人红细胞类同种特异性自身抗体的血清学试验分析与研究

目的近年来,实验室临床样本的检测中,类同种特异性自身抗体(以下简称“类抗体”)样本检出率不断增加。抗球蛋白微柱凝集卡技术逐渐普及应用,进一步提高了类抗体检出率。为了研究类抗体实验室检测特点,探讨类抗体输血原则,本文进行了回顾性数据分析,为产生类抗体的患者提供有效的检测方法和临床建议。方法对160名产生类抗体的受检者进行详细的性别、年龄、诊断、血清学试验等回顾性分析。分析实验所得数据,找寻相关规律。结果类抗体最常见特异性为RH血型类抗体,包括类抗-Ce,类抗-Ec和类抗-D等占94.48%。CCDee分型是类抗体受检者最常见分型。血清微柱凝集卡法检测类抗体反应性较强(类抗体计分值最高:7.16分)。血清试管抗球蛋白法反应强度差异性最为显著,鉴别类抗体特异性较好。结论鉴定类抗体特异性比较困难,建议选择多种鉴定方法。微柱凝集卡法检测类抗体的反应性较强,抗球蛋白法鉴别类抗体特异性较好,建议此两种方法联合使用。输血治疗时应尽量避开类抗体特异性,输注相应抗原阴性的红细胞。

RhC抗原弱表达伴类自身抗-Ce及同种抗-Jkb致配血不合分析

目的:探讨1例患者类自身抗-Ce合并抗-Jkb引起交叉配血不合并分析其RHCE基因弱表达的原因。方法:采用试管法、毛细管离心法对ABO、Rh和Kidd血型抗原进行鉴定。采用盐水、聚凝胺、抗人球蛋白三介质联用多套谱细胞进行抗体筛查及抗体特异性鉴定;采用多重PCR技术对RHCE基因进行测序及单倍体分析并使用SwissModel进行RHCE蛋白建模。结果:该患者血清中检出类自身抗-Ce合并抗-Jkb抗体。RHCE三代单分子测序显示突变组合为c.48G>C、c.150C>T、c.178C>A、c.201A>G、c.203A>G和c.307C>T,在内含子2中存在109 bp插入序列,同时出现内含子5-8大片段丢失,其Rh血型基因型为DCe/DCe,表型为CCDee。结论:基因分型技术可以协助推断患者血清中部分弱表达的RhC、c、E、e的分子机理,以辅助疑难抗体的鉴定,从而保证患者输血安全。

血清SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平与大疱性类天疱疮病情的相关分析

目的探讨血清细胞因子信号转导抑制蛋白-1(SOCS-1)、SOCS-3及抗大疱性类天疱疮(BP)-180抗体水平与BP病情的相关分析。方法选取2018年5月—2022年5月本院诊治的82例BP患者作为研究对象,并将其设立为观察组,同期选取41例健康体检者作为对照组,并根据病情程度将82例BP患者分为轻度组(活动性皮损面积≤10%,n=28)、中度组(活动性皮损面积10%~30%,n=27)和重度组(活动性皮损面积>30%,n=27),展开回顾性研究,对比血清SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体水平及自身免疫性大疱性皮肤病严重程度评分(ABSIS);采用Pearson法分析SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体与ABSIS评分的相关性;并绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体诊断BP的曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度。结果观察组的男性、女性均可发病,性别分布上差异无统计学意义,其中40~69岁为高发的年龄段。观察组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于对照组(P<0.05)。重度组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于轻度组和中度组(P<0.05);中度组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于轻度组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体与ABSIS呈正相关(r分别为0.441、0.580、0.723,P<0.001)。ROC曲线分析显示,SOCS-1、SOCS-3和抗BP-180抗体诊断BP的AUC值分别为0.696、0.765和0.965(P<0.05);敏感度分别为53.70%、41.50%和95.10%,特异度分别为87.80%、100.00%和85.40%。结论血清SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平与BP病情严重程度呈正相关,即其水平会随着病情程度变化而发生改变,临床可通过监测SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平变化为诊断BP及评估病情严重程度提供参考。

自身免疫性溶血性贫血患者类抗-D抗体的鉴定及输血治疗(附1例报告)

