上海四膜虫大核类似程序性死亡的诱导

足叶乙甙（etoposide）可以诱导上海四膜虫大核在形态和生化方面出现类似程序性死亡的典型特征，如染色质凝集成颗粒状；分散的核仁连接成串；DNA凝胶电泳出现阶梯状条带；彗星电泳出现慧尾。这就提示，利用足叶乙甙诱导四膜虫大核发生类似程序性死亡是一个有用的实验模式，它可能对阐明在自然状态下大核类似程序性死亡的机理有启发和借鉴意义。同时也提出了染色体形态特征变化和彗星电泳有可能作为鉴定四膜虫大核发生类似程序性死亡的指标。

楝酰胺对肝癌细胞的促凋亡作用及其机制

目的观察加入楝酰胺(Rocaglamide,Roc-A)培养的人肝癌细胞株HepG2凋亡情况,并探讨其可能作用机制。方法①加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞凋亡情况观察:取对数生长期HepG2细胞,分为5组,分别加入0(空白对照)、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时取各组细胞,采用YF488-AnnexinV/PI荧光双染法观察细胞凋亡情况。②加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞已糖激酶Ⅱ(HK2)、抑凋亡因子类似物(BCL2L1)mRNA检测:取对数生长期HepG2细胞,分为2组,分别加入0、100 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用RT-qPCR法检测细胞HK2及BCL2L1 mRNA。③加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞HK2、BCL2L1蛋白检测:取适量HepG2细胞,分为3组,分别加入0、100、200 nmol/L的Roc-A,培养24 h采用蛋白组学质谱分析法检测细胞HK2、BCL2L1蛋白。取对数生长期HepG2细胞分为5组,分别加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用WesternBlotting法检测HK2、BCL2L1蛋白。④癌组织HK2表达与肝癌患者的生存时间关系分析:采用KaplanMeierPlotter癌症数据库分析癌组织HK2表达与肝癌患者生存时间的关系。结果加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液HepG2细胞凋亡率分别为0.83%±0.21%、9.46%±2.34%、24.68%±4.22%、39.60%±2.16%及58.63%±1.62%,组间两两比较,Р<0.05。随Roc-A溶液浓度增加,细胞凋亡率也随之增加。与空白对照比较,培养24 h时加入100 nmol/L Roc-A溶液的HepG2细胞HK2、BCL2L1 mRNA相对表达量均降低(Р均<0.05)。与空白对照比较,加入不同浓度Roc-A培养HepG2细胞HK2、BCL2L1蛋白相对表量均降低(P均<0.05)。与癌组织HK2高表达的肝癌患者比较,HK2低表达的肝癌患者的生存时间更长(Р<0.05)。结论Roc-A促进HepG2细胞的凋亡,200 nmol/L的Roc-A促进HepG2细胞凋亡能力最佳。Roc-A促HepG2细胞凋亡的机制可能为Roc-A抑制HepG2细胞HK2、BCL2L1 mRNA及蛋白的表达。