一例类孟买型表型的分子机理研究

为了研究1例类孟买型的分子机理,在血清学方法初步鉴定先证者为A类孟买型的基础上,用PCR扩增先证者ABO基因第6、7外显子、FUT1基因(H)和FUT2基因(Se)的编码区序列,PCR产物经割胶纯化后直接测序分析,并应用PCRSSP和基因扫描方法证实测序所发现的突变。FUT1基因突变通过克隆到质粒载体后测序分析。结果表明:直接测序发现先证者ABO血型基因型为A102A102,FUT1基因第682位A→G错义突变、第547-552位两碱基AG缺失(CAGAGAG→CAGAG)突变。克隆证实1条染色体上FUT1基因为A682G突变,导致M228V氨基酸突变;另一条染色体上第547-552位两碱基AG缺失,导致阅读框架发生移码,提前形成终止密码。FUT2基因为分泌基因Se357和弱分泌基因Se357,385杂合(第357位为T/T纯合,385位为A/T杂合)。结论:FUT1基因A682G和547-552delAG双杂合突变是引起该例先证者表现为类孟买型的分子机理,A682G是一个新的引起类孟买型的FUT1基因突变。

一例类孟买血型的家系分析和分子机制研究

目的对1例类孟买血型个体及其家系进行表型鉴定和分子机制研究。方法应用血清学方法检测ABO、H抗原；应用PCR技术扩增FUT1编码区序列。PCR产物经双酶切后进行直接测序分析。结果先证者红细胞与抗H血清不凝集，血清学鉴定为Bm“。直接测序显示其FUT1基因编码区序列第547552位A、G两碱基为纯合型缺失（CAGAGAG→CAGAG），第814位为A／G杂合，因此推测其单倍型分别为547—552delAG、547—552delAG和814A〉G复合突变。先证者母亲、姐姐、妹妹血型均为B型，母亲、姐姐的FUTl基因分别为814A／G杂合和547—552del／AG杂合，而妹妹为FUT1547—552del／AG杂合。先证者的FUT1547—552AG缺失和814A〉G复合突变均遗传自母亲。结论在类孟买血型个体中首次发现FUT1547—552delAO和814A〉G复合突变。

中国人群中α_(1,2)岩藻糖基转移酶基因C35T变异的频率研究

目的研究中国人群中α1,2岩藻糖基转移酶(alpha-1,2-fucosyltransferase,FUT1)基因FUT1C35T变异的等位基因频率。方法聚合酶链反应扩增包括C35T变异区域的FUT1基因DNA片段,扩增产物用HaeⅢ进行酶切,建立鉴定FUT1基因h4等位基因的PCR-限制性片段长度多态性方法。应用该方法对158名随机汉族人群样本进行检测。结果158名随机样本中,35T/T纯合子8名,35C/T杂合子67名,35C/C纯合子83名,符合Hardy-Weinberg遗传平衡。所有样本的ABO血型鉴定均正常,而非H缺陷。结论FUT1基因C35T不是引起类孟买型的基因突变,而是一种常见的基因多态性。