正常绒毛中ｔＰＡ、ｕＰＡ、ＰＡＩ┐１及ｕＰＡ┐Ｒ表达的差异。方法：应用纤维蛋白琼脂糖铺盖及反向铺盖技术分别检测细胞培养液中ＰＡ与ＰＡＩ┐１的活性，采用琼脂糖指示胶直接点样法测定ＰＡＩ┐２活性。分别应用免疫组织化学与原位杂交技术检测绒毛组织细胞中ｔＰＡ、ｕＰＡ、ＰＡＩ┐１与ｕＰＡ┐Ｒ的抗原及ｍＲＮＡ的存在与分布。结果：受ＲＵ４８６刺激，离体培养绒毛滋养细胞分泌的ＰＡ┐ＰＡＩ复合物的水解活性增加，而ＰＡＩ┐１与ＰＡＩ┐２的活性则受抑制。口服米非司酮药流绒毛滋养细胞中ＰＡＩ┐１及ｕＰＡ抗原含量低，而ｕＰＡ┐Ｒ的ｍＲＮＡ含量显著增加。结论：ＲＵ４８６增加早孕绒毛中纤溶活性，从而使细胞外基质蛋白水解作用加强，绒毛的固着性可能因此松动。

减量RU486配伍卡前列甲酯栓终止早孕的临床研究

考虑到米非司酮(RU486)终止早孕的效果与药物剂量无相应关系,本文将法国RU486由600mg减量至200mg配伍卡前列甲酯栓(卡孕栓),PG051mg终止早孕≤49天的完全流产率为91.92%,不完全流产率5.55%,失败率2.53%。放置PG05后6小时内排出胎囊占92.6%。服药后的副反应,流产后出血量和月经恢复情况与过去使用600mg RU486均相似。建议今后临床使用RU486200mg配伍前列腺素作为药物流产的处方。

芎归胶艾汤对RU486致流产小鼠Th1／Th2型细胞因子的影响

为了研究芎归胶艾汤的促孕保胎作用及其对母胎界面Th1/Th2型细胞因子的影响,取怀孕小鼠分成4组,分别为对照组、RU486组、RU486+孕酮组、RU486+芎归胶艾汤组。除对照组外,其它3组于孕4 d(GD4)7:00皮下注射RU486 0.5 mL,同时孕酮组注射0.1 mL孕酮,中药组灌服芎归胶艾汤0.8 mL,各组分别在GD4下午19:00,GD5上午7:00,GD5下午19:00取材。统计胚泡数,酶联免疫吸附法(ELISA)测定子宫匀浆中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的含量。结果表明:RU486显著降低胚泡数,Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2的水平显著升高,Th2型细胞因子IL-4和IL-10的含量显著下降。补充孕酮或芎归胶艾汤显著逆转了RU486引起的流产,同时降低了Th1型细胞因子水平,提高了Th2型细胞因子水平,表明芎归胶艾汤能够作用在母胎界面,调节着床和妊娠期细胞因子平衡,利于胚胎着床和妊娠维持。

联合应用dI-15-甲基PGF_(2α)与RU486抗早孕的临床研究

本文报道80例早孕≤49天,用不同剂量dl-15-甲基PGF_(2α)(以下简称PG)与不同剂量RU486配伍,分成三组,进行抗早孕比较,结果三组成功率达100%,完全流产率94.87%。三组完全流产率无显著差异。组ⅢRU486 25mg,每日2次,2天总量100mg,第三天加PG 0.5mg 肌注,完全流产率95%,大大减少PG 用量,明显减轻了副反应,为三组首选抗早孕配伍。为目前国内外报道抗早孕的RU486最小剂量。

口服Misoprostol与Ru486配伍抗早孕临床研究

对50例妊娠≤49天的健康妇女,应用Ru486和Misoprostol(又称米索前列醇)终止妊娠。结果完全流产率98％,6小时内绒毛球完整排出占89.8％,副反应轻微。口服Misoprostol与Ru486配伍抗早孕方法简便、高效、安全、价格低廉,值得推广应用。

