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类产碱假单胞菌XW-40发酵-生物转化级联产生D-脯氨酸 被引量:1
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作者 张凡凡 夏仕文 +2 位作者 谢永芳 刘姣 林晖 《分子催化》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期328-334,I0002,共8页
建立了一个新颖的用于产生D-脯氨酸的发酵-生物转化过程.发酵过程中,以DL-脯氨酸为发酵前体,类产碱假单胞菌XW-40利用L-对映体诱导产生脯氨酸脱氢酶,D-对映体完全保留.在最优条件下,发酵阶段产生6 g/L D-脯氨酸.生物转化过程中,细胞不... 建立了一个新颖的用于产生D-脯氨酸的发酵-生物转化过程.发酵过程中,以DL-脯氨酸为发酵前体,类产碱假单胞菌XW-40利用L-对映体诱导产生脯氨酸脱氢酶,D-对映体完全保留.在最优条件下,发酵阶段产生6 g/L D-脯氨酸.生物转化过程中,细胞不经分离,发酵液直接作为反应介质.采用分批补料策略实现DL-脯氨酸中L-对映体的转化.DL-脯氨酸单批补料浓度为10 g/L,补料次数达到5批.通过发酵和生物转化的级联,累积的D-脯氨酸浓度达到31 g/L,ee>99%.推测了生物转化过程中D-脯氨酸产生的反应机理. 展开更多
关键词 类产碱假单胞菌xw-40 发酵 生物转化 D-脯氨酸 脯氨酸脱氢酶
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类产碱假单胞菌耐热碱性脂肪酶的研究 被引量:39
2
作者 吴松刚 谢新东 +1 位作者 黄建忠 施巧琴 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期32-39,共8页
从福建省福州市温泉澡堂污水浸润土壤中分离筛选到一株耐热碱性脂肪酶产生菌——类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)F331。产酶最适条件为:碳源小麦粉,氮源豆饼粉,起始培养pH9.4~9.5,培养温度24~26℃,培养周期32~34h。... 从福建省福州市温泉澡堂污水浸润土壤中分离筛选到一株耐热碱性脂肪酶产生菌——类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)F331。产酶最适条件为:碳源小麦粉,氮源豆饼粉,起始培养pH9.4~9.5,培养温度24~26℃,培养周期32~34h。经硫酸铵盐析、Sepharose 4B和Sephadex G-200柱层析得到纯化的酶组分。该酶最适作用温度50℃,最适作用pH 10.0,60℃保温80min酶活基本不损失,在pH 7.0~10.0范围内酶蛋白稳定:Ca^(2+)和Mg^(2+)对酶有激活作用,Pb^(2+).Zn^(2+)、Fe^(2+)和Co^(2+)对酶活有抑制作用。该酶分子量45700。 展开更多
关键词 假单 耐热性脂肪酶 发酵
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类产碱假单胞菌杀虫物质的分离纯化和鉴定 被引量:20
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作者 张文 杨志荣 +2 位作者 朱文 侯太平 刘世贵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期57-62,共6页
类产碱假单胞菌是一株昆虫病原菌,该菌对草地蝗虫、竹蝗等具有良好的致死作用,经鉴定,该菌对蝗虫具有毒杀作用的物质为其代谢分泌到胞外的一种蛋白质。类产碱假单胞菌培养物经硫酸按沉淀,SephadexG-100凝胶过滤及DEAE-SephadexA-50... 类产碱假单胞菌是一株昆虫病原菌,该菌对草地蝗虫、竹蝗等具有良好的致死作用,经鉴定,该菌对蝗虫具有毒杀作用的物质为其代谢分泌到胞外的一种蛋白质。类产碱假单胞菌培养物经硫酸按沉淀,SephadexG-100凝胶过滤及DEAE-SephadexA-50阴离子交换柱层析,纯化获得的杀虫蛋白只含一种亚基,分子量25100,等电点5.16,含17种氨基酸,其中谷氨酸含量最高,胱氨酸含量最低,最大吸收峰为278.3nm。 展开更多
关键词 假单 杀虫蛋白 分离 纯化 灭煌剂
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类产碱假单胞菌谷氨酸脱氢酶的提纯、鉴定及某些特性的初步研究 被引量:6
4
作者 丁诗华 杨志荣 +2 位作者 唐亚雄 景仁志 刘世贵 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期968-973,共6页
