类固醇受体共激活因子-3在人肝癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨类固醇受体共激活因子-3（SRC-3）在人肝癌组织的表达及其与肝癌临床病理特征之间的关系.方法 采用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测SRC-3基因在94例肝癌组织及其癌旁组织的蛋白表达水平和mRNA转录水平,分析SRC-3的表达与临床病理特征的相关性.结果 SRC-3蛋白在肝癌组织中阳性表达率为55.3％ （52/94）；相对应的癌旁肝组织则较少见SRC-3蛋白表达,其阳性率为10.6％ （10/94）,且阳性染色分布散在、稀疏.肝癌组织中SRC-3 mRNA的转录水平亦高于其相对应的癌旁肝组织（P＜0.05）.SRC-3蛋白表达水平和SRC-3 mRNA转录水平均与肝癌患者乙型肝炎病毒（HBV）感染、甲胎蛋白（AFP）水平、病理分级等因素明显相关（P＜0.05）.结论 SRC-3基因在人肝癌组织的表达水平显著高于癌旁组织,SRC-3基因高表达与肝癌的临床病理特征密切相关.

类固醇受体辅活化子-3缺失对核因子-κB表达及活性的影响

目的观察类固醇受体辅活化子（SRC）-3蛋白缺失对脂多糖（LPS）诱导的炎症反应中核因子-KB（NF—KB）表达及活性的影响。方法健康清洁野生型（SRC-3＋/-）小鼠、SRC-3基因敲除（SRC-3-/-）小鼠各20只，雌性，体质量约20g，分为SRC-3＋/-组和SRC-3-/-组，每组设正常（N）、1h、4h、12h四个时相点，每个时相点各5只小鼠。采用腹腔注射5mg／kg体质量LPS构建炎症反应动物模型，Westernblot测定肝组织IKB-α、NF—KBp65／p50和干扰素调控因子-1（IRF-1）的蛋白表达。结果LPS刺激后早期两组小鼠肝组织IKB—d蛋白水平显著降低，其中SRC-3＊/＊组小鼠下降更明显；两组小鼠肝组织NF—KBp65／p50蛋白表达和核转位程度均显著增加，其蛋白表达水平SRC-3。组小鼠高于SRC-3＋/＋组，而核转位程度却显著低于SRC-3＊/＊组；无论是SRC-3＋/＋组还是SRC-3。-组小鼠，LPS刺激引起IRF-1蛋白表达水平显著增加，在相应时相点SRC-3。-组小鼠均显著低于SRC-3＋/＋组。结论SRC-3可通过干预NF—KB的活性来调控炎症反应，其蛋白缺失减轻炎症反应程度可能是其导致IKB—α降解障碍和NF—KB活性下降所致。

类固醇受体辅助活化因子-3通过PI3K/Akt/mTOR信号通路参与子痫前期发病机制中的作用研究

目的:探讨类固醇受体辅助活化因子-3(steroid receptor coactivator-3,SRC-3)参与人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)受损的信号通路,及其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2014年10月至2015年10月在重庆医科大学附属第一医院行选择性剖宫产手术的正常足月妊娠组(31例)以及子痫前期组(29例)的胎盘组织。使用Western blot检测2组胎盘组织SRC-3的表达。脐静脉内皮细胞株(HUVECs)分为4个处理组:正常常氧对照(N)培养组、缺氧/复氧(H/R)培养组、SRC-3 sh RNA慢病毒敲降(sh SRC-3)培养组以及PI3K特异性抑制剂(LY294002)培养组。使用Western blot检测内皮细胞中SRC-3、p-Akt(Ser473)、Akt、p-m TOR(Ser2481)、m TOR的表达。使用细胞管腔成型实验检测内皮细胞血管形成能力。结果:SRC-3在子痫前期胎盘组织蛋白水平低于正常足月胎盘(t=3.501,P=0.013)。细胞学实验中,与N组相比,H/R组、sh SRC-3组及LY294002组HUVECs的SRC-3(t=4.236,P=0.007;t=5.469,P=0.002;t=4.165,P=0.008)、p-Akt(Ser473)/Akt(t=5.214,P=0.002;t=5.188,P=0.002;t=7.054,P=0.000)、p-m TOR(Ser2481)/m TOR(t=4.832,P=0.003;t=5.695,P=0.001;t=5.699,P=0.001)表达降低。H/R组、sh SRC-3组、LY294002组HUVECs血管形成能力低于N组(t=5.268,P=0.002;t=4.648,P=0.004;t=4.087,P=0.009)。结论:SRC-3可能通过PI3K/Akt/m TOR通路参与子痫前期的发病机制。

