云南洱海表层沉积物中C_(25)高支链类异戊烯烃(HBIs)的特征及其生物地球化学指示意义

C_(25)高支链类异戊烯烃(C_(25) HBIs)通常被认为是指示硅藻的生物标志化合物,近年来在长江下游湖泊沉积物中被广泛检出。尽管云南湖泊分布广泛,但尚未有C_(25) HBIs检出的相关报道。本研究通过分析洱海不同湖区表层沉积物,首次指出其存在C_(25) HBIs化合物,并通过分析不同C_(25) HBIs化合物的空间分布特征解析其生物地球化学指示意义。结果显示,洱海表层沉积物中存在C_(25:1)HBI和C_(25:2 )HBI化合物,但均未检测到同分异构体。洱海沉积物中C_(25) HBIs浓度为11.18μg/g(TOC),显著高于富营养化的太湖,与澄湖相当。C_(25:1)HBI浓度表现出南高北低的空间分布特征,而C_(25:2 )HBI浓度则相反,因此C_(25:1)HBI可能表征了洱海南部湖区的优势硅藻。在C_(25:2 )HBI浓度较低(<0.4μg/g)的沉积物中,C_(25:1)HBI和C_(25:2 )HBI呈现微弱正相关,而部分浅水区域的沉积物则表现出C_(25:2 )HBI浓度高(>0.4μg/g)但C_(25:1)HBI浓度低的现象。不同湖区沉积物中C_(25) HBIs浓度与总有机碳和总氮含量的关系存在差异:(1)北部湖区C_(25:1)HBI与TN含量呈负相关,可能表明C_(25:1)HBI生源硅藻受到洱海北部农业活动和氮磷肥大量输入的限制。(2)中部湖区C_(25:1)HBI和C_(25:2 )HBI浓度均与湖泊富营养化水平呈微弱正相关,但与总有机碳含量不存在相关性,说明C_(25) HBIs的生源硅藻受控因素相对复杂。(3)南部湖区C_(25:1)HBI浓度和总有机质含量变化一致,和总氮含量呈较强的正相关关系,而C_(25:2 )HBI浓度与湖泊总生产力和富营养化水平的相关性均较弱。综上研究发现,洱海的C_(25:1)HBI浓度可以指示洱海南部湖区的优势硅藻和富营养化程度,这与长江下游湖泊现象不同;C_(25:2 )HBI可能有较多来源,除了和C_(25:1)HBI相似来源的硅藻以外,还包含某些适于生存在浅水环境的硅藻,因此C_(25:2 )HBI受水文条件控制强烈。

苦荞类异黄酮还原酶基因(FtIRL)的克隆及序列分析

利用RT-PCR技术,从苦荞(Fagopyrum tatarium)中克隆得到类异黄酮还原酶基因(IRL)的开放阅读框序列(ORF),命名为FtIRL。序列分析表明:FtIRL含一个长942bp的ORF,编码313个氨基酸,其氨基酸序列与金荞异黄酮还原酶FcIFR(GenBank登录号ABV02071)同源性最高,达到97%;与其他植物IRL同源性为44%～73%。生物信息学分析表明:FtIRL推导的蛋白质含有典型的底物结合口袋和保守的NADPH结合位点,符合短链脱氢酶家族的结构特征。构建基于氨基酸的系统发育树表明,苦荞FcIFR虽然在氨基酸序列上与其他植物的异黄酮还原酶(IFR)有较高的同源性,但其生物学功能可能更接近落叶松脂醇还原酶(PLR)。

甘蔗类异黄酮还原酶(IRL)基因的克隆与表达分析

采用RT-PCR技术从甘蔗中克隆So IRL基因,用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析,利用荧光定量PCR技术研究So IRL基因在甘蔗不同组织和不同胁迫条件下的表达特性。结果表明,克隆获得甘蔗So IRL,Gen Bank登录号为KF808324。该c DNA全长1 169 bp,含有1个927 bp的完整开放阅读框(ORF),编码309个氨基酸。系统进化树分析显示,甘蔗So IRL与玉米的IRL蛋白亲缘关系较近。q RT-PCR分析表明So IRL在甘蔗根、茎、叶中均有表达;在RSD病菌及低温(4℃)、聚乙二醇(PEG)、Na Cl和脱落酸(ABA)4种非生物胁迫下均被诱导表达,但表达模式不同。说明该基因可能参与甘蔗应答RSD过程,并可能在非生物胁迫中也发挥了作用。