目的通过血清学和基因分型对1例自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者类抗-D抗体进行特异性鉴定,指导临床安全用血。方法选择同济大学附属同济医院收治的1例女性AIHA患者为研究对象。采用PCR-SSP法检测鉴定患者ABO、Rh血型,患者血清标本进行吸收放散试验,利用谱细胞对患者血清及放散液中的不规则抗体进行特异性鉴定。回顾性分析患者的病例资料,总结其抗体处理结果和临床诊治经过。结果患者血型为B型DCCee,不规则抗体筛查、直接抗人球蛋白试验结果均阳性,血清及放散液中均检出特异性类抗-D抗体,给予患者相容性去白细胞悬浮红细胞4 U输血后,血红蛋白(Hb)升高至56 g/L,未出现输血反应。采用糖皮质激素治疗后,患者Hb上升至62 g/L,贫血症状缓解。结论血清学检测联合基因分型可鉴定具有同种抗体特异性的自身抗体,类抗-D抗体AIHA患者治疗首选糖皮质激素,危急情况下需要输血治疗时,应选择类抗体相应抗原阴性的红细胞,输血效果较好。

抗CCP抗体、CRP、AKA、ESR联合RF检测在类风湿性关节炎中的诊断价值

[目的]探讨抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及C反应蛋白(CRP)、抗角蛋白抗体(AKA)、血清红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)单独及联合检测在类风湿性关节炎(RA)中的诊断价值.[方法]本院收治的54例RA患者作为观察组,另选取同期进行检查的50例非RA自身免疫性疾病患者作为对照组.比较两组患者抗CCP抗体及CRP、ESR、RF的表达,并比较抗CCP抗体及CRP、AKA、ESR、RF检测结果的阳性率,分析RA与上述指标的相关性,统计并分析RA患者上述各项指标单项及多项联合检测的敏感度、特异性、阳性及阴性预测值.[结果]观察组抗CCP抗体及CRP、AKA、ESR、RF水平均显著高于对照组(P<0.05);观察组抗CCP抗体及CRP、AKA、ESR、RF阳性率均显著高于对照组(P<0.05);相关性分析结果显示:抗CCP抗体及CRP、AKA、ESR、RF与RA呈正相关(P<0.05);ESR诊断RA的灵敏度较抗CCP抗体及CRP、AKA、RF差,抗CCP抗体、RF对RA的诊断特异性高于CRP、AKA、ESR.抗CCP抗体与CRP(二项);抗CCP抗体与CRP、AKA(三项);抗CCP抗体与CRP、AKA、ESR(四项);抗CCP抗体与CRP、AKA、ESR、RF(五项)联合检测结果显示五项指标联合检测诊断RA的灵敏度最高.[结论]抗CCP抗体及CRP、AKA、ESR、RF检测对RA有一定的诊断价值,且多项抗体联合诊断具有更高的灵敏度,可显著提高RA早期诊断效能.

自身免疫性溶血性贫血患者类抗-Ce自身抗体的鉴定及输血1例

类同种特异性自身抗体(简称类抗体),具有明显的红细胞同种特异性,又能被该特异性抗原阴性的红细胞吸收,类同种特异性自身抗体的产生机制与疾病密切相关[1]。类抗体常见于严重的自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者。AIHA是由于患者免疫调节紊乱,红细胞破坏增多而引起的溶血性贫血。笔者在1例AIHA患者的血清中检出类抗-Ce自身抗体,同时追踪和评估了该患者输血及激素治疗的效果,现报道如下。

抗IgE抗体对哮喘模型小鼠的气道高反应和Th2类细胞因子的影响

目的探讨抗IgE抗体在哮喘小鼠模型中对气道高反应及Th2类细胞因子变化的影响及其可能机制。方法雌性Balb/c小鼠30只随机分成3组,即正常对照组、哮喘模型组和抗IgE抗体干预组。分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白质印迹检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中IL-4、IL-5、IL-13、IL-10、TGF-β1含量以及蛋白表达。应用小鼠肺功能仪检测气道阻力的变化。结果抗IgE抗体治疗组与哮喘模型组比较气道阻力明显降低。哮喘模型组小鼠BALF和肺组织中IL-4、IL-5、IL-13、IL-10、TGF-β1含量和蛋白表达明显升高,与正常对照组比较,显著差异(P<0.05)。抗IgE抗体干预组小鼠BALF和肺组织中IL-4、IL-5、IL-13含量和蛋白表达水平均明显降低;IL-10、TGF-β1含量和蛋白表达水平上升不明显,与哮喘模型组比较,没有显著差异(P>0.05)。结论抗IgE抗体对哮喘小鼠的治疗作用,其机制可能与调节Th2细胞所分泌的炎症细胞因子有关。