白藜芦醇激活过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α缓解脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤和细胞凋亡

为揭示白藜芦醇(RES)是否通过介导过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α)起到缓解奶牛乳腺上皮细胞(bMECs)炎性反应,本试验对PGC-lα进行干扰(si-PGC-lα),采用单因素随机试验设计方法,设置si-NC+LPS组(含10μg/mL LPS配制的饥饿培养基)、si-PGC-lα+LPS组(si-PGC-lα干扰片段+含10μg/mL LPS配制的饥饿培养基)、si-NC+RES+LPS组(含10μg/mL LPS以及15μmol/L RES共同配制的饥饿培养基)、si-PGC-lα+RES+LPS组(si-PGC-lα干扰片段+10μg/mL LPS以及15μmol/L RES共同配制的饥饿培养基)。结果发现:si-PGC-lα后加入LPS可显著或极显著上调炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的mRNA相对表达水平和含量(P<0.05或P<0.01),极显著上调氧化因子丙二醛(MDA)的mRNA相对表达水平(P<0.01),显著或极显著上调促凋亡因子B-细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(BAX)的mRNA相对表达水平和bMECs凋亡率(P<0.05或P<0.01),极显著降低抗氧化基因谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的mRNA相对表达水平(P<0.01);而RES可逆转这一反应。当si-PGC-lα后再用RES处理则无法缓解LPS诱导的bMECs产生的氧化应激、炎性反应和细胞凋亡,说明RES是通过激活PGC-1α起到缓解LPS诱导的bMECs炎性损伤和细胞凋亡。由此可见,外源添加RES可通过激活PGC-1α起到缓解LPS诱导的bMECs线粒体损伤、氧化应激、炎性反应并抑制细胞凋亡。

组蛋白乙酰化转移酶亚型类固醇受体共激活因子1在发育心脏的时空表达

目的研究组蛋白乙酰化转移酶亚型类固醇受体共激活因子1(SRC1)在小鼠心脏中的时空表达规律,初步探讨其与心脏发生发育的关系。方法取胎龄E7.5～18、出生1d和3个月成年小鼠正常心脏,每个时间点选9个标本,采用免疫组织化学SP法观察SRC1蛋白在不同发育阶段心脏的空间表达;每个时间点选6组标本,利用蛋白质印迹分析技术检测其在小鼠心脏发育过程中时序性表达变化。结果免疫组织化学结果显示,SRC1蛋白在E7.5胚胎心脏原基中不表达;E8.5～E9.5心管中微弱表达;E10.5后心脏发育各时期,小梁弱表达,心脏其他区域均有较强而广泛表达。蛋白质印迹分析结果显示,E10.5以后的心脏发育阶段,SRC1蛋白在E10.5较低表达,与E11.5、E12.5相比表达差异有统计学意义(P<0.05),与其他发育时间点相比表达差异无统计学意义(P>0.05);E11.5～E12.5达到表达高峰,此两个发育时间点相比表达差异无统计学意义(P>0.05),与其他发育时间点相比表达差异有统计学意义(P<0.05);此后表达下降并持续低表达至成年鼠期,此阶段表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SRC1蛋白广泛表达于E8.5后的发育心脏,并呈时空动态变化,提示其参与了心脏发育的整体调控,可能与心脏间隔早期的诱导形成关系更为密切。

