寒凝证类痛经大鼠模型建立的探讨

目的：探讨寒凝证类痛经大鼠模型的建立。方法：将处于动情问期的3月龄SD雌性大鼠60只，按照随机数字法分为6组，每组10只，分别为：空白对照组、盐水对照组、类痛经模型组、冷冻5d组、冷冻5d＋给药组、冷冻10d＋给药组。空白大鼠同步抓取不做任何处理，类痛经模型组、冷冻5d组、冷冻5d＋给药组、冷冻10d＋给药组均每日给予大鼠皮下注射苯甲酸雌二醇注射液，连续10d，第1d及第10d日注射0．5mg/只，第2～9d每日0．2nag／只。末次给药1h后，类痛经模型组、冷冻5d＋给药组、冷冻10d＋给药组腹腔注射缩宫素2U／只。盐水组每日给予同等剂量的生理盐水。每天在注射以后，冷冻5d组、冷冻5d＋给药组、冷冻10d＋给药组放入超低温冰柜冷冻4h，在2h时打开冰柜换气5s，冰柜温度维持在～25℃。观察每分钟扭体评分、寒证表征评分、全血还原黏度、红细胞聚集指数以及红细胞刚性指数。结果：与空白对照组比较，冷冻5d组、冷冻5d＋给药组、冷冻10d＋给药组寒证表征评分明显升高（P〈0．01）；类痛经模型组、冷冻5d组和冷冻5d＋给药组的全血还原黏度高切均明显升高（P〈0．05），冷冻5d＋给药组的红细胞刚性指数明显升高（P〈0．05）：与盐水组比较，类痛经模型组、冷冻5d＋给药组、冷冻10d＋给药组的每分钟扭体评分明显升高（P〈0．05）。结论：全身冷冻法可造成大鼠寒凝证；通过寒凝证模型结合类痛经模型的制备方法，成功建立了寒凝证类痛经大鼠模型，该模型符合中医证候模型的造模思路及特点。

艾灸不同穴位对寒凝证类痛经大鼠疼痛反应及中枢内κ受体mRNA表达的影响

目的:观察艾灸关元、三阴交穴对寒凝证类痛经大鼠扭体反应和脊髓、中脑的κ受体的影响,旨在初步探讨艾灸不同穴位对寒凝证类痛经大鼠镇痛效应的差异及可能的中枢机制。方法:将处于动情间期3月龄的SD雌性大鼠36只,随机分为盐水组、寒凝类痛经组、艾灸三阴交组和艾灸关元组,每组9只。除盐水组外,寒凝类痛经组、三阴交组和关元组采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射法造模。盐水组和寒凝类痛经组不予艾灸,三阴交组在造模第6天、第8天注射苯甲酸雌二醇后及在第10天注射缩宫素后,在大鼠三阴交穴(双侧)予以艾柱施灸,每次灸3壮。关元组灸治方法与之相同。观察大鼠的扭体反应,并测定大鼠脊髓、中脑的κ受体的表达水平。结果:1与盐水组比较,寒凝类痛经组扭体潜伏期明显缩短,扭体次数、扭体评分明显增高(P<0.01)。与寒凝类痛经组比较,关元组扭体次数、扭体评分明显减少(P<0.01);与三阴交组比较,关元组扭体次数、扭体评分明显减少(P<0.05)。结论:1艾灸可明显减轻大鼠的类痛经反应,缓解子宫痉挛性收缩。2初步证实了艾灸不同穴位与镇痛效应差异具有相关性。