抗瓜氨酸化蛋白／肽抗体及类风湿因子在类风湿关节炎早期诊断中的应用

目的:探讨两种抗瓜氨酸化蛋白/肽抗体(ACPA)即第三代抗环瓜氨酸肽(CCP3)抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体及类风湿因子(RF)在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。方法:检测30例早期RA患者(RA组)、32例骨性关节炎(OA)和强直性脊柱炎(AS)患者(OA和AS组)及30例健康体检者(对照组)血清抗MCV抗体、抗CCP3抗体及RF水平。分析3种抗体、疾病活动评分(DAS28)、红细胞沉降率(血沉,ESR)及C反应蛋白(CRP)在RA患者治疗后水平的变化。结果:RA组3种抗体的阳性率均高于对照组及OA和AS组(P<0.01)。抗MCV抗体、抗CCP3抗体及RF对RA诊断的敏感性分别为76.67%、66.67%、63.33%,特异性分别为96.77%、95.16%、83.87%。RF与抗MCV抗体、抗MCV抗体与抗CCP3抗体联合检测对RA诊断的敏感性为83.33%、80.00%。RA患者DAS28、ESR、CRP、抗MCV抗体及RF水平较治疗前降低(P<0.05或P<0.01)。结论:抗MCV抗体对RA早期诊断价值较高。抗体联合检测提高了诊断的敏感性。抗MCV抗体及RF对判断RA疾病活动性有重要意义。3种抗体均具有鉴别RA与OA、AS的价值。

类抗-E自身抗体的分析与研究1例

目的通过详细研究类抗-E案例,以及类似案例回顾性分析,研究其特点,了解类抗体在患者体内的减弱速率,探讨类抗体输血原则,为产生类抗体的患者提供检测方法和临床建议。方法对1例产生类抗-E的患者进行详细的血清学试验分析,包括抗体鉴定,直抗试验,类抗体效价,交叉配血等。分析试验所得数据,找寻相关规律。结果该名严重贫血的患者在首次输血前就已产生类抗-E及广谱反应性自身抗体,患者在检测期内类抗体效价快速降低,在数次输血治疗后,血红蛋白快速回升,直抗试验结果一直维持强阳性。结论类抗体在相应抗原阳性红细胞刺激后,可能不会明显增强,在缺乏相应抗原刺激时可能快速衰减。输血治疗时应尽量避开类抗体特异性,输注相应抗原阴性的红细胞会对患者有明显治疗效果。

临床常用β内酰胺类抗菌药物抗体的检测

目的探讨临床常用β内酰胺类抗菌药物在使用者中产生相关药物抗体的情况。方法采集499名使用β内酰胺类抗菌药物治疗的患者血样,应用微柱凝胶技术做直接抗球蛋白试验（DAT）,并对DAT阳性者做相关药物抗体检测。结果本组使用β内酰胺类抗菌药物的患者中,DAT阳性率39.88%（199/499）,其中β内酰胺类抗菌药物抗体检出率32.67%（65/199）,6种β内酰胺类抗菌药物抗体检出率分别为哌拉西林钠他唑巴坦钠45.94%（34/74）、头孢他啶3.70%（1/27）、头孢哌酮钠舒巴坦钠17.14%（6/35）、头孢西丁钠33.33%（1/3）、亚胺培南西司他丁钠52.50%（21/40）、美罗培南10.00%（2/29）;仅有使用哌拉西林钠他唑巴坦钠4例及亚胺培南3例的患者出现症状较轻的血管外溶血证据,使用其他β内酰胺类抗菌药物的患者均无免疫性溶血的相关实验室检测和临床症状。结论使用β内酰胺类抗菌药物治疗的患者可产生相关药物抗体,仅有10.76%使用者因药物抗体引起药源性免疫溶血反应,多数使用者处于无溶血症状的携带药物抗体状态。

抗脂肪细胞膜蛋白多克隆抗体对猪脂类和内分泌代谢的影响

给15 kg体重仔猪分别腹腔注射0,10,20,30 mg抗脂肪细胞膜蛋白多克隆抗体。结果显示,抗脂肪细胞膜蛋白抗体可显著提高血清脂蛋白脂酶(LPL)的活性和低密度脂蛋白(LDL)的含量(P<0.05),降低游离脂肪酸(FFA)和极低密度脂蛋白(VLDL)的含量(P<0.05),对血清总脂、甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(CHO)和高密度脂蛋白(HDL)的含量无明显影响(P>0.05)。此外,该抗体可显著降低血清胰岛素(Ins)的水平(P<0.05),提高三碘甲状腺原氨酸(T3)的水平(P<0.05),而对血清生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的水平无明显影响(P>0.05)。表明抗脂肪细胞膜蛋白抗体可通过影响血液脂类代谢和激素的水平而减少体内脂肪沉积。