从类产碱假单胞菌纯化出电泳纯的谷氨酸脱氢酶,用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得分子量为290 kD,亚基分子量为47 kD,提示该酶为六聚体.该酶对NADP(H)和底物均具有高度专一性,对谷氨酸、... 从类产碱假单胞菌纯化出电泳纯的谷氨酸脱氢酶,用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得分子量为290 kD,亚基分子量为47 kD,提示该酶为六聚体.该酶对NADP(H)和底物均具有高度专一性,对谷氨酸、α-酮戊二酸及NADP+ 的Km 值分别为:28 m m ol/L、1.2m m ol/L及0.063 m m ol/L.用Hill作图法求得酶对NH+4 和NADPH 的[S]0.5分别为24 m m ol/L和0.037 m m ol/L.最适反应温度为50℃,催化氨化反应和脱氨反应的最适pH 分别为8.0和8.8,在热稳定性方面不及嗜热细菌的谷氨酸脱氢酶稳定.提纯的谷氨酸脱氢酶在低温(4℃)条件下,可在Tris-HCl缓冲液中贮存半年以上,活力无明显下降,冷冻则可导致纯酶液迅速失活.氮源对菌体谷氨酸脱氢酶水平有显著影响. 展开更多
关键词 假单 谷氨酸脱氢酶 纯化 鉴定 酶活性
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类产碱假单胞菌防治草地蝗虫的研究 被引量:6
5
作者 杨志荣 朱文 +6 位作者 葛绍荣 侯若彤 刘世贵 汪志刚 李韬 闫省三 王贵林 《中国生物防治》 CSCD 1996年第2期55-57,共3页
一株从内地黄脊竹蝗虫尸中分离到的类产碱假单胞菌致病菌,经室内的感染试验表明,对青海、四川草地的优势种蝗虫具有较好的感染致死作用。用10^(10)活菌体/mL剂量的菌剂处理玉米,喂饲以中华坳蝗为主的草地蝗虫,死亡率达80.3%。对不同种... 一株从内地黄脊竹蝗虫尸中分离到的类产碱假单胞菌致病菌,经室内的感染试验表明,对青海、四川草地的优势种蝗虫具有较好的感染致死作用。用10^(10)活菌体/mL剂量的菌剂处理玉米,喂饲以中华坳蝗为主的草地蝗虫,死亡率达80.3%。对不同种蝗虫的感染致死率有明显差异,对东亚飞蝗的致死率为48%。对草地粘虫、草原毛虫、黑绒鳃金龟等害虫也有一定致死力。田间小区的治蝗效果达80%以上。 展开更多
关键词 假单 草地 蝗虫 生物防治
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类产碱假单胞菌杀虫蛋白的激光拉曼光谱研究 被引量:5
6
作者 罗霞 杨志荣 +1 位作者 朱文 刘世贵 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第1期68-71,共4页
类产碱假单胞菌是一种新发现的昆虫病原微生物,其代谢产生的杀虫蛋白对蝗虫具有较强的毒杀作用,经由杀虫蛋白的水和重水溶液的拉曼光谱,按照Lippert的方法计算它的二级结构含量,β折叠含量为58%,无规卷曲为34%,侧链CCSSCC构型为反式扭... 类产碱假单胞菌是一种新发现的昆虫病原微生物,其代谢产生的杀虫蛋白对蝗虫具有较强的毒杀作用,经由杀虫蛋白的水和重水溶液的拉曼光谱,按照Lippert的方法计算它的二级结构含量,β折叠含量为58%,无规卷曲为34%,侧链CCSSCC构型为反式扭曲反式.它的酪氨酸残基大部分暴露在分子表面,小部分埋藏在疏水环境中. 展开更多
关键词 假单 杀虫蛋白 拉曼光谱 结构
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类产碱假单胞菌杀虫蛋白对蝗虫能量代谢的影响 被引量:4
7
作者 赵建 罗霞 +2 位作者 陈东辉 王建东 杨志荣 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期365-368,共4页
电镜直接观察结果显示 ,在类产碱假单胞菌杀虫蛋白作用下 ,蝗虫中肠细胞线粒体病变严重 ,多数呈现膨胀 ,有嵴断裂等现象。氧电极技术分析发现病变后蝗虫胃、肠细胞线粒体氧化磷酸化作用减弱 ,ATP产生减少 ,能量代谢被抑制 ,但ATPase活... 电镜直接观察结果显示 ,在类产碱假单胞菌杀虫蛋白作用下 ,蝗虫中肠细胞线粒体病变严重 ,多数呈现膨胀 ,有嵴断裂等现象。氧电极技术分析发现病变后蝗虫胃、肠细胞线粒体氧化磷酸化作用减弱 ,ATP产生减少 ,能量代谢被抑制 ,但ATPase活力基本不受影响 ,即蝗虫体内能量需求仍可维持正常水平 ,由此导致蝗虫体内能量供应不足而死亡。 展开更多
关键词 假单 杀虫蛋白 线粒体 氧化磷酸化
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类产碱假单胞菌谷氨酸脱氢酶酶学性质的研究 被引量:4
8
作者 丁诗华 杨志荣 +2 位作者 唐亚雄 景仁志 刘世贵 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期354-358,共5页
类产碱假单胞菌的谷氨酸脱氢酶水平受氮源调节,以氨为唯一氮源时酶水平有明显提高.研究表明,该酶的最适反应温度为50℃,催化氨化反应和脱氨反应的最适pH值分别为8.0和8.8.