类固醇受体辅助激活因子-1在脑内的表达及功能研究进展

通过与核受体结合,类固醇激素在调节内环境稳态、生殖发育以及个体行为等过程中发挥着重要作用,而核受体辅助调节因子被证实是类固醇激素发挥调节作用的决定性因素。类固醇受体辅助激活因子-1(steroid receptor coactivator-1,SRC-1)作为脑内主要的核受体辅助调节因子,也是众多类固醇核受体调节靶基因转录必需的始动因子,被证实在大脑突触可塑性、学习记忆等高级认知活动中发挥着重要的作用。本文简要回顾了SRC-1的结构及作用机制,并着重阐述近年来人们对SRC-1在脑内的表达以及功能方面所做的研究进展。

类固醇受体共激活因子3促进膀胱癌增殖侵袭的作用机制研究

目的探究类固醇受体共激活因子3(SRC-3)在膀胱癌中的作用。方法使用RT-PCR及Western Blot实验检测膀胱癌组织中SRC-3的表达;构建SRC-3重组表达质粒/空载质粒、SRC-3 siRNA/siRNA control、CCK8实验、平板克隆形成实验、Transwell实验、流式细胞凋亡实验及Western blot实验分别检测SRC-3对膀胱癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响;结合高通量测序结果及生物信息学网站对膀胱癌中SRC-3可能作用的下游靶基因进行预测,GST融合蛋白沉降实验(GST-pull down)进行靶基因结果检测和验证。结果与癌旁正常组织比较,SRC-3 mRNA及蛋白在膀胱癌组织中呈明显高表达(P<0.05);过表达SRC-3后,膀胱癌细胞增殖、平板克隆形成能力、迁移、侵袭能力升高(P<0.05),细胞凋亡率及促凋亡蛋白表达明显降低(P<0.05),抑制SRC-3表达后,膀胱癌细胞增殖、平板克隆形成能力、迁移、侵袭能力则明显降低(P<0.05),细胞凋亡率及促凋亡蛋白表达则明显增高(P<0.05);GST-pull down实验结果显示,膀胱癌中SRC-3蛋白与CXCR4蛋白存在靶向结合关系。结论SRC-3在膀胱癌中高表达,可通过靶向CXCR4表达促进膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭,影响肿瘤细胞凋亡,参与膀胱癌的发生、发展。

类固醇受体辅激活因子3的促瘤作用研究

类固醇受体辅激活因子3(SRC-3)是一类与转录激活有关的蛋白辅助因子,通过与激素激活的核受体和其他一些特定的转录因子结合,参与调控机体的生长发育、能量代谢、细胞增殖、存活以及迁徙等过程。近年来,SRC-3广泛的促瘤作用更成为研究热点。SRC-3蛋白不仅与核受体相互作用,还与多种转录因子结合,通过多条信号通路促进靶基因的转录,进而调控细胞生长、促进细胞增殖,在一些激素相关和非激素相关的癌症中发挥促瘤作用。该文就SRC-3作为促癌因子与肿瘤的相关性及其促增殖途径予以综述。

类固醇受体共激活因子及其抑制剂、激动剂在恶性肿瘤发生与治疗中的研究进展

类固醇受体共激活因子家族(SRCs)是细胞核激素受体(NRs)的共激活因子,与核受体超家族成员结合形成二聚体,发挥转录调控作用,参与许多生物学过程并发挥重要作用。研究显示,SRCs在多种恶性肿瘤中存在异常表达,与肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭以及耐药有关。SRCs在多个细胞生长相关的信号通路中都起关键作用,因此被认为是抗癌治疗的潜在靶点。其抑制剂、激动剂均有相关基础研究,尤其是靶向激动剂的治疗策略有望成为一个新的突破口,为靶向药物研发提供新的方向。

