类固醇受体辅助激活子1在中枢神经系统中的功能

类固醇受体辅助激活子1(SRC-1)是最先被发现的核受体辅助激活子(NCOA)。当核受体被类固醇类激素激活后,SRC-1被类固醇受体复合物招募,作用于靶基因上,调节基因转录过程。SRC-1参与多种生理病理过程,以往研究发现SRC-1参与分泌型肿瘤的发生、转移和侵袭等过程。此外,SRC-1也广泛参与中枢神经系统的功能活动,如神经发生、突触形成,与抑郁症、阿尔茨海默病等中枢神经系统疾病密切相关。本文将对SRC-1在中枢神经系统中的作用进行综述。

类固醇受体辅助激活因子-1在脑内的表达及功能研究进展

通过与核受体结合,类固醇激素在调节内环境稳态、生殖发育以及个体行为等过程中发挥着重要作用,而核受体辅助调节因子被证实是类固醇激素发挥调节作用的决定性因素。类固醇受体辅助激活因子-1(steroid receptor coactivator-1,SRC-1)作为脑内主要的核受体辅助调节因子,也是众多类固醇核受体调节靶基因转录必需的始动因子,被证实在大脑突触可塑性、学习记忆等高级认知活动中发挥着重要的作用。本文简要回顾了SRC-1的结构及作用机制,并着重阐述近年来人们对SRC-1在脑内的表达以及功能方面所做的研究进展。

类固醇受体辅助活化因子-1和核受体辅阻遏子在子宫腺肌病中的表达

目的:通过检测子宫腺肌病组织芯片中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)和核受体辅阻遏子(NCoR)的表达,观察SRC-1、NCoR与ER、PR之间的关系,探讨其在子宫腺肌病发生、发展中的作用。方法:用组织芯片技术和免疫组化方法检测42例子宫腺肌病患者异位子宫内膜组织(异位内膜组)和15例因子宫肌瘤行子宫切除术患者非瘤区对照子宫内膜组织(对照内膜组)中ER、PR、SRC-1和NCoR的阳性细胞的平均光密度值(IOD),及两组子宫内膜组织的增殖期和分泌期的IOD值,并进行比较。结果:ER、PR在异位内膜组中的IOD值显著低于对照内膜组(P<0.05);SRC-1在异位内膜组中IOD值明显高于对照内膜组(P<0.05);NCoR在异位内膜组中IOD值明显低于对照内膜组(P<0.05);异位内膜组中SRC-1、NCoR、ER和PR的IOD值增殖期和分泌期的比较,差异无统计学意义(P>0.05);对照内膜组中SRC-1、NCoR、ER和PR的IOD值增殖期高于分泌期(P<0.05)。结论:低表达的ER存在时,SRC-1在异位内膜组织中表达增高,低表达的PR可能降低NCoR的表达,SRC和NCoR可能导致子宫腺肌病异位内膜组织增生活性增高,可能与子宫腺肌病的种植和侵袭有关。

类固醇受体辅助活化因子-1在成年雄性大鼠脑内的表达研究

目的研究类固醇受体辅助活化因子(steroid receptor coactivator-1,SRC-1)在成年雄性大鼠脑内的表达。方法采用硫酸镍铵增强显色的免疫组化技术研究大鼠海马内SRC-1的表达情况。结果SRC-1主要在细胞核内表达,但是在某些核团,尤其是与运动调节有关的核团,可以在细胞核外表达,如胞浆、胞膜甚至突起内。最强表达见于基底前脑的斜角带垂直部、下丘脑弓状核与网状外侧核;高水平的表达见于前嗅核、海马、丘脑和下丘脑部分核团、桥核、脚间核与小脑浦肯野细胞;中等水平的表达见于大部分大脑皮质结构和杏仁复合体以及丘脑,低水平的表达见于中脑、脑桥和延髓大部份。结论SRC-1在成年雄性大鼠脑内的表达比较广泛,可能参与了对多种重要脑功能的调节,如学习记忆、神经干细胞分化发育、神经内分泌与神经免疫、生殖、信息整合与感觉和运动。另外,在大部分脑区SRC-1可能以经典的基因型方式发挥作用,但是,在部分核团也能以通过第二信使的非基因型方式发挥作用。