针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠体表区域温度的影响

目的：红外热成像技术可用于某些疾病的诊断和辅助诊断。文中旨在探讨针刺在调节不同经穴温度变化上的规律与差异，以及针刺是否引起经脉循行线上穴区温度的循经性升高或降低反应。方法将32只雌性SD大鼠按随机数字列表法分为等渗盐水组、寒凝证类痛经模型组（模型组）、三阴交组、关元组，每组8只。除等渗盐水组外，其余各组大鼠均连续10 d皮下注射苯甲酸雌二醇，末次给药1 h后，腹腔注射缩宫素2 U只/，将大鼠置于-25℃的低温冰柜中连续受冻5 d，每天4 h，制备寒凝证类痛经大鼠模型，等渗盐水组每日给予同等剂量的等渗盐水，不冷冻。运用红外热成像仪检测三阴交穴区、血海穴区、关元穴区的基础温度（针刺前），记录针刺即刻，针刺后5、10、20（取针）、30、40、50、60 min各时间点的温度。结果在即刻至针刺后5 min时，三阴交组及关元组左侧三阴交穴温度显著下降[（-0．56±0．22）℃ vs （-0．48±0．11）℃， P＜0．01]、右侧血海穴区体表温度显著下降[（-0．64±0．21）℃vs （-0．45±0．13）℃，P＜0．05]；在5～10 min时间段，三阴交组右侧三阴交穴区[（0．49±0．35）℃]、右侧血海穴区体表温度[（0．18±0．20）℃]均显著性升高（P＜0．01）；在20～30 min时间段，三阴交组右侧三阴交穴区体表温度较模型组和关元组显著升高[（0．14±0．25）℃，P＜0．01]；在30～40 min时，三阴交组右侧血海穴区体表温度较模型组显著升高[（-0．03±0．11）℃，P＜0．01]。各组左侧血海穴区、关元穴区差异无统计学意义（P＞0．05）。结论针刺三阴交、关元均可调节三阴交穴区、血海穴区的体表温度变化。三阴交组右侧三阴交穴区、血海穴区出现同时间段的循经性升温效应。说明针刺后相同经脉上穴区温度具有循经动态变化的特点。

寒凝证类痛经大鼠经穴左右红外温度及艾灸作用的研究

目的 观察寒凝证类痛经大鼠左右穴区及经穴连线艾灸前后红外温度,比较灸三阴交与关元效应差异.方法 阴道涂片法筛选动情间期大鼠48 只,随机分为正常组、模型组、三阴交组和关元组,每组12 只.全身冷冻结合苯甲酸雌二醇注射法造模,治疗组分别灸双侧三阴交和关元,3 壮/穴.红外热成像仪动态监测相关穴区及经络连线左右艾灸前后红外温度.结果 与正常组比较,灸后5～30 min,模型组三阴交-血海经络连线左右温差显著增加（P〈0.05）;灸后30 min,其他3 组三阴交右侧穴区温度显著降低（P〈0.01）.与模型组比较,灸后5～30 min,三阴交组三阴交-血海经络连线左右温差显著降低（P〈0.05）,关元组10～30 min连线左右温差显著降低（P〈0.05）;两艾灸组比较,三阴交组对连线左右温差影响早于关元组.结论 艾灸可显著减小经络连线左右温差,缓解失衡状态,且灸三阴交恢复失衡作用早于灸关元.

不同艾灸量对寒凝证类痛经大鼠疼痛反应及脊髓内μ受体mRNA表达的影响

目的:观察不同刺激量艾灸关元穴对寒凝证类痛经大鼠扭体反应及脊髓内μ受体表达的影响,探讨不同灸量的镇痛效应及其部分中枢机制。方法:按随机数字表法将60只雌性SD大鼠,随机分为盐水组、寒凝证类痛经模型组、A组(艾灸1壮)、B组(艾灸3壮),每组15只。除盐水组外,其它各组采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射液加缩宫素注射法制备寒凝证类痛经大鼠模型,A组和B组以不同灸量艾灸关元穴。观察大鼠扭体反应,并以荧光定量PCR(RT-PCR)法测定脊髓内μ受体mRNA的表达水平。结果:(1)扭体反应:与盐水组比较,模型组、B组扭体潜伏期缩短、扭体次数、扭体评分明显增高(P<0.05)。与模型组比较,A组、B组扭体次数、扭体评分明显减少(P<0.05)。(2)脊髓μ受体mRNA的表达:与盐水组比较,A组与B组的表达均增强(P<0.01),与模型组相比,A组与B组的表达增强(P<0.01)结论:(1)不同艾灸量施予关元穴对寒凝证类痛经大鼠模型均有镇痛作用。(2)艾灸产生镇痛效应的部分机制可能通过增强寒凝证类痛经模型大鼠脊髓内阿片受体的表达产生镇痛效应。