烟碱类异黄酮的合成及其性能研究

用红外、核磁、质谱、元素分析仪表征所合成的两个烟碱类异黄酮;研究溶剂及浓度对其荧光光谱的影响,以及其抑菌性能。结果表明,其环己烷溶液荧光强度最大,浓度也有显著影响;且其对大肠杆菌、尤其是对金黄色葡萄球菌有较好的抑制作用。

递增类异节拍流水施工及其在工程实践中的应用

在大量无节奏流水施工组织分析的基础上,提出了递增类异节拍流水施工的概念,分析了类异节拍流水施工流水节拍与流水步距间的关系,给出了类异节拍流水工期估算公式,总结了类异节拍流水施工组织的工程实质和组织步骤。最后以运营高速公路隧道病害处治工程为例,介绍了递增类异节拍流水施工组织思路在工程量按空间分配较均衡、施工过程多、工期要求紧的工程中的应用。对比了类异节拍流水计算工期与估算工期,二者近似相等,说明在类异节拍流水施工组织中,应用本文提出的估算公式,省去繁杂的计算便可估算得到流水工期,从而直观判断流水组织施工工期是否满足工期需求,为施工过程多、工期紧的项目组织流水施工和实施提供决策支持。

非家事代理对外债务中债权人证明责任完善路径——兼对我国司法实践中类案异判问题之反思

近年来,伴随着我国经济社会发展和家庭财富增长,民间借贷衍生的夫妻对外债务风险涉诉案件频发。但我国《民法典》1064条及相关司法解释对非家事代理对外债务承担中债权人证明责任的具体认定尚无统一标准与明晰化规定,导致司法实践中类案异判问题大量存在,加大了社会层面对司法公正的质疑,难以做到法律效果与社会效果的统一。涉诉维权中立法自身不完善、法律语言表述模糊性以及裁判者的认识局限性、债权人法律维权意识不强,则是一直困扰其中的现实难题。因此,要从科学完善立法、统一裁判标准、增强债权人法律与证据意识、制定科学量化规则等途径,完善非日常家事代理范畴下夫妻对外债务中债权人证明责任。

基于UPLC-Q-Orbitrap-HRMS技术鉴定护心胆中异喹啉类生物碱成分

应用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap-HRMS)分析并鉴定了护心胆(Corydalis suaveolens Hance)块根中的异喹啉类生物碱。护心胆甲醇提取物经Poroshell RRHD C_(18)(150 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱。在正离子模式下使用加热电喷雾离子源进行数据采集得到总离子流图。通过对色谱图中各色谱峰的精确质量数进行识别,结合对照品数据及相关文献分析二级高分辨质谱信息。在护心胆甲醇提取物中共鉴定出62个异喹啉类生物碱,包括15个原小檗碱型生物碱、15个四氢小檗碱类生物碱、14个苄基异喹啉类生物碱、3个阿朴菲类生物碱、6个普罗托品类生物碱、7个苯并菲啶类生物碱、2个二氢苯并菲啶类生物碱。该研究对护心胆中异喹啉类生物碱成分进行了较为全面系统的解析,可为后续药效物质基础研究及应用开发奠定基础。

