类固醇受体辅活化因子家族与乳腺癌

目的探讨类固醇受体辅活化因子家族在乳腺癌发生、发展、治疗、预后等方面的作用。方法对近年来有关类固醇受体辅活化因子家族成员在乳腺癌中作用研究进展的文献进行综述分析。结果类固醇受体辅活化因子是多种类固醇激素与类固醇受体结合并发挥生物学活性的必需因子,是诱导乳腺癌发生、发展和复发的重要辅助因子,同时也是判断乳腺癌预后的重要预示因子。结论抑制类固醇受体辅活化因子的表达及其相关信号通路可能是今后预防和治疗乳腺癌的一种有效途径。

类固醇受体辅助活化因子-1和核受体辅阻遏子在子宫腺肌病中的表达

目的:通过检测子宫腺肌病组织芯片中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)和核受体辅阻遏子(NCoR)的表达,观察SRC-1、NCoR与ER、PR之间的关系,探讨其在子宫腺肌病发生、发展中的作用。方法:用组织芯片技术和免疫组化方法检测42例子宫腺肌病患者异位子宫内膜组织(异位内膜组)和15例因子宫肌瘤行子宫切除术患者非瘤区对照子宫内膜组织(对照内膜组)中ER、PR、SRC-1和NCoR的阳性细胞的平均光密度值(IOD),及两组子宫内膜组织的增殖期和分泌期的IOD值,并进行比较。结果:ER、PR在异位内膜组中的IOD值显著低于对照内膜组(P<0.05);SRC-1在异位内膜组中IOD值明显高于对照内膜组(P<0.05);NCoR在异位内膜组中IOD值明显低于对照内膜组(P<0.05);异位内膜组中SRC-1、NCoR、ER和PR的IOD值增殖期和分泌期的比较,差异无统计学意义(P>0.05);对照内膜组中SRC-1、NCoR、ER和PR的IOD值增殖期高于分泌期(P<0.05)。结论:低表达的ER存在时,SRC-1在异位内膜组织中表达增高,低表达的PR可能降低NCoR的表达,SRC和NCoR可能导致子宫腺肌病异位内膜组织增生活性增高,可能与子宫腺肌病的种植和侵袭有关。

类固醇受体辅助活化因子-1在成年雄性大鼠脑内的表达研究

目的研究类固醇受体辅助活化因子(steroid receptor coactivator-1,SRC-1)在成年雄性大鼠脑内的表达。方法采用硫酸镍铵增强显色的免疫组化技术研究大鼠海马内SRC-1的表达情况。结果SRC-1主要在细胞核内表达,但是在某些核团,尤其是与运动调节有关的核团,可以在细胞核外表达,如胞浆、胞膜甚至突起内。最强表达见于基底前脑的斜角带垂直部、下丘脑弓状核与网状外侧核;高水平的表达见于前嗅核、海马、丘脑和下丘脑部分核团、桥核、脚间核与小脑浦肯野细胞;中等水平的表达见于大部分大脑皮质结构和杏仁复合体以及丘脑,低水平的表达见于中脑、脑桥和延髓大部份。结论SRC-1在成年雄性大鼠脑内的表达比较广泛,可能参与了对多种重要脑功能的调节,如学习记忆、神经干细胞分化发育、神经内分泌与神经免疫、生殖、信息整合与感觉和运动。另外,在大部分脑区SRC-1可能以经典的基因型方式发挥作用,但是,在部分核团也能以通过第二信使的非基因型方式发挥作用。