不同针刺刺激量对寒凝证类痛经大鼠子宫微循环及其相关物质的影响

目的从子宫微循环角度探讨不同针刺刺激量对寒凝证类痛经大鼠的针刺效应。方法动情间期3月龄SD雌性大鼠32只,采用随机数字法分为盐水组、模型组、刺激量A组和刺激量B组,每组8只。采用全身冷冻结合苯甲酸雌二醇注射法造模,刺激量A组予粗针深刺加手法干预,刺激量B组予细针浅刺不施手法。观察各组子宫毛细血管、微血管管径及血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量。结果与盐水组比较,模型组5、10、20、30 min各时点毛细血管管径明显缩小(P<0.01),5、10、20、30、40 min各时点微血管管径明显缩小,血浆6-keto-PGF1α含量明显降低、TXB2/6-keto-PGF1α明显升高(P<0.01)。与模型组比较,刺激量A组5、10、20、30 min各时点毛细血管管径明显扩张(P<0.05),5、10、20、30、40 min各时点微血管管径明显扩张,血浆6-keto-PGF1α含量明显升高、TXB2/6-keto-PGF1α明显降低(P<0.05,P<0.01);刺激量B组在20、30 min微血管管径明显扩张(P<0.05),血浆TXB2/6-keto-PGF1α明显降低(P<0.05)。与刺激量B组比较,刺激量A组5、10、20、30 min各时点毛细血管管径明显扩张(P<0.05),5、10、20、30、40 min各时点微血管管径明显扩张(P<0.01)。结论寒凝证类痛经大鼠存在明显的子宫微循环障碍及循环相关物质的紊乱。A、B刺激量均能改善痛经时子宫微循环,其机制可能与恢复失衡的TXB2及6-keto-PGF1α相关。

不同刺激量针刺关元穴对寒凝类痛经模型大鼠的影响

目的观察不同的针刺刺激量施于关元穴对寒凝类痛经模型大鼠子宫组织中收缩素受体(OTR)及肌球蛋白轻链激酶(MLCK)含量的影响。方法将处于动情间期3月龄的SD雌性大鼠32只,随机分为盐水组、寒凝类痛经模型组24只,造模成功后将寒凝类痛经模型组又分为模型组、刺激量A组和刺激量B组,每组8只。除盐水组外,模型组、刺激量A组和刺激量B组均采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射法造模。盐水组和模型组不予针刺,刺激量A组予以粗针、深刺、行手法;刺激量B组予以细针、浅刺、不施手法。采用荧光定量PCR方法检测大鼠子宫组织中缩宫素受体(OTR)的含量。采用ELISA(酶联免疫法)测量大鼠子宫组织中MLCK的含量。结果与盐水组比较,模型组的子宫收缩波个数、波峰峰值、活动度及MLCK水平均升高(P<0.01);与模型组比较,刺激量A组的子宫收缩波个数明显减少(P<0.05)、MLCK含量明显降低(P<0.01),刺激量B组的OTR mRNA相对表达量降低(P<0.05);与刺激量A组比较,刺激量B组收缩波个数增多(P<0.05)、OTR mRNA相对表达量降低(P<0.01)。结论不同刺激量针刺关元穴对寒凝类痛经模型大鼠的效应有所不同,粗针、深刺、行手法的效应较强于细针、浅刺、不行手法的针刺效应,提示针刺的刺激量也是决定针刺疗效的因素之一。