苄基异喹啉类生物碱抗心律失常离子机制研究进展

苄基异喹啉类生物碱(Benzylisoquinoline alkaloids, BIAs)属于异喹啉类生物碱中的一类,根据其化学结构特点可分为小檗碱(Berberine, BBR)和原小檗碱类、阿朴菲类、苄基四氢异喹啉类、普罗托品类、双苄基异喹啉类等。此类生物碱来源中药及中药组方在治疗心悸、怔忡、厥证、胸痹等心血管相关疾病方面也有着丰富的临床用药经验,现代研究表明苄基异喹啉类生物碱具有较强的抗心律失常活性,从中药中开发抗心律失常单体活性成分,毒性、不良反应更清楚,开发成本更低。基于心律失常发病机制复杂的特点,通过多途径,多靶点作用的抗心律失常药物具有更高的安全性和有效性,现在临床使用的抗心律失常药物大多属于单离子通道阻滞剂,具有致心律失常风险,而苄基异喹啉类生物碱可通过影响Na+、K+、Ca2+多条离子通道、抗炎及氧化应激途径达到治疗多种心律失常的目的,极具开发前景。通过查阅、整理近40年的国内外文献,结合中医药理论对苄基异喹啉类生物碱的抗心律失常离子机制进行总结,可为开发安全高效的抗心律失常药物和治疗手段提供参考。

野生金荞麦高黄酮含量愈伤组织中一个类异黄酮还原酶(IRL)基因的克隆与分析(英文)

木脂素是重要的植物防御物质之一,具有优良的生物学活性。为研究传统抗肿瘤良药野生金荞麦的药用次生代谢,用RACE与文库结合的方法,从野生金荞麦高黄酮含量愈伤系cDNA文库中快速克隆了一个类异黄酮还原酶(isoflavone reductase-like,IRL)基因FcIRL的全长cDNA(accession no.EU116032)。FcIRL cDNA全长1 217 bp,含有1个942 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码313个氨基酸,其5′UTR区含有2个终止子TAG,3′UTR区含有推测的加尾信号ATAAA和polyA尾,对应基因组序列不含内含子。FcIRL蛋白N端含有1个N-乙酰化作用位点(M1-K5)和1个保守的NADPH结合位点(G10-G-T-G13-Y-I-G16),具有1个保守的NmrA结构域(V6-N244)和多个重要的磷酸化位点,以及1个保守的N-糖基化作用位点(N214)。序列同源性比较、系统发生分析以及蛋白质高级结构预测分析均表明,FcIRL属于松脂醇-落叶松脂醇还原酶(pinoresinol-lariciresinol reductase,PLR)类,推测具有PLR的生物活性,是8-8′连接木脂素(8-8′-linked lignans)合成途径中的关键酶,催化松脂醇和落叶松脂醇,还原生成开环异落叶松脂(secoisolariciresinol),参与金荞麦药用次生代谢与植物的防御。

紫金龙根中异喹啉生物碱及其抗菌活性研究

为了解紫金龙(Dactylicapnos scandens)中异喹啉生物碱化学成分及其抗菌活性,从紫金龙根的乙酸乙酯部位分离得到10个异喹啉类生物碱,根据理化性质和波谱数据,其结构分别鉴定为普罗托品(1)、1-甲氧基小檗碱(2)、别隐品碱(3)、伪普鲁托品(4)、巴马汀(5)、青藤碱(6)、药根碱(7)、血根碱(8)、四氢巴马汀(9)、异紫堇定(10)。化合物2~4、8为首次从该种植物中分离得到,其中化合物4对大肠杆菌表现出潜在的抑制活性,MIC值为6.25μg/mL,抗菌活性优于临床抗菌药物小檗碱(25.0μg/mL)。