类固醇受体辅助活化因子-1在成年与老年雌性大鼠脑内的表达研究

目的研究雌性大鼠脑老化过程中脑内类固醇受体辅助活化因子(SRC-1)表达的变化。方法硫酸镍铵增强显色的免疫组化SP法。结果SRC-1免疫阳性产物广泛分布于脑内,免疫阳性产物主要位于细胞核,但是在个别主要与运动有关的核团则明显位于细胞胞膜或胞浆。在成年,最高表达见于大脑皮质大部、海马、桥核、前嗅核、网状外侧核、小脑蒲肯野细胞等部位;中等强度的表达见于隔区、丘脑和脑干,较低水平的表达见于某些下丘脑和脑干的核团。和成年的表达水平相比,老年大鼠的前嗅核、斜角带垂直部、基底神经节、杏仁皮质后核、黑质、脑桥、网状外侧核和小脑浦肯野细胞等部位的表达显著下降,但是在大脑皮质、下丘脑和丘脑以及脑干的很多部位基本保持不变,在极个别核团甚至有所上升。结论SRC-1在大鼠脑内的表达比较广泛,可能参与了对多种重要脑功能的调节;老年脑内主要与运动调控和学习记忆有关脑区内SRC-1表达的降低提示SRC-1可能在脑老化导致的学习记忆障碍以及帕金森综合征等神经退行性疾病中有重要意义。核外SRC-1主要见于与运动有关的核团,提示SRC-1有可能通过第二信使途径发挥对运动功能的快速调节。

类固醇受体辅助活化因子-3通过PI3K/Akt/mTOR信号通路参与子痫前期发病机制中的作用研究

目的:探讨类固醇受体辅助活化因子-3(steroid receptor coactivator-3,SRC-3)参与人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)受损的信号通路,及其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2014年10月至2015年10月在重庆医科大学附属第一医院行选择性剖宫产手术的正常足月妊娠组(31例)以及子痫前期组(29例)的胎盘组织。使用Western blot检测2组胎盘组织SRC-3的表达。脐静脉内皮细胞株(HUVECs)分为4个处理组:正常常氧对照(N)培养组、缺氧/复氧(H/R)培养组、SRC-3 sh RNA慢病毒敲降(sh SRC-3)培养组以及PI3K特异性抑制剂(LY294002)培养组。使用Western blot检测内皮细胞中SRC-3、p-Akt(Ser473)、Akt、p-m TOR(Ser2481)、m TOR的表达。使用细胞管腔成型实验检测内皮细胞血管形成能力。结果:SRC-3在子痫前期胎盘组织蛋白水平低于正常足月胎盘(t=3.501,P=0.013)。细胞学实验中,与N组相比,H/R组、sh SRC-3组及LY294002组HUVECs的SRC-3(t=4.236,P=0.007;t=5.469,P=0.002;t=4.165,P=0.008)、p-Akt(Ser473)/Akt(t=5.214,P=0.002;t=5.188,P=0.002;t=7.054,P=0.000)、p-m TOR(Ser2481)/m TOR(t=4.832,P=0.003;t=5.695,P=0.001;t=5.699,P=0.001)表达降低。H/R组、sh SRC-3组、LY294002组HUVECs血管形成能力低于N组(t=5.268,P=0.002;t=4.648,P=0.004;t=4.087,P=0.009)。结论:SRC-3可能通过PI3K/Akt/m TOR通路参与子痫前期的发病机制。

类固醇受体辅活化因子家族与乳腺癌

类固醇激素通过与包括ER、PR、AR、GR在内的类固醇受体结合而表现出生物学活性，在调控生长发育和多种生理机能方面起着至关重要的作用。与激素结合前，类固醇受体与辅阻遏因子结合以抑制目的基因的活性；与激素结合后，类固醇受体与辅阻遏因子解离并募集辅活化因子而获得翻译活性。所以，类固醇受体辅活化因子（steroid receptor coactivator，SRC）家族在这一过程中起重要作用。

类固醇受体辅助活化因子-1、核受体辅阻遏子在子宫内膜癌患者中的表达

目的通过检测子宫内膜癌及增殖期子宫内膜的组织中类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)、核受体辅阻遏子(NCoR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达,观察SRC-1、NCoR与ER、PR之间的关系,探讨其在子宫内膜癌发生、发展中的可能作用。方法用免疫组化方法检测40例子宫内膜癌患者的子宫内膜组织(观察组)和30例子宫内膜息肉患者非息肉区的增殖期的子宫内膜组织(对照组)中SRC-1、NCoR与ER、PR的阳性细胞的平均光密度值(IOD)并进行比较。结果 ER、PR在观察组中的表达显著低于对照组(P<0.05);SRC-1在观察组中表达明显高于对照组(P<0.05);NCoR在观察组中表达明显低于对照组(P<0.05)。结论低表达的ER存在时,SRC-1在子宫内膜癌中表达增高,低表达的PR可能降低NCoR的表达,SRC-1表达的增加和NcoR表达的降低可能导致子宫内膜组织增生活性增高,可能与子宫内膜癌变有关。