关键词 假单 谷氨酸脱氢酶 酶学性质 氨化
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嗜麦芽假单胞菌酪氨酸酶基因在类产碱假单胞菌中的转移与表达 被引量:5
9
作者 蔡信之 谢志雄 沈萍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期553-558,共6页
类产碱假单胞菌 (Pseudomonaspseudoalcaligenes)是从盐城市农村粪池中采集的自然病死蝇蛆体内分离的具有显著杀蛆作用的细菌 ,野外使用易受阳光中紫外线的影响而失活。黑色素具有很强的抗辐射作用。将构建的含有嗜麦芽假单胞菌酪氨酸... 类产碱假单胞菌 (Pseudomonaspseudoalcaligenes)是从盐城市农村粪池中采集的自然病死蝇蛆体内分离的具有显著杀蛆作用的细菌 ,野外使用易受阳光中紫外线的影响而失活。黑色素具有很强的抗辐射作用。将构建的含有嗜麦芽假单胞菌酪氨酸酶基因的质粒pWSY导入类产碱假单胞菌体内 ,使后者获得了稳定产生黑色素的能力。Southern杂交实验证实酪氨酸酶基因来源于嗜麦芽假单胞菌。SDS PAGE电泳显示该重组子体内额外表达了一分子量约为 1 8kD的蛋白 ,该蛋白很可能就是重组子表达的酪氨酸酶。经测定 ,重组子抗辐射作用明显增强 ,有效杀蛆时间显著延长 ,对畜。 展开更多
关键词 嗜麦芽假单 假单 酪氨酸酶基因 表达 转基因 黑色素
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类产碱假单胞菌谷氨酸脱氢酶的纯化和性质 被引量:3
10
作者 丁诗华 杨志荣 +2 位作者 唐亚雄 景仁志 刘世贵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期475-477,共3页
Glutamate dehydrogenase was purifiedfrom thecrudeextract of Pseudomonas pseudoal caligenes.Theenzyme had a molecular weight of 290 000 and was composed of six subunits with identical molecular weightof47 000 . The enz... Glutamate dehydrogenase was purifiedfrom thecrudeextract of Pseudomonas pseudoal caligenes.Theenzyme had a molecular weight of 290 000 and was composed of six subunits with identical molecular weightof47 000 . The enzyme was highly specific for NADP(H) and the sub strates.The biochemicalpropertiessuch askineticparametersand heatstability werealsoexamined. The purified GDHshowed considerableloss ofactivity uponfreezing. 展开更多
关键词 假单 谷氨酸脱氢酶 纯化和性质
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几丁质酶表达载体的构建及在类产碱假单胞菌中的表达研究 被引量:1
11
作者 张杰 尹鸿翔 +3 位作者 赵建 李达旭 牟景瑞 杨志荣 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期426-430,共5页
作者利用类产碱假单胞菌(Pseudomonaspseudoalcaligenes)的强基因启动子PA7的部分片段LQZ,将环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)C 2中克隆的几丁质酶基因编码区序列片段CSP连接在LQZ启动子阅读框翻译起始位点atg之后,插入pBluescriptsk(-... 作者利用类产碱假单胞菌(Pseudomonaspseudoalcaligenes)的强基因启动子PA7的部分片段LQZ,将环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)C 2中克隆的几丁质酶基因编码区序列片段CSP连接在LQZ启动子阅读框翻译起始位点atg之后,插入pBluescriptsk(-)成功构建P.pseudoalcaligenes表达载体pBPL1.用假单胞菌转化法转化,利用几丁质平板进行筛选,转化子pBPLC1在几丁质平板上能够产生水解圈,在P.pseudoalcaligenes中成功表达.同时对Tm值相差大的引物进行PCR扩增研究,发现添加5%~10%DMSO能提高引物与模板序列特异性复性,和扩增反应效率. 展开更多