类固醇受体辅助活化因子-1在成年与老年雌性大鼠脑内的表达研究

目的研究雌性大鼠脑老化过程中脑内类固醇受体辅助活化因子(SRC-1)表达的变化。方法硫酸镍铵增强显色的免疫组化SP法。结果SRC-1免疫阳性产物广泛分布于脑内,免疫阳性产物主要位于细胞核,但是在个别主要与运动有关的核团则明显位于细胞胞膜或胞浆。在成年,最高表达见于大脑皮质大部、海马、桥核、前嗅核、网状外侧核、小脑蒲肯野细胞等部位;中等强度的表达见于隔区、丘脑和脑干,较低水平的表达见于某些下丘脑和脑干的核团。和成年的表达水平相比,老年大鼠的前嗅核、斜角带垂直部、基底神经节、杏仁皮质后核、黑质、脑桥、网状外侧核和小脑浦肯野细胞等部位的表达显著下降,但是在大脑皮质、下丘脑和丘脑以及脑干的很多部位基本保持不变,在极个别核团甚至有所上升。结论SRC-1在大鼠脑内的表达比较广泛,可能参与了对多种重要脑功能的调节;老年脑内主要与运动调控和学习记忆有关脑区内SRC-1表达的降低提示SRC-1可能在脑老化导致的学习记忆障碍以及帕金森综合征等神经退行性疾病中有重要意义。核外SRC-1主要见于与运动有关的核团,提示SRC-1有可能通过第二信使途径发挥对运动功能的快速调节。

类固醇受体辅助活化因子-1、核受体辅阻遏子在子宫内膜癌患者中的表达

目的通过检测子宫内膜癌及增殖期子宫内膜的组织中类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)、核受体辅阻遏子(NCoR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达,观察SRC-1、NCoR与ER、PR之间的关系,探讨其在子宫内膜癌发生、发展中的可能作用。方法用免疫组化方法检测40例子宫内膜癌患者的子宫内膜组织(观察组)和30例子宫内膜息肉患者非息肉区的增殖期的子宫内膜组织(对照组)中SRC-1、NCoR与ER、PR的阳性细胞的平均光密度值(IOD)并进行比较。结果 ER、PR在观察组中的表达显著低于对照组(P<0.05);SRC-1在观察组中表达明显高于对照组(P<0.05);NCoR在观察组中表达明显低于对照组(P<0.05)。结论低表达的ER存在时,SRC-1在子宫内膜癌中表达增高,低表达的PR可能降低NCoR的表达,SRC-1表达的增加和NcoR表达的降低可能导致子宫内膜组织增生活性增高,可能与子宫内膜癌变有关。

类固醇受体辅助活化因子-1在胶质母细胞瘤中的表达及其对上皮间质转化的作用探讨

目的探讨胶质母细胞瘤(GBM)细胞模型中类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)的表达,并分析SRC-1表达与上皮间质转化(EMT)、肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的相关性。方法构建SRC-1敲低和过表达的细胞株,免疫染色、聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各细胞中SRC-1表达情况;Real-time PCR和Western blot检测细胞中钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Twist相关蛋白1(Twist1)等EMT相关基因的表达。结果SRC-1的平均mRNA表达log2(T/N)比为0.58。SRC-1细胞中明显上调。Western blot进一步验证了SRC-1的上调,SRC-1蛋白在肿瘤细胞中明显过表达。肿瘤细胞中SRC-1的免疫组化染色显示高表达;在几种细胞系中检测了SRC-1的蛋白表达,发现SRC-1在人脑胶质细胞U251和U87MG中高表达,在人脑胶质细胞T98MG、LN229及SVG p12中低表达;使用慢病毒的shRNA表达系统抑制细胞系中的SRC-1的表达,SRC-1蛋白表达被sh-SRC-1显著下调(P<0.05);下调SRC-1抑制了Twist1蛋白的表达(P<0.05)。此外,敲低SRC-1可增加E-cadherin的表达(P<0.05),抑制Vimentin的表达(P<0.05);采取替莫唑胺(TMZ)、索拉菲尼(SOR)胶质母细胞瘤临床治疗用药联合SRC-1敲低进行四唑盐(MTT)比色法实验,48 h检测增殖能力。与独加药组比较,SRC-1敲低后在500μmol/L和1000μmol/L浓度的TMZ时都能更好地抑制U251细胞增殖(P<0.05),50μmol/L和80μmol/L浓度的SOR得出相似的结果(P>0.05),表明敲低SRC-1能增强胶质母细胞瘤细胞对TMZ和SOR的敏感性。结论SRC-1在体外可促进胶质母细胞瘤细胞的非锚定生长、细胞迁移和侵袭,与诱导EMT过程有关。