类固醇受体辅活化子-3缺失对脂多糖诱导炎症反应的影响

目的观察类固醇受体辅活化子（SRC）-3蛋白缺失对脂多糖（LPS）诱导炎症反应的影响。方法健康清洁野生型（SRC-3^＋/＋）小鼠、SRC-3基因敲除（SRC-3^-/-）小鼠各20只，雌性，体质量约20g，分为SRC-3^＋/＋组和SRC-3^-/-组，每组设正常（N）、1h、4h、12h四个时相点，每个时相点各5只小鼠。采用腹腔注射5mg／kg体质量LPS构建炎症反应动物模型，观察各时相点重要脏器的病理变化并测定血清TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10浓度。结果LPS腹腔注射后，SRC-3^-/-组小鼠全身情况好于SRC-3^＋/＋组小鼠，但两组的肝、脾、肾、心肌和胸腺病理均未见明显差别。LPS腹腔注射后两组血清TNF—α、IL-1β、IL-6和IL-10的水平均显著升高，但SRC-3^-/-组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著低于SRC-3^＋/＋组小鼠，IL—10水平却显著高于SRC-3^＋/＋组。结论SRC-3蛋白与致炎细胞因子的分泌和释放有关，SRC-3蛋白缺失可减轻炎症反应程度，抑制LPS诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6分泌和释放。

运动诱导过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α表达的研究进展

心肺耐力的提高有利于改善代谢性疾病风险因素,其机制是长期运动诱导骨骼肌适应的结果,线粒体生物合成是骨骼肌适应的重要标志。过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(Peroxi-some proliferators-activated reptorγcoactivator-1α,PGC-1α)作为线粒体生物合成中重要调控酶,其作用机理是研究的热点之一。本文阐述了心肺耐力、运动方式和强度等因素与PGC-1α表达的关系,对运动强度诱导PGC-1α表达的信号传导通路进行了初步论述,在此基础上对运动强度诱导PGC-1α表达可能存在的剂量-反应关系进行展望。

过氧化物酶体增生激活受体的共刺激因子-1α调节机制的研究进展

多种疾病可伴随着线粒体的功能障碍,引起细胞的能量衰竭,而过氧化物酶体增生激活受体的共刺激因子-1α(PGC-1α)作为核转录共刺激因子在氧化代谢及线粒体的生物合成中发挥非常重要的作用。PGC-1α的调节非常广泛而复杂,深入探索其调节机制有利于进一步认识各种疾病引起的PGC-1α的分子水平及相关信号传导的变化,本文就其正负性调节的研究进展做一综述。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α在牙周炎诱发大鼠肝损伤中的作用研究

目的初步探究过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)在牙周炎诱发大鼠肝损伤中的作用。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分为2组:对照组和牙周炎组,每组各12只。牙周炎组采用结扎丝结扎+接种牙龈卟啉单胞菌的方法建立大鼠上颌第一磨牙牙周炎模型,对照组以等体积2%羧甲基纤维素钠接种同一部位,持续6周。检测大鼠牙周探诊深度、牙齿松动度和龈沟出血指数。苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝组织病理变化情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及免疫组织化学方法分别检测大鼠肝组织中PGC-1α、核因子E2-相关因子2(Nrf2)及线粒体转录因子A(TFAM)基因及蛋白表达水平。结果牙周炎组牙周探诊深度、牙齿松动度和龈沟出血指数数值显著高于对照组。HE结果显示:牙周炎组大鼠肝组织肝索排列紊乱,可见空泡性变及炎症细胞浸润,对照组无明显异常。qRT-PCR结果显示:牙周炎组大鼠肝组织中Pgc-1α、Nrf2和Tfam的mRNA表达水平明显低于对照组。免疫组织化学结果显示:牙周炎组大鼠肝组织中PGC-1α蛋白表达水平较对照组明显降低。结论PGC-1α可能参与牙周炎诱发大鼠肝损伤过程。