烟草类异黄酮还原酶基因家族的分子克隆

为揭示类异黄酮还原酶(Isoflavone reductase-like,IRL)在烟草次生物质合成和生理功能中的作用,从品种龙里红花烟中克隆普通烟草IRL(NtIRL)基因家族2个成员的全长cDNA和gDNA序列,完成了生物信息学分析、Southern杂交和RT-PCR等分子鉴定。NtIRL1基因为1 946bp,全长cDNA为1 257bp;NtIRL2基因为2 089bp,全长cDNA为1 261bp。NtIRL1和NtIRL2蛋白均为310个氨基酸,分子质量分别为34.652和34.650ku,等电点分别为5.58和5.78。2个蛋白可能发生磷酸化等翻译后修饰,无信号肽,定位于细胞质,但有可能通过跨膜域与质膜发生联系。预测这2个蛋白的K8~G88为AdoHycase(cl09931)保守域,I9~T239为NmrA(pfam05368)保守域,并具有PIP类型蛋白的所有保守性基序和活性残基。预测2个蛋白的二级结构以α螺旋和延伸链为主;三级结构具有PIP酶典型特征,中间有1个催化裂口。BLAST和系统发生分析进一步证实NtIRL家族属于PIP大家族,与IFR的关系比PCBER和PLR更近。Southern blot杂交也证明,普通烟草基因组中有且只有2个IRL基因存在。半定量RT-PCR结果显示,NtIRL1和NtIRL2均在根中优势表达,在地上部各器官中表达很弱或无表达。

黄连中的异喹啉类生物碱

目的：研究黄连（Coptis chinensis Franch.）的化学成分。方法：采用色谱技术进行分离,通过NMR等波谱技术确定化合物的结构。结果：从黄连乙醇提取物中分离得到了7个异喹啉类生物碱,分别鉴定为8-oxyberberine（1）,8-oxocoptisine（2）,8-oxo-epiberberine（3）,6-（[1,3]dioxolo[4,5-g]isoquinoline-5-carbonyl）-2,3-dimethoxy-benzoic acid methylester（4）,corydaldine（5）,noroxyhydrastineine（6）和6,7-methylenedioxy-1（2H）-isoquinolinone（7）。结论：化合物1-7均系首次从该植物中分离得到。

HPLC-Q-TOF/MS鉴定白屈菜中异喹啉类生物碱

目的:利用HPLC-Q-TOF/MS分析技术快速、系统地鉴定白屈菜中异喹啉类生物碱。方法:采用XAqua C8色谱柱(150 mm×2.1 mm,5μm);以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱;体积流量为0.3 m L·min-1;ESI源正离子模式检测。结合对照品的二级质谱及相关文献推测生物碱的结构。结果:从白屈菜的甲醇提取物中鉴定了18个生物碱,其中木兰箭毒碱(1)、北美黄连碱(4)、药根碱(12)、非洲防己碱(14)为首次在白屈菜中报道。结论:HPLC-Q-TOF/MS方法能快捷、准确地鉴定白屈菜中的化学成分,为白屈菜化学成分的进一步提取分离和药效物质基础的研究提供科学依据。

六边形蜂窝芯异面类静态压缩力学行为的仿真分析

目的研究六边形蜂窝芯材异面类静态压缩载荷的数值模拟方法及相关力学行为。方法基于蜂窝单元阵列的方法,构筑了单双壁厚六边形蜂窝芯材异面类静态压缩有限元数值计算模型和分析方法。结果借助于该模拟方法,分析计算了不同结构参数条件下单双壁厚六边形蜂窝芯材的异面变形模式、变形曲线和类静态峰应力值,并绘制了相应的图、压缩力位移曲线和数据表格。结论将计算结果与现有的实验和理论计算结果作对比分析可知,计算结果与已有结果吻合较好,证明了所提出的有限元分析方法的可靠性。

苄基异喹啉类生物碱药理作用及机制的研究进展

苄基异喹啉类生物碱是自然界中很重要的一类生物碱,数量多,结构类型复杂。药理学研究已经证实苄基异喹啉类生物碱具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒以及抗血小板凝集、抗心律失常和抗高血压等心血管疾病的多种药理活性,同时该类生物碱还显示出抗菌、肌肉松弛、降血糖、机体自身免疫调节以及中枢神经系统方面的药理作用,临床应用表明了确实的疗效。本文对该类生物碱丰富的药理作用及机制研究进行了综述。