过氧化物酶增殖体激活受体γ辅助激活子-1α在脓毒症肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的探讨脓毒症肺损伤大鼠过氧化物酶增殖体激活受体γ辅助激活子-1α(PGC-1α)在急性肺损伤(ALI)发病中的作用。方法将54只SD大鼠随机分为9组:正常对照组(6只);假手术组3、6、12、24 h(各6只);盲肠结扎穿孔组3、6、12、24 h(各6只)。利用盲肠结扎穿孔手术复制大鼠急性肺损伤模型。HE染色观察大鼠肺组织病理情况;ELISA检测血浆炎症因子(IL-1β、TNFα、IL-6)表达变化;real-time PCR检测肺组织PGC-1αmRNA表达;Western blot检测肺组织PGC-1α蛋白表达情况。结果大鼠经盲肠结扎穿孔后,肺组织显示出血、肺泡塌陷、肺泡间隔增厚、肺间质水肿及大量炎症细胞浸润等肺部炎症的表现。与正常对照组比较,假手术组各时间点大鼠血浆炎症因子(IL-1β、TNFα、IL-6)、肺组织PGC-1αmRNA及蛋白表达水平均无统计学差异(P>0.05);盲肠结扎穿孔组各时间点血浆炎症因子(IL-1β、TNFα、IL-6)表达水平较正常对照组明显升高(P<0.05),且成时间效应关系;肺组织PGC-1αmRNA及蛋白表达水平较正常对照组明显降低(P<0.05),并随着术后时间的延长逐渐降低(P<0.05)。结论正常大鼠肺组织可表达PGC-1α,脓毒症肺损伤大鼠肺组织内PGC-1α的mRNA和蛋白表达水平下降,提示PGC-1α可能参与ALI的发生发展过程。

绝经后骨质疏松症患者骨组织中SRC-3和PGC-1α的表达及意义

目的探讨绝经后骨质疏松症患者骨组织中类固醇受体辅助激活因子3(steroid receptor coactivator-3,SRC-3)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ协同刺激因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α,PGC-1α)的表达及意义。方法 2012年6月~2013年9月,选择于广州军区广州总医院关节外科住院的行全髋关节置换患者20例,术前双能X线(DXA)骨密度仪测量患者腰椎1~4(L1-4)骨密度,根据WHO颁布的诊断标准,分为试验组(腰椎BMD T评分<-2.5,10例)和对照组(T评分>-1.0,10例),术中取一侧开路器切除的粗隆部位松质骨。荧光实时定量RT-PCR和Western blotting分别检测骨组织中SRC-3和PGC-1α等m RNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,试验组骨组织中SRC-3,PGC-1α,CBP/P300,P/CAF m RNA表达水平均下降(P值分别为<0.001,0.036,0.003,0.027),OPN m RNA表达水平升高(P=0.004)。Osteocalin m RNA表达在试验组和对照组中无统计学差异(P>0.05)。试验组SRC-3和PGC-1α蛋白相对表达量较对照组明显下调,分别下调了(53.23±0.55)%(P=0.037)和(72.17±0.64)%(P=0.003)。结论 SRC-3和PGC-1α可能参与绝经后骨质疏松症发病的病理过程。