关键词 假单 表达载体 几丁质酶基因PCR DMSO
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类产碱假单胞菌杀虫蛋白激光拉曼光谱的研究 被引量:1
12
作者 罗霞 杨志荣 +1 位作者 朱文 刘世贵 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期401-403,共3页
类产碱假单胞菌(Pseudomonaspseudoalcaligenes)是刘世贵等人从自然罹病死亡的蝗虫体内分离到的一株病原菌[1],为一种新发现的昆虫病原微生物.该菌代谢产生并分泌到胞外一种杀虫蛋白,对蝗虫具有较... 类产碱假单胞菌(Pseudomonaspseudoalcaligenes)是刘世贵等人从自然罹病死亡的蝗虫体内分离到的一株病原菌[1],为一种新发现的昆虫病原微生物.该菌代谢产生并分泌到胞外一种杀虫蛋白,对蝗虫具有较强的致死作用,是细菌灭蝗剂的主要成... 展开更多
关键词 假单 杀虫蛋白 激光拉曼光谱
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类产碱假单胞菌对不同型号PVA的降解特性研究 被引量:2
13
作者 罗洁 郝喜海 +1 位作者 李贞 衣潇鹏 《包装学报》 2013年第4期34-38,共5页
对类产碱假单胞菌降解不同型号PVA(0588,1788,2088,1750,1799)的降解效果及降解特性进行了研究。采用UV2900紫外分光光度计测吸光度法测定了各型号PVA的降解率,同时研究了PVA的分子量和醇解度、PVA浓度、接种菌种浓度、摇瓶转速等对PVA... 对类产碱假单胞菌降解不同型号PVA(0588,1788,2088,1750,1799)的降解效果及降解特性进行了研究。采用UV2900紫外分光光度计测吸光度法测定了各型号PVA的降解率,同时研究了PVA的分子量和醇解度、PVA浓度、接种菌种浓度、摇瓶转速等对PVA降解率的影响。结果表明:醇解度一定时,高聚合度PVA的降解效率远低于低聚合度PVA;而聚合度一定时,醇解度对降解率的影响不明显。在培养温度为30℃,培养时间为72 h,摇瓶转速为180 rad/min,PVA的质量浓度为0.5 g/L,接种菌的体积分数为4.0%时,PVA的降解率可达90.15%。 展开更多
关键词 假单 PVA 降解率 吸光度
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类产碱假单胞菌杀虫蛋白的N端鉴定及抗体制备 被引量:1
14
作者 丁诗华 杨志荣 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期642-645,共4页
The insecticidal protein from Pseudomonas pseudoaligenes was and exotoxin which had toxicity on locusts.In order to elucidate its molecular properties an amino acid sequence,the insecticidal protein was purified from ... The insecticidal protein from Pseudomonas pseudoaligenes was and exotoxin which had toxicity on locusts.In order to elucidate its molecular properties an amino acid sequence,the insecticidal protein was purified from the culture supernatant by ultrafiltration,ion\|exchange chromatography and gel filtration,and showed a single band on SDS\|PAGE.Analysis of the purified insecticidal protein dentified N\|terminal sequence of ten amino acid residues.Its polyclonal antibody was also obtained by immunizing rabbit with the insecticidal protein recovered form SDS\|PAGE gel.The antibody titer determined by ELISA method was 1∶12800,indicating that it had high reactivity.Western blot analysis revealed that the antibody was spectific to 26kD insecticidal protein,and did not cross\|react with other proteins produced by the bacterium,suggesting that a specific antibody with high titer was obtained and could be used for further investigations of the gene cloning and expression of insecticidal protein. 展开更多