类固醇受体辅活化子-3缺失对核因子-κB表达及活性的影响

目的观察类固醇受体辅活化子（SRC）-3蛋白缺失对脂多糖（LPS）诱导的炎症反应中核因子-KB（NF—KB）表达及活性的影响。方法健康清洁野生型（SRC-3＋/-）小鼠、SRC-3基因敲除（SRC-3-/-）小鼠各20只，雌性，体质量约20g，分为SRC-3＋/-组和SRC-3-/-组，每组设正常（N）、1h、4h、12h四个时相点，每个时相点各5只小鼠。采用腹腔注射5mg／kg体质量LPS构建炎症反应动物模型，Westernblot测定肝组织IKB-α、NF—KBp65／p50和干扰素调控因子-1（IRF-1）的蛋白表达。结果LPS刺激后早期两组小鼠肝组织IKB—d蛋白水平显著降低，其中SRC-3＊/＊组小鼠下降更明显；两组小鼠肝组织NF—KBp65／p50蛋白表达和核转位程度均显著增加，其蛋白表达水平SRC-3。组小鼠高于SRC-3＋/＋组，而核转位程度却显著低于SRC-3＊/＊组；无论是SRC-3＋/＋组还是SRC-3。-组小鼠，LPS刺激引起IRF-1蛋白表达水平显著增加，在相应时相点SRC-3。-组小鼠均显著低于SRC-3＋/＋组。结论SRC-3可通过干预NF—KB的活性来调控炎症反应，其蛋白缺失减轻炎症反应程度可能是其导致IKB—α降解障碍和NF—KB活性下降所致。

类固醇受体辅活化子-3对严重烧伤小鼠肠黏膜屏障功能损伤的影响

目的探究类固醇受体辅活化子-3(SRC-3)对严重烧伤小鼠肠黏膜屏障功能损伤的影响。方法2022年1―4月将SPF级雌性SRC-3基因敲除(SRC-3-/-)小鼠作为对实验组(n=36),并以野生型(SRC-3+/+)小鼠作为对照组(n=36),两组小鼠均诱导建立背部30%体表总面积(TBSA)Ⅲ度烧伤模型。在烧伤后第1、3、5天时,荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(FITC-dextran)灌胃检测肠道通透性,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平和血浆二胺氧化酶(DAO)活性以及内毒素(ET)水平,苏木精-伊红(HE)和阿尔新蓝-过碘酸-希夫(AB-PAS)染色评估肠黏膜损伤和杯状细胞黏液分泌情况,免疫组织化学(IHC)染色检测黏蛋白2(Muc2)的表达,蛋白质印迹法检测肠黏膜中Muc2、IL-6和TNF-α蛋白表达。结果在烧伤后第1、3、5天时,与对照组(SRC-3+/+小鼠)相比,实验组SRC-3-/-小鼠血清FITC-dextran浓度[(1156.21±107.65)μg/L比(685.14±79.36)μg/L、(1425.81±115.36)μg/L比(743.72±82.29)μg/L、(1613.27±120.94)μg/L比(824.35±85.44)μg/L]、血浆DAO活性和ET水平、肠黏膜损伤评分、PAS+杯状细胞数量、血清和肠黏膜中IL-6、TNF-α水平显著升高,AB+杯状细胞数量、肠黏膜中Muc2表达水平显著降低(P<0.05)。结论SRC-3缺失可以在严重烧伤后损害杯状细胞的分化成熟,减少肠黏液的合成与分泌,加重肠黏膜屏障功能障碍。