SRC-1基因在小鼠神经干细胞分化过程中的变化

目的观察类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)基因在小鼠神经干细胞(NSCs)体外培养分化过程中表达的变化。方法用机械分离和酶消化法从1~3 d小鼠大脑皮质获取NSCs原代细胞,体外培养获神经球,传代并消化,经血清诱导神经球细胞分化。形态学、细胞免疫荧光实验观察神经球形态、Nestin表达鉴定NSCs;抗体分别标记神经元、星形胶质细胞,检测细胞分化d 3、9的细胞类型。RT-qPCR和免疫印迹法检测细胞分化d 0、3、9 SRC-1基因mRNA和蛋白的表达。结果新生小鼠大脑皮质获取的细胞,体外培养能扩增形成神经球,Nestin阳性表达。NSCs分化d 3主要为神经元,d 9主要为星形胶质细胞。与NSCs分化d 0相比,SRC-1表达在分化d 3明显升高,在分化d 9明显降低。 结论 成功分离并获取新生小鼠皮质NSCs。在NSCs分化中,SRC-1表达量有明显变化,分布依次为神经元>NSCs>星形胶质细胞。

补肾壮骨颗粒对去势大鼠骨密度和SRC-3及PGC-1α表达的影响

目的研究补肾壮骨颗粒对去势大鼠骨密度和血清、骨髓组织中类固醇受体辅助激活因子3(SRC-3)及过氧化物酶体增殖物活化受体γ协同刺激因子-1α(PGC-1α)表达的影响。方法将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、阿仑膦酸钠组,每组10只。模型组、中药组、阿仑膦酸钠组均建立去卵巢骨质疏松模型,造模4 d后,中药组给予补肾壮骨颗粒2.5 mg/kg灌胃,阿仑膦酸钠组给予阿仑膦酸钠7 mg生药/kg灌胃,假手术组和模型组给予10 mL/kg生理盐水灌胃。连续干预12周后取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测4组大鼠血清SRC-3及PGC-1α水平;处死大鼠,运用小动物双能X射线骨密度仪测量4组大鼠股骨离体骨密度(BMD),实时荧光定量PCR法检测4组大鼠骨髓组织中SRC-3 mRNA及PGC-1αmRNA表达量。结果模型组、中药组、阿仑膦酸钠组血清SRC-3、PGC-1α水平及SRC-3 mRNA、PGC-1αmRNA表达量均明显低于假手术组(P均<0.05),中药组均明显高于模型组和阿仑膦酸钠组(P均<0.05);阿仑膦酸钠组SRC-3 mRNA表达量明显高于模型组(P<0.05),而血清SRC-3、PGC-1α水平和PGC-1αmRNA表达量与模型组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。中药组和模型组大鼠骨密度均明显低于假手术组(P均<0.05),中药组和阿仑膦酸钠组骨密度均明显高于模型组(P均<0.05),中药组与阿仑膦酸钠组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾壮骨颗粒可能通过提高去势大鼠血清及骨髓组织中SRC-3和PGC-1α分子及基因表达水平而促进骨形成,从而提高骨密度。

胃癌与癌旁组织中RACK1、Src和Bcl-2蛋白的表达及相关性研究

目的探讨胃癌及癌旁组织中活化的蛋白激酶C受体-1(RACK1)、类固醇受体辅助活化因子(Src)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因表达的变化。方法收集华北理工大学附属医院2011年8月1日至2014年2月1日手术切除胃癌及癌旁组织标本各80份,采用免疫组织化学法及蛋白质印迹法(Western blotting)检测RACK1、Src及Bcl-2蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达情况,分析其相关性并结合临床病理学资料进行统计学分析。结果免疫组织化学法与Western blotting检测显示,胃癌组织中RACK1表达阳性率及表达水平均低于癌旁组织,Src与Bcl-2表达阳性率及表达水平均高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。在胃癌组织中,RACK1表达分别与Src、Bcl-2表达呈负相关(相关系数r值分别为-0.632、-0.754,P<0.01),Src与Bcl-2蛋白表达无相关性(r=0.217,P>0.05)。结论胃癌组织中RACK1表达明显降低,而Src与Bcl-2表达升高。