寒凝证类痛经大鼠子宫体表温度及艾灸干预作用的研究

目的：观察寒凝证类痛经大鼠子宫体表投影区红外温度及其艾灸后的变化,探讨艾灸对子宫体表温度的影响及灸局部穴和远部穴的效应差异。方法：将48只3月龄雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、关元组、三阴交组,每组12只。除正常组外,其余各组大鼠以全身冷冻结合苯甲酸雌二醇注射法造模,关元组和三阴交组于造模结束后分别进行艾灸,3壮/穴。采用红外热成像方法动态监测各组大鼠灸前、灸后即刻、灸后5、10、20、30、40、50、60 min子宫体表投影区温度。结果：（1）时点温度：四组间不同时点的温度变化有统计学意义（F=243.46,P=0.00〈0.05）。分组与监测时间的交互作用有统计学意义（F=16.21,P=0.00〈0.05）。四组间红外温度的差异有统计学意义（F=3.35,P=0.03〈0.05）。其中,正常组各监测时点间温度差异均无统计学意义;模型组灸后20~60 min各时点比灸前温度显著降低（P〈0.05）;灸后30~60 min各时点比灸后即刻温度显著降低（P〈0.05）;三阴交组灸后5~60 min各时点比灸前温度显著降低（P〈0.05）;灸后10~60 min各时点比即刻温度显著降低（P〈0.01）;关元组灸后即刻比灸前温度显著升高（P〉0.05）,灸后5~60 min各时点均比灸前及即刻温度显著降低（P〈0.05）。（2）时段温差：与正常组、模型组比较,三阴交组和关元组的灸后5~60 min各点与灸前温度差值均显著增大（P〈0.05）;与三阴交组比较,关元组的灸后即刻与灸前温度差值显著增大（P〈0.05）。正常组和模型组的各点温度差值未见显著差异（P〈0.05）。结论：寒凝证类痛经大鼠子宫体表投影区存在持续40 min温度降低时段,艾灸可使温度下降时点提前,使该段温度下降幅度显著增加;且灸局部穴和远端穴的即刻效应不同。说明艾灸在一定时间内促进子宫体表红外温度的下降,艾灸对于痛经的治疗作用并非依靠直接提高子宫体表温度,其具体起效机制尚须进一步探讨。

寒凝证类痛经大鼠子宫张力和体表区域温度的变化及艾灸干预作用的实验研究

目的：观察艾灸不同介入时机对寒凝证类痛经大鼠左右三阴交、左右三阴交－血海连线温度的影响及其与镇痛效应的相关性。方法：通过阴道涂片筛选出动情间期3月龄SD雌性大鼠，随机分为盐水组、模型组、灸三阴交1次组（第10d施灸）、灸三阴交3次组（第6d、8d及10d施灸），每组20只。除盐水组外，模型组、灸三阴交1次组、灸三阴交3次组采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射法造模。运用红外热成像仪检测左右三阴交穴区、三阴交－血海连线区各时间点温度。运用BL－420 E＋生物机能实验系统检测在体大鼠子宫收缩强度。结果：与盐水组相比，模型组子宫收缩强度明显增强（P＜0.01）；与模型组比较，两艾灸组均显著减少了子宫收缩波个数（P＜0．01）并降低了子宫活动度（P＜0.01），两艾灸组间差异无统计学意义（P＞0．05）。盐水组在各个时间点，大鼠左右三阴交穴区及三阴交－血海连线区温度平衡（P＞0．05）；模型组大鼠左右三阴交穴区在5～60各个时间点温度失衡（5、40、50、60P＜0．05，10、20、30P＜0．01）左右三阴交－血海连线区即刻－30各个时间点温度失衡（5、30 P＜0．05，即刻、10、20 P＜0．01）；两艾灸组在各个时间点，大鼠左右三阴交穴区、三阴交－血海连线区温度平衡（P＞0．05）。结论：艾灸三阴交可明显缓解寒凝证类痛经大鼠子宫痉挛性收缩，并改善三阴交穴区及三阴交－血海连线区左右温度的失衡状态。艾灸不同介入时机对于缓解痛经的疼痛状态无差异。