类固醇受体辅助活化因子-1在胶质母细胞瘤中的表达及其对上皮间质转化的作用探讨

目的探讨胶质母细胞瘤(GBM)细胞模型中类固醇受体辅助活化因子-1(SRC-1)的表达,并分析SRC-1表达与上皮间质转化(EMT)、肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的相关性。方法构建SRC-1敲低和过表达的细胞株,免疫染色、聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各细胞中SRC-1表达情况;Real-time PCR和Western blot检测细胞中钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Twist相关蛋白1(Twist1)等EMT相关基因的表达。结果SRC-1的平均mRNA表达log2(T/N)比为0.58。SRC-1细胞中明显上调。Western blot进一步验证了SRC-1的上调,SRC-1蛋白在肿瘤细胞中明显过表达。肿瘤细胞中SRC-1的免疫组化染色显示高表达;在几种细胞系中检测了SRC-1的蛋白表达,发现SRC-1在人脑胶质细胞U251和U87MG中高表达,在人脑胶质细胞T98MG、LN229及SVG p12中低表达;使用慢病毒的shRNA表达系统抑制细胞系中的SRC-1的表达,SRC-1蛋白表达被sh-SRC-1显著下调(P<0.05);下调SRC-1抑制了Twist1蛋白的表达(P<0.05)。此外,敲低SRC-1可增加E-cadherin的表达(P<0.05),抑制Vimentin的表达(P<0.05);采取替莫唑胺(TMZ)、索拉菲尼(SOR)胶质母细胞瘤临床治疗用药联合SRC-1敲低进行四唑盐(MTT)比色法实验,48 h检测增殖能力。与独加药组比较,SRC-1敲低后在500μmol/L和1000μmol/L浓度的TMZ时都能更好地抑制U251细胞增殖(P<0.05),50μmol/L和80μmol/L浓度的SOR得出相似的结果(P>0.05),表明敲低SRC-1能增强胶质母细胞瘤细胞对TMZ和SOR的敏感性。结论SRC-1在体外可促进胶质母细胞瘤细胞的非锚定生长、细胞迁移和侵袭,与诱导EMT过程有关。

类固醇受体辅活化子-3基因敲除对炎症反应中糖皮质激素受体的影响

目的观察类固醇受体辅活化子(SRC)-3基因敲除对脂多糖(LPS)诱导的糖皮质激素受体(GR)蛋白表达水平及核转位的影响。方法健康清洁SRC-3+/+小鼠、SRC-3-/-小鼠各20只,雌性,体质量约20g,分为SRC-3+/+组和SRC-3-/-组,每组设正常(N)、1h、4h、12h四个时相点,每个时相点各5只小鼠。采用Westernblot测定肝、脾组织GR及SRC-1、SRC-2的蛋白表达。结果无论是SRC-3+/+组还是SRC-3-/-组,LPS刺激引起肝组织GR蛋白表达及核转位显著降低,但SRC-3-/-组降低程度明显小于SRC-3+/+组;SRC-3+/+组和SRC-3-/-组小鼠脾组织GR表达水平4h后开始下降,但SRC-3-/-组下降幅度显著低于SRC-3+/+组,GR核转位在SRC-3+/+组显著降低,而SRC-3-/-组则无显著变化。LPS刺激后SRC-3+/+组、SRC-3-/-组肝组织SRC-1均显著降低,但SRC-3-/-组变化程度均显著小于SRC-3+/+组;两组脾组织中未能明确检测到SRC-1蛋白表达。LPS刺激后两组小鼠肝组织SRC-2蛋白表达均显著增加,但在相应时相点SRC-3-/-组小鼠显著高于SRC-3+/+组;SRC-3+/+组小鼠脾组织SRC-2蛋白表达明显降低,而SRC-3-/-组却显著增加。结论炎症反应中GR蛋白表达及核转位显著降低,产生明显的糖皮质激素抵抗(GCR),SRC-3基因敲除后可缓解其程度。SRC-3基因敲除对炎症反应中肝、脾组织GCR程度的不同影响,可能与SRC家族成员的不同补偿效应有关。

