黏着斑激酶和类固醇激素受体共活化因子同时失活能改善增生性瘢痕形成

增生性瘢痕是一种严重的皮肤纤维化疾病，由于其分子机制不明确目前尚无满意的治疗手段。黏着斑激酶（FAK）和类固醇激素受体共活化因子（Src）是2个重要的非受体型酪氨酸激酶，可能参与增生性瘢痕形成的病理过程。作者观察到FAK和Src在增生性瘢痕中被激活，

ROS/SRC/FAK信号通路在膀胱癌疾病进展中的作用机制研究

目的观察活性氧(ROS)/类固醇受体共激活因子(SRC)/黏着斑激酶(FAK)信号通路对膀胱癌疾病进展的影响。方法收集2019年6月—2020年12月同济大学附属同济医院泌尿外科经膀胱镜活检、膀胱部分切除的膀胱癌组织标本69份,同时取癌旁组织作为对照,免疫组化检测组织中SRC、FAK蛋白阳性表达,并比较其在不同病理分化程度、浸润程度中的差异。以膀胱癌T24细胞为研究对象,分为对照组(细胞正常培养)、ROS清除剂N,N’-二甲基硫脲(DMTU)干预组(DMTU浓度20μmol/L)、DMTU+SRC激酶抑制剂(PP2)干预组(DMTU浓度20μmol/L,PP2浓度5μmol/L)。ROS检测试剂盒检测细胞中ROS水平;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭情况;蛋白免疫印迹(WB)检测细胞中SRC、磷酸化SRC(p-SRC)、FAK、磷酸化FAK(p-FAK)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、钙蛋白酶2(calpain2)蛋白表达情况。结果SRC阳性表达于细胞膜上,FAK阳性表达于细胞浆中,与癌旁组织比较,膀胱癌组织中SRC、FAK阳性比例升高(χ^(2)/P=44.357/0.000、15.019/0.030)。浸润性膀胱癌组织中SRC、FAK表达阳性率高于非浸润性膀胱癌(χ^(2)/P=18.200/0.000、4.681/0.030)。与对照组比较,DMTU干预组ROS相对含量降低(P<0.05),细胞迁移、侵袭数量及细胞中p-SRC/SRC、p-FAK/FAK、MMP-9、calpain2蛋白水平升高(P<0.05);与DMTU干预组比较,DMTU+PP2干预组ROS相对含量升高(P<0.05),细胞迁移、侵袭数量及细胞中SRC、p-SRC/SRC、p-FAK/FAK、MMP-9、calpain2蛋白水平降低(P<0.05)。结论抑制ROS可激活SRC/FAK信号通路,从而增强膀胱癌细胞迁移、侵袭,加重疾病进展。

FAK、FAKpY397和Src在肝细胞癌中的表达和意义

目的:探讨黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、磷酸化黏着斑激酶(phospho-FAK Y397,FAKpY397)和类固醇激素受体共活化因子(sceroid recptor coactivator,Src)在不同分化程度肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况以及三者的相关性。方法:通过免疫组织化学法和人工计数法检测44例HCC组织及8例癌旁正常肝脏组织中FAK、FAKpY397和Src的表达。结果:FAK、FAKpY397和Src在HCC组织中表达均高于正常肝脏组织(P=0.027、P=0.041、P=0.030)且三者均与HCC分化程度有关(P=0.026、P=0.045、P=0.005),FAK和Src低分化组阳性率高于高分化组(P=0.015、P=0.002)。HCC组织中三者表达两两之间呈正相关(P=0.000、P=0.000、P=0.000)。结论:HCC组织中FAK、FAKpY397和Src表达与HCC分化程度有关;FAK和Src低分化组阳性率高于高分化组且三者相互之间存在一定相关性。

丹参素对膀胱癌5637细胞Src/FAK信号通路及上皮间质转化的影响

目的:探讨丹参素(Dss)对膀胱癌5637细胞类固醇受体共激活因子/黏着斑激酶(Src/FAK)信号通路及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:用不同浓度的Dss(0、40、60和80μg/mL)处理膀胱癌5637细胞24 h后,分别命名为Dss-0组、Dss-40组、Dss-60组和Dss-80组;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测膀胱癌5637细胞中EMT标志基因[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的信使核糖核酸(mRNA)]表达水平,采用蛋白质印迹法检测膀胱癌5637细胞中Src/FAK信号通路相关蛋白表达水平,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测膀胱癌5637细胞增殖情况,采用划痕实验检测膀胱癌5637细胞的迁移能力。结果:Dss-0组、Dss-40组、Dss-60组和Dss-80组膀胱癌5637细胞E-cadherin mRNA表达水平依次升高,N-cadherin mRNA、Vimentin mRNA、磷酸化Src(p-Src)/Src蛋白、磷酸化FAK(p-FAK)/FAK蛋白表达水平以及吸光度、迁移率依次降低,呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:Dss可能通过抑制Src/FAK信号通路来阻碍膀胱癌5637细胞EMT过程,进而抑制膀胱癌5637细胞增殖和迁移。

改良的大鼠鼠尾增生性瘢痕动物模型制备方法

目的建立增生性瘢痕的有效动物模型。方法于SD大鼠鼠尾形成6 mm矩形创面,根据创面边缘距鼠尾根部的距离分为A组(3 cm)和B组(5 cm)。术后16 d进行牵拉并测量创面牵张力。于牵拉7、14、21、28 d拍照记录两组的瘢痕的大体变化。于牵拉28 d检测两组瘢痕中张力相关蛋白局部黏着斑激酶(FAK)和共激活因子相关蛋白(YAP)活化情况。结果A、B两组牵拉即刻的牵张力分别增加了(22.78%±2.452%)和(15.46%±2.193%)(P<0.05)。相比B组,A组瘢痕厚度显著增加(P<0.05),胶原束粗大呈漩涡样排列紊乱,且α-SMA蛋白表达高于B组(P<0.05)。A组FAK和YAP阳性表达率均较B组增高(P<0.05;P<0.001)。结论于鼠尾3 cm处建立创面进行牵拉可以建立更接近于人增生性瘢痕的动物模型。