联合使用Ru486和PG05抗早孕的临床观察

Ru486为法国 Russel Veleg 公司生产的抗孕酮药物,具有催经止孕的作用,单独使用 Ru486引产国内外均有报告。为提高 Ru486的抗早孕疗效,近来国际上在联合用药方面进行了许多研究,并取得一定进展。我所1987年9月至1988年5月联合使用 Ru486和 PG05(15甲基前列腺素阴道栓剂,

地塞米松和RU-486作用人晶状体上皮细胞后糖皮质激素受体和Caspase-3的表达变化

目的研究在地塞米松和糖皮质激素受体抑制剂RU-486作用下,人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs)中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)和Caspase-3的表达变化。方法用0.1μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L、5μmol/L地塞米松作用人晶状体上皮细胞24 h、32 h、40 h和48 h或与RU-486共作用4个时间段后,糖皮质激素反应元件(glucocorticoid response element,GRE)和GR-alpha基因的表达变化用转染和实时定量PCR法测定。细胞的增殖情况用MTT法测定。Caspase-3的表达情况用Caspase-3活性试剂盒测定。凋亡细胞率和GR蛋白的表达情况用流式细胞术(flow cytometry,FCM)和间接免疫荧光法测定。结果 0.1μmol/L浓度地塞米松作用HLECs 4个时间段后可以导致GRE-荧光素酶,GR-alpha基因,GR-蛋白和Caspase-3活性的升高,而在4个浓度地塞米松作用24 h后可以导致GRE-荧光素酶的,GR-alpha基因的升高,作用40 h后可导致GR-蛋白的升高。结论GRs与HLECs的增殖力有密切关系;RU486可以全部或部分地抑制GR的表达。虽然RU486可以提高Caspase-3的表达,但可能抑制由GR介导的其它凋亡蛋白的表达,因此它可以提高HLECs的增殖率并且无明显的凋亡细胞率的升高。

RU486对体外大鼠垂体胞液孕激素受体的作用

Sprague-Dawley去卵巢雌性大鼠,经雌激素刺激6天后,取垂体制成胞液。以3~H-R5020为配基,用羟基磷灰石吸附已结合配基的受体分子来测定垂体胞液中孕激素受体的结合活性;由测得的饱和曲线Scatchard作图法计算孕激素受体和配基结合的平衡解离常数(Kd)等于1.8nM,最大结合位点为138fmoles/mg蛋白。RU486可抑制3~H-R5020与垂体胞液孕激素受体的结合,抑制是竞争性的。非标记的RU486、R5020或孕酮都可竞争3~H-R5020与孕激素受体的结合,三者的竞争能力无明显差异。本实验表明在离体情况下RU486可与垂体胞液孕激素受体相结合,其亲和力与R5020或天然配基孕酮相类似。

RU486抗早孕蜕膜血管形态计量学研究

目的:研究RU486抗早孕子宫出血时间长的机理。方法:应用MIPS图象分析系统,测定RU486药物流产(药流)者的蜕膜及负压吸引人工流产者的蜕膜血管总截面积及血管密度。结果:RU486药物流产后蜕膜血管总截面积及血管密度均明显小于人工流产组者,差异有显著性(P<0.05)。结论:药流者子宫出血时间长可能与RU486、米索前列醇二者合用影响人蜕膜血供有关。