绝经后妇女血清激素受体共激活因子3与骨密度、骨转换水平的相关性（英文）

背景:激素受体共激活因子3属于类固醇激素核受体超家族成员,可通过调节雌激素受体活性促进人成骨细胞增殖和分化。研究发现高加索男性激素受体共激活因子3等位基因突变与腰椎骨密度的变化密切相关。而在绝经后妇女中激素受体共激活因子3是否与骨密度相关尚不清楚。目的:检测绝经后妇女血清激素受体共激活因子3水平及其与骨密度和骨转换水平的关系。方法:检测55名绝经后妇女和35例健康体检者的血清中激素受体共激活因子3、25羟维生素D、骨钙素和骨转换标志物Ⅰ型原胶原N-端前肽、β-胶原特殊序列水平,同时以双能X射线骨密度仪测量L_(1-4)及股骨颈骨密度。结果与结论:绝经后骨质疏松组血清激素受体共激活因子3水平明显低于健康对照组,血清激素受体共激活因子3水平与腰椎骨密度呈正相关,与Ⅰ型原胶原N-端前肽和骨钙素水平呈负相关。说明低血清激素受体共激活因子3水平可能参与绝经型骨质疏松症的病理过程,且可能调控骨转换水平。

中风活心软胶囊通过PPARγ受体上调STAT3磷酸化激活PI3K/AKT通路抑制脑缺血再灌注损伤内质网应激的作用机制研究

目的探讨中风活心软胶囊介导过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)受体上调信号传导转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)磷酸化诱导磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BAKT serine/threonine kinase,AKT)信号通路参与脑缺血再灌注损伤内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激和神经保护的作用机制研究,阐明中风活心软胶囊对脑缺血后神经损伤修复的调控机制。方法选取30只SPF级雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组和治疗组,采用Zea Longa法建立右侧大脑中动脉缺血(middle cerebral artery ischemia,MCAI)大鼠模型,采用改良神经功能损伤评分(modified neurological severity score,mNSS)评估大鼠神经功能缺损情况,以mNSS评分2~18分为造模成功。仅治疗组给予中风活心软胶囊。Western blot法分别检测缺血半暗区皮质PPARγ受体蛋白、STAT3磷酸化蛋白、PI3K/AKT信号通路蛋白的表达,检测ER应激标记分子葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)及真核翻译起始因子2α激酶3(PKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)-激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)-C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)通路蛋白表达水平。结果模型组大鼠神经功能缺损情况,透射电镜观察缺血半暗区皮质神经元显著减少,提示右侧MCAI大鼠模型构建成功。模型组、治疗组mNSS评分均高于对照组,但治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠缺血区PPARγ受体蛋白、STAT3磷酸化蛋白、PI3K及AKT蛋白表达均低于对照组与治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组与对照组各指标比较差异无统计学意义。治疗组、模型组大鼠缺血区GRP78、PERK、ATF4和CHOP蛋白表达均高于对照组,但治疗组均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中风活心软胶囊可显著提高脑缺血大鼠缺血半暗区皮质PPARγ受体蛋白、STAT3磷酸化蛋白、PI3K/AKT信号通路蛋白表达,其作用机制可能是通过介导PPARγ受体上调STAT3磷酸化诱导PI3K/AKT信号通路参与脑缺血再灌注损伤ER应激和神经保护,从而发挥脑保护效应。