不同针刺刺激量对寒凝证类痛经大鼠疼痛及子宫μ受体的影响

目的:观察不同针刺刺激量对寒凝证类痛经大鼠模型的镇痛效应及子宫组织μ受体表达的影响。方法:按随机数字表法将64只雌性SD大鼠,随机分为4组,每组16只,分别为:盐水组、寒凝证类痛经模型组、刺激量A组、刺激量B组。除盐水组外均给予大鼠注射苯甲酸雌二醇和缩宫素2U/只,并于第1天至第5天放入-25℃冰柜冷冻,制备寒凝证类痛经大鼠模型;盐水组每日给予同等剂量的生理盐水。第10天注射缩宫素后,刺激量A组和刺激量B组以不同刺激量进行针刺治疗。记录疼痛即刻开始20min扭体评分和次数、子宫收缩波;以RealTime-PCR法测定子宫组织内μ受体。结果:①与盐水组比较,寒凝证类痛经模型组扭体潜伏期均明显缩短、扭体次数明显增多、扭体总分明显增多(P<0.01)。与寒凝证类痛经模型组比较,刺激量A组扭体潜伏期明显延长、扭体次数减少、扭体评分减少(P<0.01)。与刺激量A组比较,刺激量B组扭体潜伏期明显缩短、扭体次数明显增多、扭体评分明显升高(P<0.01);②与盐水组相比,寒凝证类痛经模型组子宫收缩波个数明显增加(P<0.01),子宫收缩波峰峰值显著升高(P<0.01),子宫活动度显著增加(P<0.01);与寒凝证类痛经模型组比较,刺激量A组显著减少了子宫收缩波个数(P<0.01)并降低了子宫活动度(P<0.05),并且在减少子宫收缩波个数方面优于刺激量B组(P<0.05);③与寒凝证类痛经模型组比较,刺激量A组子宫组织中μ受体表达显著增高刺激量A组(P<0.01),刺激量B组(P<0.05)。结论:刺激量A组可明显减轻寒凝证类痛经大鼠疼痛,缓解子宫痉挛性收缩,其与调节阿片受体的水平密切相关,提示刺激量A组对寒凝证类痛经大鼠具有明显的镇痛效应。

不同针刺刺激量对寒凝证类痛经大鼠疼痛反应及中脑内κ、μ受体mRNA表达的影响

目的:观察不同刺激量针刺关元穴对寒凝证类痛经大鼠扭体反应及中脑内κ、μ受体表达的影响,旨在讨论不同针刺刺激量(粗针、深刺、行手法与细针、浅刺、不行手法)对寒凝证类痛经模型大鼠的镇痛效应及其部分影响机制。方法:雌性大鼠40只,随机分成盐水组、寒凝类痛经模型组、刺激量A组(粗针、深刺、行手法)、刺激量B组(细针、浅刺、不行手法),每组10只。除盐水组外,其它各组采用冷冻法结合苯甲酸雌二醇加缩宫素制备类痛经大鼠模型,刺激量A组和刺激量B组以不同刺激量针刺关元穴。观察大鼠扭体反应,并以荧光定量PCR(RT-PCR)法测定中脑内κ、μ受体mRNA的表达水平。结果:与盐水组相比,模型组、刺激量A组以及刺激量B组扭体的潜伏期缩短(P<0.05),疼痛扭体次数、扭体评分显著增高(P<0.01)。与模型组相比,刺激量A组、刺激量B组的扭体潜伏期均明显延长(P<0.01),扭体次数、扭体评分显著减少(P<0.01)。结论:不同刺激量针刺关元穴对寒凝证类痛经大鼠均有镇痛作用;粗针、深刺、行手法针刺关元穴能够更好的缓解寒凝证类痛经大鼠的扭体反应。