不同超剂量组RU_(486)对大鼠卵巢中细胞亚显微结构的作用

目的 :电镜下观察不同时间、不同超剂量组 RU486 对大鼠卵巢中细胞亚显微结构的影响 ,从形态学角度研究 RU486 避孕机制。方法 :给实验大鼠灌服不同超剂量 RU486 ,于不同时间取卵巢组织 ,制作电镜标本并观察。结果 :实验各组生长卵泡发育不良或闭锁 ,未见成熟卵泡和黄体 ,闭锁卵泡、间质腺增多 ,卵泡细胞、间质腺细胞内含大量脂滴、空泡、滑面内质网 ( SER)及次级溶酶体 ( s Ly) ,巨噬细胞、变异颗粒细胞内出现残余体和聚集成团的溶酶体 ( L y) ,其超微结构改变随用药时间延长而加重。结论 :使用不同超剂量 RU486 可抑制卵泡发育成熟及黄体形成 ,并对卵巢内部分细胞的细胞器有一定的损害。

服用RU486及米索前列醇作为每月一次避孕药的研究

本研究旨在观察服用ＲＵ４８６及米索前列醇作为每月一次避孕药的有效性、安全性和可接受性。共接纳２４例对象，观察了８４个周期。用药方案为：预期月经来潮前一日服用ＲＵ４８６２００ｍｇ，４８ｈ后在家中服用米索前列醇４００μｇ。结果显示，妊娠率约为２２．６２％。１９个妊娠周期中有１３个周期完全流产（６８．４２％），２个周期不全流产（１０．５３％），４个周期继续妊娠（２１．０５％）。８４个观察周期中有６个周期出现２次阴道流血，１个周期出现３次阴道流血，７个周期出现周期延长。２４例对象中仅１例因乏力、嗜睡影响工作和生活而退出研究，其余仅极个别对象有恶心、下腹部疼痛、手麻等副反应，但都无需治疗。结果表明用本方案作为每月一次避孕药的效果和可接受性并不理想。

RU486调控的红色荧光蛋白真核载体的构建及表达

目的构建一种带有DsRed红色荧光蛋白报告基因并可经RU486诱导的真核表达载体,并在体外验证其调控表达作用。方法利用分子生物学技术,将DsRed基因和启动子,以及RU486系统构建成真核可调控载体pRS17-RUDsRed。在转染MFC细胞后,运用荧光显微镜和流式细胞技术检测该载体的调控表达。结果PCR和限制性酶切及测序均证实了载体的正确性。没有RU486时,几乎没有红色荧光蛋白的表达,加入诱导剂RU486后,可以实现红色荧光蛋白的高效表达。结论成功构建了带有红色荧光蛋白报告基因并可经RU486诱导的真核表达载体,实现了对目的基因表达的有效调控,为进一步的基因调控研究和和基因治疗奠定了基础。

RU486在妇产科临床应用的进展

早期的研究结果认为,RU486可与糖皮质激素及孕激素受体竞争性结合而发挥拮抗作用。由于其拮抗孕激素作用较强,因而,目前临床主要作为孕激素受体拮抗剂应用。

RU486逆转糖皮质激素对白细胞介素-2生成和基因表达的抑制作用

本文应用细胞培养、＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入、ＩＬ－２依赖细胞株ＣＴＬＬ－２、斑点杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析等方法，观察到糖皮质激素受体拮抗剂ＲＵ４８６能逆转糖皮质激素（地塞米松）对大鼠脾淋巴细胞增殖、ＩＬ－２产生和ＩＬ－２基因表达的抑制作用。本文证实，糖皮质激素对淋巴细胞增殖、ＩＬ－２生成和ＩＬ－２基因表达的抑制作用是通过淋巴细胞内的糖皮质激素受体来实现的。

RU486代谢物和微量杂质的合成与鉴定

本文以RU486为起始物,经一步氧化去甲基反应,直接得到了11β-[4-(N-甲基-胺基)-苯基]-17α-丙炔基-4,9-雌二烯-17β-羟基3-酮和11β-[4-(胺基)-苯基]-17α-丙炔基-4,9-雌二烯-17β-羟基-3-酮。本法较国外专利报道的方法大为简化,而且避免使用一些难得的价格昂贵的试剂。用本法制得的样品,确证了国内外RU486样品中两个难以用纯化方法完全除去的微量杂质的化学结构,并提供RU 486质控、代谢等深入研究之用。