IgG性质冷反应性类抗-M特异性自身抗体的鉴定与输血

MNSs血型系统中M抗原在中国人中的比例为78.37%,抗-M是一个人血液中常见的抗体,多为自然产生,以IgM性质为主,且只在低于37℃时有反应,故临床意义不大,部分为IgG性质抗体,可导致严重的新生儿溶血病[1],类抗-M属于类特异性自身抗体,目前国内报道较少。本实验室最近发现1例M抗原阳性的急性白血病患者抗体鉴定呈现抗-M特异性,对其进行抗体鉴定和相关特性检测和分析,证实该抗体为IgG性质冷反应性类抗-M特异性自身抗体,报道如下。

抗类瓜氨酸化抗体在系统性红斑狼疮中的意义

目的:探讨抗类瓜氨酸化抗体(anti-carbamylated fibrinogen antibodies,抗CarP抗体)在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中的意义,SLE是否与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)一样,存在大量针对类瓜氨酸的自身抗体,抗CarP抗体与关节损伤及疾病活动度高度相关。方法:利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测105例确诊的SLE患者和73例健康对照者血清中抗CarP抗体水平,收集其他SLE相关临床和实验室数据,采用SPSS 24.0软件进行相应统计学分析。结果:SLE中存在抗CarP抗体,且明显高于健康对照组(P<0.05)。抗CarP抗体阳性组与阴性组SLE患者相比,在以下临床及实验室指标方面差异有统计学意义:病程、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、抗心磷脂抗体、抗dsDNA抗体、D-二聚体、IgA、IgG、补体C3、补体C4、外周血红细胞计数和血红蛋白水平(P<0.05)。与SLE其他自身抗体相比,抗CarP抗体的阳性率(21.9%)高于抗Sm抗体(15.24%),与抗核糖体P蛋白抗体(22.86%)阳性率相似;在SLE特异性抗体阴性的患者中可检测到抗CarP抗体,其阳性率分别为:抗Sm(-)组20.2%(18/89),抗dsDNA(-)组9.3%(4/43),抗核小体抗体(-)组12.5%(6/48)和抗核糖体P蛋白抗体(-)组20.9%(17/81)。而且,抗CarP抗体水平与病程、补体C3、补体C4、红细胞及血红蛋白呈明显负相关(P<0.05),与ESR、CRP、IgA、IgG、RF、抗心磷脂抗体、抗dsDNA抗体及D-二聚体呈明显正相关(P<0.05)。结论:SLE患者血清中抗CarP抗体水平升高,抗CarP抗体与SLE患者临床及实验室指标具有相关性。

血浆疗法治疗大疱性类天疱疮的临床疗效及自身抗体水平变化

目的:通过研究大疱性类天疱疮(bullous pemphigoid, BP)患者的临床资料,提高对大疱性类天疱疮的认识,并初步评价血浆疗法治疗大疱性类天疱疮的临床疗效,并探索其治疗机制。方法:2009年12月—2015年12月我院皮肤科收治的大疱性类天疱疮患者66例,28例患者接受血浆疗法联合糖皮质激素治疗,作为血浆疗法组(PT组),38例患者单纯应用糖皮质激素治疗,作为单纯糖皮质激素治疗组(HT组),比较两组的临床疗效,每组各采集16名患者的血清,以20名健康者血清作为对照,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测治疗前后血清中抗BP180抗体水平的变化以及抗BP180抗体亚型IgG1、IgG4水平的变化。结果:PT组有效率为92.86%,HT组为73.68%,PT组的治疗效果更为显著。两组患者治疗后抗BP180抗体滴度明显下降(P<0.01),PT组较HT组下降明显(P<0.01),PT组患者治疗后抗体亚型IgG1、IgG4测得的吸光度A值明显下降(P<0.05)。结论:血浆疗法治疗大疱性类天疱疮有效,其机制可能与降低抗BP180抗体及抗体亚型IgG1、IgG4的水平有关。