关键词 假单 杀虫蛋白 纯化 N端序列 抗体 制备
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类产碱假单胞菌酪氨酸酶基因重组子所产黑色素性质的研究 被引量:5
15
作者 蔡信之 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期699-703,共5页
将构建的含有嗜麦芽假单胞菌酪氨酸酶基因的重组质粒导入从自然病死蝇蛆体内分离的具有显著杀蛆作用的类产碱假单胞菌体内 ,使后者获得了稳定产生黑色素的能力 ,具有很强的抗辐射作用。所产黑色素是无定形物质 ,在大多数有机和无机溶剂... 将构建的含有嗜麦芽假单胞菌酪氨酸酶基因的重组质粒导入从自然病死蝇蛆体内分离的具有显著杀蛆作用的类产碱假单胞菌体内 ,使后者获得了稳定产生黑色素的能力 ,具有很强的抗辐射作用。所产黑色素是无定形物质 ,在大多数有机和无机溶剂中溶解度低或不溶解 ,在碱性溶液中有较好的溶解性 ,在中性及弱酸性溶液中溶解度低 ,在pH <4的溶液中沉淀 ;可用过氧化氢或次氯酸钠氧化 ,也能被银离子或硫化氢还原 ;含有自由基 ,并能清除由紫外线诱导产生的自由基 ;能吸收所有波长的光线 ,在紫外波长下吸收值最大 ,能有效地保护紫外辐射对蛋白质及DNA等生物大分子物质的损害。 展开更多
关键词 假单 酪氨酸酶基因重组子 黑色素 性质
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类产碱假单胞菌核心杀虫蛋白基因的转化及杀虫活性
16
作者 黄敏 李达旭 +5 位作者 向文良 郭建华 赵健 张杰 杨志荣 孙群 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1198-1202,共5页
【目的】利用类产碱假单胞菌核心杀虫蛋白基因(Core Pseudomonas pseudoalcaligenes insec-ticidal protein gene,cppip)构建植物表达载体并转化烟草,以研究cppip在高等植物体内表达产物的活性。【方法】cppip在烟草基因组中的整合及转... 【目的】利用类产碱假单胞菌核心杀虫蛋白基因(Core Pseudomonas pseudoalcaligenes insec-ticidal protein gene,cppip)构建植物表达载体并转化烟草,以研究cppip在高等植物体内表达产物的活性。【方法】cppip在烟草基因组中的整合及转录通过烟草转化系T0代种子发芽的抗生素抗性分离及其T1代株系的分子检测来证明;烟草转化系后代表达产物的杀虫效果通过测定蝗虫死亡率来分析。【结果】证明了cppip能以一定拷贝数插入到烟草基因组内,并按照孟德尔遗传方式传递给后代;比较含信号肽(signal peptide sequence,SPS)和不含信号肽的类产碱假单胞菌杀虫蛋白基因(Pseudomonas pseudoalcaligenes insecticidal protein gene,ppip)表达产物的杀虫活性,发现不含SPS的ppip烟草转化系蛋白表达产物对2~3龄蝗虫幼虫的平均致死率为83.37%,并对幼虫的生长发育有明显抑制作用,而含有SPS的ppip烟草转化系蛋白表达产物对2~3龄蝗虫幼虫的平均致死率为15.65%,两者之间有着显著的差异。【结论】推测ppip的SPS会影响该基因在高等植物体内表达产物的活性,本研究结果对于高效利用ppip进行植物转化及抗虫具有重要参考价值。 展开更多
关键词 假单核心杀虫蛋白基因 烟草转化 杀虫活性 信号肽 生物测定
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切削液中类产碱假单胞菌对铝合金腐蚀行为的影响 被引量:8
17
作者 李庆宏 陈景浩 +4 位作者 申媛媛 郭章伟 董耀华 张丽 董丽华 《表面技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第5期269-280,共12页