微小RNA-338-3p调控信号转导和转录激活因子1对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药肺癌细胞株PC-9/GR中程序性死亡配体1表达和细胞凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-338-3p(miR-338-3p)对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)耐药肺癌细胞株PC-9/GR中程序性死亡配体1(PD-L1)表达和细胞凋亡的影响及相关机制。方法 体外培养PC-9细胞、PC-9/GR细胞,采用0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00μmol/L吉非替尼处理确定用药浓度;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-338-3p表达。将PC-9/GR细胞分为对照组、miR-338-3p NC组(转染miR-338-3p NC)、miR-338-3p组(转染miR-338-3p模拟物)和信号转导和转录激活因子1(STAT1)抑制剂组(转染miR-338-3p模拟物+100μmol/L氟达拉滨)。4组均添加1.00μmol/L吉非替尼,转染后qRT-PCR检测细胞中miR-338-3p表达;MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白印迹(WB)法STAT1、p-STAT1、PD-L1、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 当吉非替尼浓度升高至1.00μmol/L时,PC-9细胞与PC-9/GR细胞增殖率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与PC-9细胞相比,PC-9/GR细胞中miR-338-3p表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。转染后,qRT-PCR结果显示,miR-338-3p组、STAT1抑制剂组的miR-338-3p表达水平均高于miR-338-3p NC组、对照组,差异有统计学意义(P>0.05)。与miR-338-3p NC组相比,miR-338-3p组PC-9/GR细胞增殖率及细胞中PD-L1、Bcl-2蛋白表达水平降低,凋亡率及细胞中p-STAT1/STAT1、Bax蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-338-3p组相比,STAT1抑制剂组PC-9/GR细胞增殖率及细胞中PD-L1、Bcl-2蛋白表达水平升高,凋亡率及细胞中p-STAT1/STAT1、Bax蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-338-3p可抑制EGFR-TKI耐药肺癌细胞株PC-9/GR细胞中PD-L1表达,并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与激活STAT1有关。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α与线粒体生物发生调控在高原肺水肿中研究进展

高原肺水肿(high altitude pulmonary edema,HAPE)是特发于高原缺氧环境下的一种非心源肺水肿,通常见于从平原地区快速进入2500~3000 m以上高原后,数小时至数天内发病,发病急骤,如不及时救治,可导致呼吸衰竭甚至死亡,严重威胁人体健康。HAPE发病机制尚不明确,目前,认为肺血管收缩、肺动脉高压是HAPE发生的主要病理基础[1]。过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)作为线粒体代谢及转录的共激活因子,参与高原肺水肿的发生、发展,在缺氧引起的肺血管收缩、肺动脉高压、肺泡液体清除、肺组织中细胞活性因子中发挥重要作用。本研究就PGC-1α与HAPE的研究进展作一综述,为高原肺水肿的防治提供新的策略。

基于RANKL/RANK-NF-κB-NLRP3炎性小体通路探讨强骨饮治疗骨质疏松症模型大鼠的作用机制

目的探讨强骨饮调节核因子-κB受体激活因子配体/核因子-κB受体激活因子-核因子-κB受体-NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(RANKL/RANK-NF-κB-NLRP3)炎性小体通路治疗骨质疏松症(OP)的作用机制。方法将100只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,等量生理盐水,灌胃给药),OP组(B组,等量生理盐水,灌胃给药),强骨饮低、中、高剂量组[C_(1)组、C_(2)组、C_(3)组,0.83,1.66,3.32 g/(kg·d),灌胃给药],己烯雌酚(DES)组[D组,0.1 mg/(kg·d),灌胃给药],吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)组[E组,0.1 g/(kg·d),腹腔注射],C_(2)组+E组(F组),氟甲基酮(Z-YVAD)组[G组,0.15 mg/(kg·d),尾静脉给药],C_(2)组+G组(H组),各10只。除A组外,其余各组大鼠均行腹部切口双侧去卵巢术,复制OP大鼠模型。连续6周给药后处死大鼠,采用发色底物法测定血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、骨形成发生蛋白-2(BMP-2)、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)水平;采用免疫印迹(Western blot)法检测骨组织中RANKL、RANK、NF-κB亚基p65(NF-κB p65)、NLRP3、胱天蛋白酶-1 p20(caspase-1 p20)、消皮素D-N端抗体(GSDMD-N)的蛋白表达水平;采用双能X线扫描仪测定大鼠股骨中段骨密度(BMD);采用Micro-CT仪观察大鼠股骨头的结构,记录骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.sp)、骨体积分数(BV/TV);采用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠骨组织的病理变化。结果与B组比较,C_(1)组、C_(2)组、C_(3)组、D组、E组、F组、G组、H组大鼠的BMD,Tb.N,Tb.Th,BV/TV均显著升高(P<0.05),Tb.sp均显著降低(P<0.05),骨皮质更厚,骨小梁更粗、排列更有序,成骨细胞数量更多,血清CTX-Ⅰ,IL-1β,IL-18,IL-6,TNF-α水平均显著降低(P<0.05),其中F组较E组、H组较G组以上指标均显著更优(P<0.05);C_(1)组、C_(2)组、C_(3)组、D组、F组、H组大鼠的SOD水平均显著升高(P<0.05),MDA水平均显著降低(P<0.05),其中F组较E组、H组较G组以上指标均显著更优(P<0.05);C_(1)组、C_(2)组、C_(3)组、D组大鼠的RANKL,RANK,NF-κB p65,NLRP3,caspase-1 p20蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);C_(2)组、F组大鼠的RANKL,RANK,NF-κB p65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),E组仅NF-κB p65蛋白表达水平显著降低(P<0.01);C_(2)组、H组大鼠的NLRP3,caspase-1 p20蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),G组仅caspase-1 p20蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与E组比较,F组大鼠的RANKL,RANK,NF-κB p65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与G组比较,F组大鼠的NLRP3,caspase-1 p20蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论强骨饮可通过改善OP模型大鼠的BMD及骨指标而治疗OP,其作用机制与抑制RANKL/RANK-NF-κB-NLRP3炎性小体通路相关。

