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AP-1蛋白c-Jun与Fral形成二聚体促进类多巴能神经细胞SH-SY5Y存活
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作者 何伟文 何国振 +2 位作者 伍建伟 梁建峰 袁忠民 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1218-1222,共5页
目的探讨激活蛋白-1(he-1)c-Jun与Fral对类多巴胺能神经细胞存活能力的影响。方法(1)体外培养SH-SY5Y细胞,裂解后进行免疫共沉淀实验,检测c-Jun是否与Fral形成二聚体。(2)将细胞分为4组,分别为对照组[加入二甲基亚砜(DMSO)]... 目的探讨激活蛋白-1(he-1)c-Jun与Fral对类多巴胺能神经细胞存活能力的影响。方法(1)体外培养SH-SY5Y细胞,裂解后进行免疫共沉淀实验,检测c-Jun是否与Fral形成二聚体。(2)将细胞分为4组,分别为对照组[加入二甲基亚砜(DMSO)]、SP600125组、U0126组及SP600125+U0126组[分别加入c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125、MEK1/2抑制剂U0126及SP600125+U0126]。免疫印迹法检测c-Jun或Fral表达,MTT法检测细胞活力。(3)用滴度为100MOI腺病毒(Ad)感染细胞,共分为4组,分别为对照组(转染绿色荧光蛋白)、Ad-c-Jun组、Ad-Fral组、Ad-c-Jun+Ad-Fral组(后3组分别转染相应Ad),免疫荧光染色检测感染率,MTT法检测细胞活力。结果(11免疫共沉淀结果显示c-Jun和Fral形成二聚体。(2)免疫印迹结果显示SP600125组c-Jun表达减少,U0126组Fral表达减少。MTT结果显示,4组细胞活力差异有统计学意义(F=16.647。P=0.ooo)。其中对照组与SP600125组、U0126组及SP600125+U0126组差异有统计学意义B0.05)。(3)过表达c-Jun、Fral后,4组细胞活力差异有统计学意义(F=14.543,P=0.000),其中对照组与Ad-c-Jun组差异无统计学意义(P〉0.05),对照组与Ad-Fral组差异有统计学意义(P〈0.05),Ad-Fral组与Ad-c-Jun+Ad-Fral组差异有统计学意义(P〈0.05)。结论c-Jun与Fral形成二聚体促进类多巴胺能神经细胞存活。 展开更多
关键词 类多巴胺神经细胞 C-JUN Fra1 存活
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