目的从切削废液中分离出类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)菌株,研究该菌株对切削液的劣化,以及5754铝合金在含该菌株的切削液中的微生物腐蚀(MIC)行为。方法采用平板划线法,从切削废液中分离提纯出单一菌株,并通过16S rDN... 目的从切削废液中分离出类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)菌株,研究该菌株对切削液的劣化,以及5754铝合金在含该菌株的切削液中的微生物腐蚀(MIC)行为。方法采用平板划线法,从切削废液中分离提纯出单一菌株,并通过16S rDNA进行菌株测序。将类产碱假单胞菌接种至切削液中,并将5754铝合金金浸泡于其中。通过定期检测细菌在切削液中的生长状况、切削液的p H值、乳液液滴粒径、溶解氧、总有机碳(TOC)、无机碳(IC)以及总氮(TN)含量变化,分析微生物对切削液的劣化行为。通过表征铝合金在含菌切削液中的微观腐蚀形貌与生物附着情况,并结合电化学手段,分析5754铝合金在含菌切削液中的电化学腐蚀行为。结果类产碱假单胞菌在切削液中具有良好的生长状况,微生物浓度维持在107 CFU/mL以上。切削液发生了严重的生物降解,在实验周期内,pH值由9.25降至7.39,乳液液滴粒径分布曲线从单峰分布(1.07μm)变为双峰分布(1.12、8.93μm),染色后的液滴有明显增大,并观测到了液滴间的聚结。切削液中TOC的质量浓度由15.42 g/L下降至9.69 g/L,IC由189.03 mg/L上升至485.50 mg/L,TN由564.77mg/L下降为142.16mg/L。5754铝合金在含菌切削液中浸泡10d时,表面出现了生物膜;浸泡15 d后,金属基体在生物膜下发生了严重的点蚀现象。极化曲线结果显示,腐蚀电位(Ecorr)发生了明显的负移,铝合金的腐蚀电流密度(Jcorr)由0.274μA/cm^(2)上升至0.477μA/cm^(2)。在15 d时,铝合金的腐蚀电流密度要比在无菌切削液中高出4.9倍。铝合金的击穿电位也不断负移,使得铝合金极易发生点蚀。EIS结果显示,随着浸泡时间的增加,5754铝合金的阻抗弧半径不断变小,铝合金的耐腐蚀性不断变差。结论类产碱假单胞菌将切削液中缓冲剂、乳化剂等含氮有机物优先降解为可溶性无机盐,使切削液pH降低,乳化剂保护效果下降,溶液导电性增加,使劣化后的切削液更具腐蚀性。类产碱假单胞菌在5754铝合金表面形成生物膜,不断消耗金属表面的氧气,使铝合金无法维持钝化膜的完整性,金属基体在生物膜下不断发生腐蚀,耐腐蚀性能下降,并形成严重的点蚀。 展开更多
关键词 铝合金 切削液 微生物腐蚀 电化学测试 假单
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类产碱假单胞菌耐热碱性脂肪酶基因的克隆 被引量:7
18
作者 翁丽星 胡志浩 +3 位作者 邓子新 李阜棣 施巧琴 吴松刚 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期434-437,共4页
将类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligene)总DNA经Sau3AI部分酶解后的35~50kbDNA片段与经BamHI线性化及CIAP处理过的粘粒pIJ285连接,以大肠杆菌LE392为受体,构建类产碱假单胞菌的基因文库。通过三丁酸甘油酯平板和橄榄油平板法... 将类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligene)总DNA经Sau3AI部分酶解后的35~50kbDNA片段与经BamHI线性化及CIAP处理过的粘粒pIJ285连接,以大肠杆菌LE392为受体,构建类产碱假单胞菌的基因文库。通过三丁酸甘油酯平板和橄榄油平板法检测克隆子,获得一株具有耐热碱性脂肪酶活性的菌株LE392(pHZ1401)。随后将pHZ1401上的外源DNA片段进行亚克隆,从而获得了具有脂肪酶活性的菌株HB101(pHZ1402)和HB101(pHZ1403),它们分别携带有2.9kb和3.0kb的外源片段。两外源片段约有2kb的重叠区。HB101(pHZ1403)所分泌的脂肪酶活性比HB101(pHZ1402)高4倍,是出发菌的5倍。 展开更多
关键词 假单 耐热性脂肪酶 基因克隆
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在大肠杆菌中克隆类产碱假单胞菌基因启动子 被引量:1
19
作者 张海燕 赵建 +1 位作者 尹鸿翔 杨志荣 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期961-964,共4页
关键词 基因克隆 蝗虫致病 生物防治 大肠杆 假单 启动子
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类产碱假单胞菌杀虫蛋白理化性质研究 被引量:1
20
作者 张文 蒋彦 +3 位作者 杨志荣 朱文 侯若彤 刘世贵 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期363-366,共4页
类产碱假单胞菌杀虫蛋白对蝗虫具有较强的杀伤力,在pH6.0~10及40℃以下,杀虫蛋白的活性是稳定的.该蛋白对胃蛋白酶敏感,对胰蛋白酶不敏感。
关键词 杀虫蛋白 假单 理化性质 蝗虫 杀伤力
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