类固醇受体辅活化子-3缺失对脂多糖诱导炎症反应的影响

目的观察类固醇受体辅活化子（SRC）-3蛋白缺失对脂多糖（LPS）诱导炎症反应的影响。方法健康清洁野生型（SRC-3^＋/＋）小鼠、SRC-3基因敲除（SRC-3^-/-）小鼠各20只，雌性，体质量约20g，分为SRC-3^＋/＋组和SRC-3^-/-组，每组设正常（N）、1h、4h、12h四个时相点，每个时相点各5只小鼠。采用腹腔注射5mg／kg体质量LPS构建炎症反应动物模型，观察各时相点重要脏器的病理变化并测定血清TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10浓度。结果LPS腹腔注射后，SRC-3^-/-组小鼠全身情况好于SRC-3^＋/＋组小鼠，但两组的肝、脾、肾、心肌和胸腺病理均未见明显差别。LPS腹腔注射后两组血清TNF—α、IL-1β、IL-6和IL-10的水平均显著升高，但SRC-3^-/-组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著低于SRC-3^＋/＋组小鼠，IL—10水平却显著高于SRC-3^＋/＋组。结论SRC-3蛋白与致炎细胞因子的分泌和释放有关，SRC-3蛋白缺失可减轻炎症反应程度，抑制LPS诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6分泌和释放。

类固醇受体辅活化子-3基因敲除小鼠的繁殖与鉴定

目的:繁殖并鉴定类固醇受体辅活化子(steroid receptor coactivator,SRC)-3基因敲除(SRC-3-/-)小鼠。方法:通过SRC-3-/-雄性小鼠与杂合子(SRC-3+/-)雌鼠杂交,繁殖出SRC-3+/-及SRC-3-/-两种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,并进一步提取肝、脾组织总蛋白,采用Western blot进行蛋白表型鉴定。结果:成功繁殖并准确鉴定出更多数目的SRC-3-/-小鼠。SRC-3+/+小鼠脾组织SRC-3蛋白表达水平显著高于肝组织,而SRC-3-/-小鼠的肝、脾组织均未见SRC-3蛋白表达。结论:雄性基因敲除小鼠与雌性杂合子杂交是获取大量SRC-3-/-小鼠的有效途径,PCR法是其子代简单准确的鉴定方法。

类固醇受体辅活化子-1基因敲除小鼠的繁殖与筛选

目的繁殖和鉴定SRC-1基因敲除小鼠。方法将所引进的雄性野生型小鼠和雌性SRC-1基因敲除小鼠进行交配繁殖,繁殖成功后其子代均为杂合子,杂合子和杂合子再交配就可以得到野生型、杂合型及纯合子3种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,一旦获得雌性和雄性纯合子,其子代就均为纯合子。结果SRC-1小鼠的饲养和繁殖均获得成功,亦成功获得了较多的SRC-1基因敲除纯合子小鼠。结论正确的饲养繁殖以及筛选方法,可以获得较多的SRC-1基因敲除纯合子小鼠。

类固醇受体辅活化子-3在急性胰腺炎患者外周血中的表达及意义

目的探讨类固醇受体辅活化子-3(SRC-3)在急性胰腺炎(AP)患者外周血中的表达及意义。方法采用RT-PCR和Western blot技术分别测定在重症急性胰腺炎(SAP)组、轻症急性胰腺炎(MAP)组和正常对照(NC)组患者外周血中的SRC-3 mRNA转录情况和蛋白表达水平。结果 SRC-3 mRNA及蛋白在SAP组、MAP组和NC组患者外周血中的表达存在差异,其表达水平依次降低(P<0.01)。结论 SRC-3的表达与AP的严重程度有关,炎症越重,其表达越高。