艾灸三阴交、关元对寒凝证类痛经大鼠子宫收缩强度和OTR的影响

目的:观察艾灸三阴交、关元穴对寒凝证类痛经大鼠子宫收缩强度及子宫中缩宫素受体(OTR)的影响,旨在初步探讨艾灸不同穴位对寒凝证类痛经大鼠镇痛效应的差异及可能的分子响应机制。方法:将处于动情间期3月龄的SD雌性大鼠40只,随机分为盐水组、寒凝类痛经组、三阴交组和关元组,每组10只。除盐水组外,寒凝类痛经组、三阴交组和关元组采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射法造模。盐水组和寒凝类痛经组不予艾灸,三阴交组在造模第6天、第8天注射苯甲酸雌二醇后及在第10天注射缩宫素后,在大鼠三阴交穴(双侧)予以艾柱施灸,每次灸3壮。关元组灸治方法与之相同。运用BL-420E+生物机能实验系统检测在体大鼠子宫收缩强度,并用RT-PCR法测定大鼠子宫中OTR的表达水平。结果:1.与盐水组比较,寒凝类痛经组子宫收缩强度明显增强(P<0.01);与寒凝类痛经组比较,两艾灸组均显著减少了子宫收缩波个数(P<0.01),且降低了子宫活动度(P<0.05)。2.与盐水组比较,寒凝类痛经组子宫OTR的峰值增高(P<0.01);与寒凝类痛经组比较,三阴交组和关元组子宫OTR的峰值、均值、泳道值均显著降低(P<0.01)。结论:(1)艾灸可明显减轻大鼠的类痛经反应,缓解子宫痉挛性收缩。(2)本实验结果显示两穴镇痛效应未见明显差异。

振腹法对寒凝证类痛经大鼠子宫体表投影温度及前列腺素E2、前列腺素F2α的影响

目的探讨振腹法对寒凝证类痛经大鼠子宫体表投影温度及前列腺素E_(2)、前列腺素F_(2α)的影响。方法应用随机数字表法将30只SD雌性6周龄、体重(230±20)g大鼠分为对照组、模型组、振腹组,每组10只。模型组和振腹组采用冷冻结合皮下注射苯甲酸雌二醇、腹腔注射缩宫素联合致痛进行模型制备,对照组给予注射同等剂量的生理盐水。模型制备成功后以振腹仪模拟振腹法进行治疗,之后观察大鼠的扭体反应及子宫体表投影温度,应用酶联免疫吸附试验测定血清中前列腺素F_(2α)、前列腺素E_(2)的含量。结果模型组扭体潜伏期短于对照组、扭体次数多于对照组及扭体评分高于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01);振腹组扭体潜伏期长于模型组、扭体次数少于模型组及扭体评分低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。模型组子宫体表投影温度低于对照组,振腹组子宫体表投影温度高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。模型组血清中前列腺素F_(2α)高于对照组,前列腺素E_(2)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);振腹组血清中前列腺素F_(2α)低于模型组,前列腺素E_(2)高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论振腹法可改善子宫局部温度失调状态,调控血清中前列腺素水平,抑制子宫平滑肌痉挛收缩,改善局部组织缺血缺氧进而达到“温经止痛”的作用。

针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠子宫收缩程度及疼痛相关机制的影响

目的:比较针刺三阴交穴、关元穴对寒凝证类痛经大鼠子宫平滑肌收缩程度及脊髓、子宫组织中κ-受体、μ-受体含量的影响,探讨不同穴位介入的效应差异及部分机制。方法:将64只雌性SD大鼠随机分为盐水组、寒凝证类痛经模型组、针刺三阴交组、针刺关元组,每组16只。采用皮下注射苯甲酸雌二醇和低温冷冻的方法制备寒凝证类痛经模型,末次给药1 h后,麻醉大鼠,运用BL-420F生物机能实验系统记录子宫的收缩程度。采用Real Time-PCR检测大鼠脊髓及子宫组织中κ-受体、μ-受体的含量。结果:1.子宫平滑肌收缩程度:与盐水组比较,模型组子宫收缩波的个数显著增加(P<0.01)、子宫收缩波峰峰值显著升高(P<0.05)、子宫活动度显著增强(P<0.01),三阴交组、关元组子宫活动度显著增强(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,三阴交组与关元组子宫收缩波的个数及子宫活动度均显著下降(P<0.05)。2.脊髓及子宫组织中κ-受体、μ-受体水平:(1)脊髓中的κ-受体及μ-受体水平:各组间比较无统计学差异;(2)子宫组织中的κ-受体水平:各组间比较无统计学差异;(3)子宫组织中μ-受体水平:与盐水组比较,关元组子宫组织中μ-受体水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,三阴交组、关元组子宫组织中μ-受体水平均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:针刺三阴交穴、关元穴均可降低子宫收缩波个数和子宫活动度,抑制子宫平滑肌的异常收缩反应。分析其效应的部分机制是通过调节子宫靶器官组织的阿片肽受体水平,进而达到针刺镇痛的作用。