血清抗角蛋白抗体、抗核周因子和抗环瓜氨酸肽抗体在幼年类风湿关节炎应用中的评价

目的评价抗角蛋白抗体(AKA)、抗核周因子(APF)和抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)在幼年类风湿关节炎(JRA)应用中的意义。方法收集76例JRA及54例非JRA患儿,健康对照30例血清,测定其AKA、APF和抗CCP水平,对JRA诊断敏感性、特异性进行评价,并对JRA患儿中3种抗体阳性和阴性组的临床症状、体征及实验室检查指标进行比较,并作统计学分析。结果AKA、APF和抗CCP及联合检测ROC曲线下面积略高于0.5,但Pa>0.05。单一抗体检测灵敏度为30%～50%,联合检测灵敏度无增加。单一抗体检测的特异度为50%～80%,联合检测特异度增加至80%～85%。JRA组AKA(+)病例较多出现关节强直,心包积液,骨质稀疏,肺炎支原体抗体阳性率相对高,且ASO、ESR、CRP水平较高,Pa<0.05;APF(+)病例较多出现关节强直,骨质稀疏,肺炎支原体抗体阳性率相对高,而且ASO、ESR、CRP水平较高,有显著差异(P<0.05),抗CCP(+)病例与抗CCP(-)病例比较,在临床表现、实验室检查方面无显著差异。结论AKA、APF、抗CCP抗体对JRA缺乏早期诊断意义及特异性,AKA、APF对判断疾病的活动性、病理损害程度和预后有临床意义。

癫痫患者抗脑抗体及脑组织中HLA—Ⅱ类抗原的表达

目的:为获得癫痫患者免疫学异常的证据,本实验检测了患者血清中抗脑抗体(Anti-encephalic antibodies,AEAb)及脑组织人类白细胞抗原Ⅱ类抗原(Human leukocyte antigen class Ⅱantigen,HLA class Ⅱ antigen,HLA-Ⅱ类抗原),并与正常对照组比较。对象及方法:1.用ELISA方法测定37例癫痫患者血清抗脑自身抗体;2.借助免疫组织化学方法观察了HLA—Ⅱ类抗原在脑组织中表达与分布。结果:1.癫痫患者血清抗脑抗体高于正常对照;2.癫痫患者脑组织中星形胶质细胞和小胶质细胞异常表达HLA—Ⅱ类抗原。讨论:本实验证实癫痫患者存在一定程度的自身免疫应答异常。脑组织胶质细胞表面HLA—Ⅱ类抗原表达异常可能通过多种机制参与癫痫发病。

抗角蛋白抗体和抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风湿关节炎中的临床意义

目的探讨抗角蛋白抗体(anti-keratin antibodies,AKA)和抗环瓜氨酸肽(anti-cyclic citrullinated peptide,CCP)抗体检测对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊断的指导意义。方法回顾性分析2012年7月至2013年5月间在该院就诊的1 209例患者的血清AKA和抗CCP抗体的检测结果,其中类风湿关节炎患者241例,其他患者968例,所有血清以间接免疫荧光法检测AKA,酶联免疫法检测抗CCP抗体。结果在类风湿关节炎患者中,AKA和抗CCP抗体的阳性率分别为49.79%和68.46%,在非类风湿关节炎的患者中的阳性率分别为2.69%和2.79%,差异均有统计学意义(P<0.01);AKA的特异性为97.31%,抗CCP抗体的特异性为97.21%。结论 AKA和抗CCP抗体的检测具有较高的特异性,对类风湿关节炎的辅助诊断具有重要意义。

烯二炔类抗肿瘤抗生素单克隆抗体导向药物研究进展

单克隆抗体对相应的抗原有高度特异性。因此,利用单抗作为特异性载体制成导向药物(免疫偶联物),对于治疗肿瘤有巨大潜力和引人瞩目的前景。文章对烯二炔类抗肿瘤抗生素.特别对新制癌菌素、力达霉素和calicheamicins及其单克隆抗体免疫偶联物的研究进展作了概述。

罕见类抗-A1抗体引起ABO血型正反定型不符多因素分析

ABO血型系统是最早被发现的人类血型系统,其基因位于第9号染色体,同时也是最重要的一个血型系统,在临床输血、移植医学和产前诊断中具有重要意义。在日常ABO血型鉴定工作中,常常会碰到正反定型不一致,在排除人为操作因素外,不规则抗体和亚型往往是研究者考虑的方向^([1-3])。