烧伤后小鼠类固醇受体辅活化子的表达变化

目的 观察小鼠烧伤后早期类固醇受体辅活化子（SRC）蛋白表达的时相变化，初步探讨烧伤早期糖皮质激素抵抗的分子机制。方法 将30只健康C57／129雄性小鼠随机分为正常对照组与烧伤组，烧伤组给予背部TBSA15％～20％Ⅲ°烧伤。分别于伤后1、6、12、24小时采用Westernblot测定肝、脾组织SRC家族（SRC-1、GRIP-1、NC0A-3）蛋白表达水平的变化。结果 烧伤组肝组织SRC-1蛋白表达水平在烧伤后l小时即显著降低，6小时降至最低，以后逐渐恢复，至24小时与正常对照组相比无显著差异；正常脾组织SRC-1蛋白表达水平较低，测定结果无统计学意义。烧伤组肝组织GRIP-1、NC0A-3蛋白表达水平在烧伤后显著升高，12小时达到高峰，24小时仍显著高于正常对照组；烧伤组脾组织GRIP-1、NC0A-3在烧伤后1小时显著升高，GRIP-1在烧伤后6小时达到高峰，24小时与正常对照相比差异不显著；而NC0A-3在烧伤后12小时达到高峰，24小时显著高于正常对照组。结论 小鼠烧伤后早期SRC-1显著降低，GRIP-1、NC0A-3显著升高，烧伤后糖皮质激素抵抗的发生发展可能与SRC家族成员表达变化有关。

氯胺酮调节炎症反应中类固醇受体辅活化子的表达

目的观察脂多糖(LPS)腹腔注射后类固醇受体辅活化子(SRC)家族蛋白表达的早期变化及氯胺酮的影响,探讨氯胺酮调节炎症反应的分子机制。方法将15只健康C57/129雄性小鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+氯胺酮组,每组5只。LPS 5 mg/kg,腹腔注射；氯胺酮10 mg/kg,肌肉注射,LPS注射后15 min给予。LPS注射后4 h脱臼处死,取肝、脾、肺,采用Western blot测定SRC家族(SRC-1、GRIP-1、NCoA-3)在蛋白水平的变化。结果LPS组与正常对照组相比,肝组织SRC-1蛋向表达水平显著降低,GRIP-1、NCoA-3显著升高；肺组织SRC-1、NCoA -3显著增加,GRIP-1显著降低；脾组织GRIP-1显著降低,NCoA-3显著增加。LPS+氯胺酮组肝组织SRC-1显著高于LPS组,低于正常对照组,肺组织显著低于LPS组,与正常对照组相比明显升高；肝组织GRIP-1显著低于LPS组,高于正常对照组,而脾、肺组织显著增加,与正常对照组相比无显著差别；NCoA-3蛋白表达水平显著低于LPS组,脾、肺组织明显高于正常对照组,而肝组织相差不显著。结论LPS刺激下肝、脾、肺组织SRC家族成员的变化不同,氯胺酮可抑制LPS诱导的SRC表达变化,其对炎症反应的抑制可能是一种间接作用。

类固醇受体辅活化子-3基因敲除对炎症反应中活化蛋白-1的影响

目的 观察类固醇受体辅活化子（SRC）-3基因敲除对脂多糖（LPS）诱导的炎症反应中活化蛋白-1（AP-1）表达水平及活性的影响.方法 健康清洁野生型（SRC-3＋/＋）小鼠、SRC-3基因敲除（SRC-3-/-）小鼠各20只,雌性,体质量约20 g,分为SRC-3＋/＋组和SRC-3-/-组,每组设正常（N）、1 h、4 h、12 h四个时相点,每个时相点各5只小鼠.采用腹腔注射5 mg/kg体质量LPS构建炎症反应动物模型,Western blot测定肝、脾组织c-Jun、c-Fos的蛋白表达.结果 SRC-3＋/＋组、SRC-3-/-组小鼠肝、脾组织在LPS刺激后c-Jun、c-Fos蛋白表达水平均显著增加,在相应时相点SRC-3-/-组小鼠显著低于SRC-3＋/＋组.LPS刺激后1、4 h两组小鼠肝组织c-Jun核转位程度显著增加,且SRC-3-/-组仅在1 h显著低于SRC-3＋/＋组 两组脾组织c-Jun、肝脾组织c-Fos核转位在所有时相点均显著增加,但在相应时相点SRC-3-/-组小鼠均显著低于SRC-3＋/＋组.结论 LPS刺激后引起AP-1的表达和活性显著增加,SRC-3蛋白缺失可部分抑制AP-1的表达及活性,这可能与致炎细胞因子合成释放减少有关.