针刺得气对寒凝证类痛经模型大鼠效应指标的作用

目的观察针刺三阴交穴"得气"与"未得气"状态对寒凝证类痛经模型大鼠子宫收缩、微循环及扭体反应的影响。方法将96只动情间期雌性SD大鼠随机分为盐水对照组(对照组)、寒凝证类痛经模型组(模型组)、得气组与未得气组,每组24只。采用全身冷冻加雌二醇注射方法制备类痛经大鼠模型。得气组与未得气组造模成功后对大鼠双侧三阴交穴进行针灸刺激,观察大鼠子宫张力不同时间段变化、微循环多时间窗变化及扭体反应。结果与对照组相比,模型组子宫活动度显著增加。得气组的子宫收缩波个数及子宫活动度比模型组显著减少。模型组与未得气组的子宫微血管、毛细血管管径比对照组明显收缩;与模型组相比,得气组在各时间段微血管均扩张,毛细血管管径在针刺后40、50、60 min明显扩张(P<0.05)。与模型组相比,得气组扭体潜伏期明显延长、扭体次数减少、扭体评分降低(P<0.01)。结论针刺三阴交穴得气能缓解痛经模型大鼠子宫收缩,改善子宫微循环障碍,并具有一定的后续效应。

针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠左右三阴交穴区温度变化的影响

目的:观察针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠的三阴交(双)穴区温度的影响及其与镇痛效应的相关性。方法:将大鼠随机分为盐水组、寒凝证类痛经模型组(简称模型组)、针刺三阴交组、针刺关元组。采用全身冷冻法结合注射苯甲酸雌二醇和缩宫素造模,用红外热成像方法检测各组大鼠左右两侧三阴交穴区各时间点温度,并同步观测各组大鼠的扭体反应。结果:与盐水组比较,模型组扭体潜伏期明显缩短、扭体次数明显增多、扭体总分明显升高(P<0.01);与模型组比较,两针刺组扭体潜伏期均明显延长、扭体次数均减少、扭体总分均降低(P<0.05,P<0.01)。模型组大鼠在5-60min左右三阴交穴区温度失衡(P<0.05,P<0.01);针刺三阴交组大鼠在10-40min左右三阴交穴区温度失衡(P<0.05);针刺关元组大鼠在0-30min左右三阴交穴区温度失衡(P<0.05)。针刺三阴交穴在针刺5min时、针刺结束后50-60作用显著,针刺关元穴仅在针刺结束后40-60min作用显著。结论:寒凝证类痛经大鼠处于疼痛状态且左右三阴交穴区温度失衡;针刺三阴交穴、关元穴均能缓解疼痛反应,调节其失衡状态。

针刺关元对寒凝证类痛经大鼠三阴交穴区温度及TXB_2/6-keto-PGF_(1a)比值的影响

目的观察针刺关元穴对寒凝证类痛经大鼠三阴交穴区温度(双侧)的影响并探讨其与TXB_2/6-keto-PGF_(1a)有关的机制。方法将大鼠随机分为盐水组、寒凝证类痛经模型组(简称模型组)、针刺关元组。采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇和缩宫素注射法造模,用红外热成像方法检测各组大鼠左右两侧三阴交穴区0、5、10、20、30、40、50、60 min各时间点温度,同时用ELISA法测定血浆TXB_2和6-keto-PGF_(1a)含量。结果盐水组在基础温度、0~60 min各个时间点,大鼠左右三阴交穴区温度平衡(P>0.05);模型组在5~60 min各个时间点,大鼠左右三阴交穴区温度失衡(P<0.05,P<0.01);针刺关元组在基础温度、0~30 min大鼠左右三阴交穴区温度失衡(P<0.05),40~60 min逐渐趋近平衡(P>0.05)。与盐水组比较,模型组TXB_2/6-keto-PGF_(1a)比值明显升高(P<0.05);与模型组比较,针刺关元组TXB_2/6-keto-PGF_(1a)比值明显降低(P<0.05)。结论寒凝证类痛经大鼠左右三阴交穴区温度失衡;针刺关元穴能调节其失衡状态,且调节需要一定的时间过程,在针刺结束后10~40 min作用显著,其内在机制与针刺调节体内血管舒缩物质TXB_2/6-ketoPGF_(1a)比值的失衡有关。