骨质疏松椎体压缩性骨折患者SRC-3、PGC-1α水平与骨密度的相关性

目的:探讨骨质疏松椎体压缩性骨折(OVCF)患者血清SRC-3、PGC-1α的水平及其与骨密度(BMD)的相关性。方法:将2014年5月~2016年5月我院骨科收治的64例OVCF患者作为观察组,同期匹配选择64例骨质疏松症且未合并骨折者作为对照A组及64例健康体检者作为对照B组。X线骨密度仪测定患者的腰椎骨密度,ELISA法测定患者血清SRC-3、PGC-1α的水平。结果:观察组患者的BMD值低于对照A组和对照B组,差异有统计学意义(P<0.05),对照A组的BMD值低于对照B组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的血清SRC-3、PGC-1α水平分别为(0.186±0.056)ng/m L、(1.84±0.53)ng/m L,均低于对照A组[(0.347±0.068)ng/m L、(2.95±0.47)ng/m L]和对照B组[(0.713±0.072)ng/m L、(4.88±0.71)ng/m L],差异均有统计学意义(P<0.05),对照A组的SRC-3和PGC-1α水平均低于对照B组,差异有统计学意义(P<0.05)。OVCF患者的BMD值与血清SRC-3和PGC-1α水平均呈正相关(r=0.437,0.526,P<0.05)。结论:OVCF患者的血清SRC-3和PGC-1α水平较低,且BMD与其密切相关,SRC-3和PGC-1α可能参与了OVCF的病理生理过程。

苯丙酸诺龙对烫伤模型大鼠雄激素受体介导靶基因转录调控的影响

背景:中重度烧创伤一直是临床全身治疗的难点,与创面局部处理并重,极大影响治疗预后。同化激素在烧伤动物模型与临床患者的使用治疗中取得安全良好效果。同化激素的应用虽受运动兴奋剂管理的限制,但其雄激素受体与核受体辅助调节因子仍是近年来基因调控机制研究的热门新兴领域。目的:探索苯丙酸诺龙对烫伤大鼠体内雄激素受体介导靶基因转录调控的影响。方法:将36只大鼠随机分为苯丙酸诺龙组、模型组与对照组。苯丙酸诺龙组和模型组大鼠以热水制成20%体表面积深Ⅱ度烫伤大鼠模型后2 d,分别后肢肌肉注射苯丙酸诺龙和生理盐水,隔日1次,连续21 d。结果与结论:苯丙酸诺龙组与模型组大鼠肝脏及性腺(睾丸、卵巢)中类固醇受体辅助活化因子1和胰岛素样生长因子1基因表达水平差异有显著性意义(P<0.05,除肝脏中类固醇受体辅助活化因子1);而模型组与对照组大鼠肝脏及性腺(睾丸、卵巢)中类固醇受体辅助活化因子1、c-myc和胰岛素样生长因子1基因表达水平差异无显著性意义(P>0.05)。说明在不同组织不同生理病理条件下苯丙酸诺龙对类固醇受体辅助活化因子1、c-myc、胰岛素样生长因子1基因表达的作用是不同的。

PR、ER、NCOR及SRC-1在高强度聚焦超声治疗外阴营养不良中的表达

目的探讨妇女外阴营养不良(增生型)在高强度聚焦超声(HIFU)治疗后上皮组织中孕激素受体(PR)、雌激素受体(ER)、核受体辅阻遏子(NCOR)及类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)的表达及意义。方法应用免疫组织方法,检测并比较正常妇女外阴上皮组织、外阴营养不良上皮组织及外阴营养不良HIFU治疗后上皮组织中PR、ER、NCOR和SRC-1的阳性细胞平均光密度值(IOD)。结果 PR、ER、NCOR和SRC-1在外阴营养不良病变组织中的IOD值明显低于外阴正常上皮组织中的PR、ER、NCOR和SRC-1的IOD值(P<0.05);PR、ER、NCOR和SRC-1在外阴白斑病变治疗后的IOD值明显高于其在外阴白斑病变组织中的IOD值(P<0.05)。结论 PR、ER、NCOR和SRC-1在外阴营养不良病变组织中表达显著降低,这可能与外阴营养不良发病有关;HIFU治疗后,PR、ER、NCOR和SRC-1在外阴营养不良病变组织中的表达升高,可作为判断高强度聚焦超声疗效的指标。