肿瘤细胞入侵淋巴管及经淋巴管扩散的关键：血管内皮生长因子受体-3介导的淋巴内皮激活作用

研究表明，促进淋巴管和血管生长的生长因子一血管内皮生长因子(VEGF-C与VEGF-D)对肿瘤相关淋巴管和血管的生成亦有诱导作用，可促进肿瘤细胞的淋巴转移。但肿瘤细胞究竟如何侵入淋巴管内?以及肿瘤细胞在哪个时期发生转移?值得进一步探讨。研究发现，肿瘤细胞产生的VEGF-C可广泛诱导大量新生淋巴管向肿瘤细胞产生萌芽，并引起淋巴管管腔扩张，提示激活的淋巴管内皮细胞在肿瘤细胞的淋巴转移过程中起着一定的促进作用。

乳腺癌细胞共激活因子SRC-1的表达变化与内分泌治疗的关系

目的:观察三苯氧胺作用前后ERα阳性细胞株T-47D和ERα阴性细胞株MDA-MB-231中共激活因子SRC-1的表达变化,研究共激活因子与内分泌治疗的内在关系。方法:四氮甲唑蓝(MTT)观察两细胞的生存状况,以筛选最佳的药物作用浓度和时间。单细胞凝胶电泳法(Comet法)检测细胞凋亡。细胞免疫组化法观察TAM作用前后细胞中ERα和SRC-1的表达情况。Western blot法检测TAM作用前后细胞中ERα和SRC-1的表达水平变化情况。结果:MTT法测得TAM作用后T-47D和MDA-MB-231的OD值下降,与对照组相比有显著性差异(P<0.05),对T-47D效果更强。0.10mmol/L TAM作用48 h后两种细胞的活力均出现最低值。单细胞凝胶电泳法观察到TAM作用后两组细胞均发生凋亡、染色体断裂现象,尾长、尾DNA%、尾矩、Olive尾矩等指标在给药组与对照组之间有显著性差异,T-47D与MDA-MB-231组相比也有显著性差异(P<0.05)。细胞免疫组化法检测T-47D细胞在TAM作用后ERα阳性细胞减少,SRC-1在作用前后均为阴性;MDA-MB-231细胞SRC-1表达阳性,TAM作用后,SRC-1阳性细胞比例上调,ERα仍为阴性。Western blot结果显示TAM作用后,T-47D细胞ERα表达水平略有下降,SRC-1表达水平未见改变;MDA-MB-231细胞SRC-1表达水平略有升高,ERα表达水平未见改变。结论:在ERα阴性细胞株MDA-MB-231中,共激活因子SRC-1有较高水平表达。0.10mmol/L TAM作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231 48 h后SRC-1表达轻微上调,此变化可不依赖于ERα的表达。