直刺与沿皮刺三阴交穴对寒凝证类痛经大鼠缩宫素及其受体的影响

目的:观察直刺、沿皮刺三阴交穴对寒凝证类痛经大鼠子宫组织及脊髓腰膨大中缩宫素(OT)及其受体(OTR)的影响,探讨不同刺法即刻镇痛效应的部分机制。方法:64只SD雌鼠随机分为盐水组、模型组、直刺组、沿皮刺组,每组16只。采用全身冷冻加雌二醇注射法制备寒凝证类痛经模型。直刺组与沿皮刺组分别直刺或沿皮刺三阴交穴,留针20min。记录各组大鼠的扭体反应及子宫收缩程度。采用ELISA法、Real Time-PCR法检测大鼠子宫组织及脊髓腰膨大中OT含量、OTR mRNA表达。结果:与盐水组比较,模型组扭体评分、子宫收缩波个数、活动度均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,直刺组、沿皮刺组均显著降低扭体评分、子宫收缩波个数及活动度(P<0.01,P<0.05)。与盐水组比较,模型组OT含量、OTR mRNA表达在子宫组织显著升高(P<0.01),在脊髓显著降低(P<0.01)。与模型组比较,直刺、沿皮刺组均显著降低子宫组织OT含量(P<0.01)、OTR mRNA表达(P<0.05),升高脊髓OT含量(P<0.01)。直刺组与沿皮刺组间各指标均无显著差异。结论:直刺、沿皮刺三阴交穴对类痛经大鼠均显示出即刻镇痛效应,其机制可能与针刺对子宫与脊髓OT、OTR的不同调节有关。

针刺治疗原发性痛经机制的研究进展及思考

通过检索中国期刊全文数据库及PubMed数据库,对筛选出的针刺治疗模拟原发性痛经(PD)大鼠机制研究文献进行分析,发现针刺治疗PD的机制包括调控内分泌与镇痛物质、调节免疫炎性反应、改善子宫血流、减轻氧化应激等方面。不同针刺干预方式对经穴缓解PD的效应差异机制、经典效穴的特异性机制值得进一步研究,以完善针刺治疗PD的多途径机制研究,为临床优化针刺治疗PD方案提供科学依据。

Interaction of δ-opioid Receptor with Membrane Transporters: Possible Mechanisms in Pain Suppression by Acupuncture

Objective： To investigate the possible mechanisms in acupuncture analgesia by interaction of δ-opioid receptor with neurotransmitter transport proteins or the Na^＋-K^＋ pump. Methods： Microinjection of respective heterologous cRNA into the Xenopus oocytes as a model system, and measurement of steady-state currents under two-electrode voltage clamp. Results： The co-expression of the 8-opioid receptor with GAT1, EAAC 1 or the sodium pump resulted in reducing activity of the respective transporter. Opioid receptor activation affected transporter activity in different ways： 1） GAT1 was further inhibited; 2） EAAC1 was stimulated; 3） Na^＋-K^＋ pump activity interfered with agonist sensitivity of DOR. Pump inhibition led to higher sensitivity for DPDPE. Conclusion： GABA transporter inhibition and glutamate transporter stimulation may counteract pain sensation by affecting the neurotransmitter concentration in the synaptic cleft and, therefore, may contribute synergistically to pain suppression by acupuncture. Sodium pump inhibition by endogenous ouabain may amplify these effects. These synergistic effects may be the molecular mechanism of inhibiting pain sense and/or acupuncture analgesia.