1-(4-烃氧基)苄基四氢异喹啉类化合物及相关化合物的合成与生物活性

以有心血管活性的异喹啉生物碱为先导物，设计合成了１５个３，４二氢（ＩＩ１，２）和１，２，３，４四氢（４烃氧基）苄基四氢异喹啉化合物（ＩＩ３～１５）。药理实验表明：大部分化合物有舒张血管条作用，其中化合物ＩＩ９对低钾诱导的血管收缩有较强的抑制作用，而对高钾诱导的血管收缩无作用，对硝酸乌头碱诱发的大鼠室性心律失常有明显保护作用。

13种异喹啉类生物碱对体外GLC和HeLa细胞增殖的影响

本文报道了13种异喹啉类生物碱对体外GLC和HeLa细胞增殖影响的结果·首次发现了荷包牡丹碱.克斑宁.普罗托品的体外抗肿瘤活性。千金藤素.小檗胺.粉防己碱、荷包牡丹碱,克斑宁和普罗托品对GLC细胞系增殖的IC_(50)分别为1.61×10^(-5),8.0×10^(-5).1.6 ×10^(-5),2.9 ×10^(-5).2.9×10^(-5)和2.26 ×10^(-5)mol·L^(-1)。千金藤素,小檗胺,粉防己碱,荷包牡丹碱和普罗托品对HeLa细胞增殖的IC^(50)分别为9.7×1O^(-6).1.45×10^(-5).6.4×10^(-5).1.5 ×1O^(-6)和2.32×1^(-5)mol·L^(-1).实验结果提示分子结构中的二氧次甲基可能是该类生物碱具有抗癌活性的必需基团.

北豆根根茎中双苄基异喹啉类生物碱成分研究

目的:研究北豆根根茎中双苄基异喹啉类生物碱成分。方法:利用硅胶柱色谱、高效液相色谱等色谱技术分离得到单体化合物,利用NMR鉴定化合物结构。结果:从北豆根根茎中分离得到7个双苄基异喹啉类生物碱,经波谱分析分别鉴定为新四川轮环藤因(1),华东唐松草碱(2),盾叶轮环藤碱(3),高芳香花桂林碱(4),四川轮环藤宁碱(5),四川轮环藤因(6)和裂环异粉防己碱(7)。化合物1~3和5具有较好的抑制人肝癌细胞(Hep G-2)增殖的活性,IC50值分别为0.58、0.73、0.90、1.66μmol·L^(-1)。结论:化合物1~7为从该植物中首次分离得到。

异喹啉类生物碱的生物活性和构效关系研究进展

异喹啉类生物碱在自然界中分布广泛。由于其结构多样因此具有广泛的生理活性,包括抗菌、抗肿瘤、镇痛、抗心律失常、抗血小板聚集、降压、调节免疫等功能。此类生物碱的药理活性以及构效关系研究一直广为科研人员所关注。主要综述了近10年来异喹啉类生物碱在抗菌、抗氧化、抗疟、抗肿瘤、抗HIV方面的生理活性以及构效关系等研究的新进展,旨在发掘新的特征性基团或结构,为寻找活性先导化合物、合理设计药物分子提供依据。

HPLC-Q-TOF/MS法鉴定血水草中的异喹啉类生物碱

目的利用HPLC-Q-TOF/MS法鉴定血水草Eomecon chionathe Hance中的异喹啉类生物碱。方法血水草甲醇提取液的分析采用XAqua C8色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm);以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量0.3 m L/min;柱温30℃;检测波长284 nm。结合对照品的二级质谱数据及相关文献,推测异喹啉类生物碱的结构。结果从中鉴定出19个生物碱,其中14个(木兰箭毒碱、博落回碱、6-羟甲基二氢血根碱、6-羟甲基二氢白屈菜红碱、6-甲氧基二氢血根碱、6-甲氧基二氢白屈菜红碱、6-丙酮基二氢血根碱、6-丙酮基二氢白屈菜红碱、6-乙酰基二氢血根碱、6-乙酰基二氢白屈菜红碱、6-羧甲基二氢血根碱、6-羧甲基二氢白屈菜红碱、二氢血根碱、二氢白屈菜红碱)为首次在血水草中发现。结论该方法快速准确,可为血水草化学成分的提取分离和药效物质基础的研究提供依据。