类固醇受体辅活化子-3在烧伤后T淋巴细胞功能抑制中的作用

目的探讨类固醇受体辅活化子（SRC）-3蛋白在严重烧伤后T淋巴细胞功能变化中的作用。方法健康SPF级雌性野生型（SRC-3＋/＋）小鼠、SRC-3基因敲除（SRC-3-/-）小鼠各10只,体质量约20 g,分为SRC-3＋/＋组（S组）和SRC-3-/-组（S-组）,每组分为正常（N）和24h两个时相点,每个时相点各5只。制作15%～20%Ⅲ°烧伤模型,按时脱臼处死小鼠,取股动脉血、脾脏和胸腺,并立即分离血浆和外周血、脾、胸腺淋巴细胞。测定血浆IL-2、可溶性IL-2受体（sIL-2R）表达和T淋巴细胞亚群的分布。结果两组正常小鼠血浆IL-2和sIL-2R水平没有显著差别,烧伤后24h均显著升高（P〈0.01）,但S-组小鼠血浆IL-2显著低于S组（P〈0.01）,而血浆sIL-2R显著高（P〈0.01）;正常情况下,S-组小鼠除脾脏CD8＋高于S组小鼠（P〈0.01）外,外周血、脾脏和胸腺CD3＋、CD4＋及CD4＋/CD8＋比值均不同程度低于S组小鼠（P〈0.05或P〈0.01）。烧伤后24h,两组小鼠外周血、脾脏和胸腺CD3＋、CD4＋及CD4＋/CD8＋比值均不同程度下降（P〈0.05或P〈0.01）,CD8＋显著增高（P〈0.05或P〈0.01）,与S组相比,S-组外周血、脾脏和胸腺CD3＋和CD4＋降低更显著（P〈0.01）,CD4＋/CD8＋比值差别均无统计学意义。结论 SRC-3蛋白可能与严重烧伤后T淋巴细胞免疫功能抑制有关,其蛋白缺失可引起T淋巴细胞亚群稳态的改变。

类固醇受体辅活化子-3蛋白在巨噬细胞炎症反应中的作用研究

目的探讨类固醇受体辅活化子（SRC）-3蛋白在脂多糖（LPS）诱导腹腔巨噬细胞（peritoneal macrophages，PMφ）炎症反应中的作用。方法健康SPF级野生型（SRC-3＋/＋）小鼠、SRC-3基因敲除（SRC-3-/-）小鼠各5只，分别分离和原代培养PMφ，并分为SRC-3＋/＋组和SRC-3-/-组。收集并调整细胞浓度为1×10^6／mL，接种于6孔板，1mL／μL，给予10μg/mL LPS刺激，分别在刺激前（N）、刺激后4h和12h收集培养上清和PMφ。测定培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和NO的浓度，PMφ的p65、c—Jun和iNOS的表达及NF—κB和AP-1的DNA结合活性。结果PMO经10μg／mLLPS刺激4h和12h后，培养上清液中分泌的TNF-α、IL-1β、IL-6和NO均显著上升，但在相应时间点SRC-3-/-组显著低于SRC-3＋/＋组，当LPS刺激4h后，两组PMO培养上清液中HMGBl的表达水平与刺激前比较差异无统计学意义（P〉0．05），刺激12h后SRC-3＋/＋组有所升高，而SRC-3-/-组与刺激前比较差异无统计学意义（P〉0．05）；LPS刺激4h和12h后PMφ的p65和C—Jun表达显著增加，在相应时间点SRC-3-/-组的p65显著高于SRC-3＋/＋组，而SRC-3-/-组C—Jun却显著低于SRC-3＋/＋组；LPS刺激4h和12h后，SRC-3＋/＋组的iNOS表达逐渐增加，而SRC-3-/-组未见变化；LPS刺激4h和12h后NF—κB和AP-1的DNA结合活性均显著增高，在相应时间点SRC-3-/-组均显著低于SRC-3＋/＋组。结论SRC-3可能通过调节iNOS、NF—κB和AP-1的表达及活性来调控PMφ的炎症反应。