钙调蛋白结合蛋白、类肌钙蛋白和脊椎动物平滑肌收缩的调节

平滑肌细胞包含有粗肌丝、细肌丝和中等纤维。一般认为ｃａ^（２＋）／ＣａＭ依赖性的肌球蛋白磷酸化作用是平滑肌收缩的重要调控环节。然而，新近在平滑肌中发现钙调蛋白结合蛋白（ｃａｌｄｅｓｍｏｎ）和类肌钙蛋白（ｃａｌｐｏｎｉｎ），它们也参与平滑肌收缩的调节。

类肌钙蛋白在乙型肝炎肝组织中的表达变化

目的 探讨类肌钙蛋白(Calponin，CN)在慢性乙型肝炎(CHB)肝组织中表达的病理学意义。方法 采用CN单克隆抗体，对150例CHB不同的病理学表现型进行了观察。结果 在60例较轻组(G1，G2)，肝组织中CN表达阳性占多数(70％)，强阳性占少数(13％)；在90例CHB较重组(G3，G4，LC)，肝组织CN表达则强阳性占多数(86％)，阳性占少数(14％)，两者有极显著性差异(P<0．01)，随着CHB的病交加重而肝组织CN表达亦随之增强。结论 CN对CHB病程中的肝血液循环障碍可能起着重要的调控作。

棉铃虫类肌钙蛋白多克隆抗体的制备与鉴定

利用蛋白免疫法制备鼠抗棉铃虫类肌钙蛋白(Helicoverpa armigera Calponin,Ha Cal)的多克隆抗体并进行初步应用。通过原核表达棉铃虫类肌钙蛋白,镍柱纯化获得目的蛋白,经足垫加皮下注射免疫小鼠,4次免疫后用ELISA检测法确定鼠抗Ha Cal蛋白多克隆抗体的效价。通过Western blot和免疫组化检测该多克隆抗体免疫特异性。蛋白免疫法制备的鼠抗Ha Cal多克隆抗体滴度高于1∶819 200。Western-blot和免疫组化显示该抗体能特异性识别棉铃虫体内的天然Ha Cal蛋白。利用蛋白免疫法制备获得了效价高且特异性强的鼠抗棉铃虫Ha Cal多克隆抗体,旨为进一步研究棉铃虫Ha Cal蛋白表达特性及其抗药性功能提供重要的实验工具。

类肌钙蛋白和钙调蛋白结合蛋白在胃肠运动及其病理适应性调节中的作用

目的 研究类肌钙蛋白 (calponion ,CaP)和钙调蛋白结合蛋白 (caldesmon ,CaD)在胃肠道中的表达及其在胃肠运动病理适应性调节中的作用。方法 通过建立慢性番泻叶诱导的胃肠运动增强和实验性肝硬化胃肠运动减弱 2种动物模型 ,应用SDS PAGE和Westernblot方法检测不同胃肠运动状态下胃肠道平滑肌组织中CaP和CaD的表达 ,并用图像分析进行定量比较。结果 建立了慢性番泻叶诱导的胃肠运动增强和实验性肝硬化胃肠运动减弱 2种动物模型。正常小鼠和大鼠胃肠道组织中CaP和CaD的含量依次为结肠 >胃 >小肠 ;慢性胃肠运动增强小鼠肠道组织中CaP和CaD的含量下降 ;实验性肝硬化胃肠运动减弱大鼠胃肠道组织中CaP和CaD的含量显著增加 ,而经左旋硝基精氨酸甲基酯治疗胃肠运动恢复后 ,它们的含量亦恢复至正常。结论 CaP和CaD的表达与胃肠道各部分的运动状态密切相关 ,胃肠道运动增强 ,其含量减少 ,胃肠道运动减弱则其表达增高。提示这2种蛋白质分子参与了胃肠运动的调节和病理适应性调节过程。

棉铃虫类肌钙蛋白基因的克隆、原核表达纯化及其时空表达谱分析

为探索棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)类肌钙蛋白基因HaCal的生理功能及其所编码蛋白的生物特性,采用PCR方法克隆了HaCal的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,借助在线软件对其进行生物信息学分析,通过原核表达技术诱导表达和纯化其编码的蛋白,并通过实时荧光定量PCR技术分析其在棉铃虫不同发育龄期和组织中的表达量。结果显示,HaCal的ORF序列长度为564 bp,编码187个氨基酸,理论分子量为20.52 kD,理论等电点为7.64。其保守结构域与Calponin家族一致,但不含跨膜区和信号肽,系亲水性蛋白。原核表达结果显示,融合蛋白大小与理论值一致,纯化获得了纯度较高的目的蛋白。HaCal在棉铃虫幼虫不同发育阶段和不同组织中均有表达,在6龄幼虫体内表达量最高,是1龄幼虫的2.34倍;在5龄幼虫中肠中表达量最高,是头部的257.14倍。表明棉铃虫类肌钙蛋白基因HaCal可能与棉铃虫的生长发育过程密切相关。

类肌钙蛋白(Calponin)亚型和生物学功能

Calponin(类肌钙蛋白)是一个肌动蛋白细肌丝相关的调节蛋白,表达在平滑肌细胞和许多类型的非肌细胞中。哺乳动物有Calponin 1、Calponin 2和Calponin 3三个亚型,分别由三个同源基因CNN1、CNN2和CNN3编码,表达于不同的细胞类型,并执行细胞类型特异性的生理功能。除了调节平滑肌收缩功能,Calponin还调节非肌细胞肌动蛋白骨架的功能并参与多种细胞生命活动,如增殖、粘附、迁移、分化、吞噬和细胞融合等。本综述重点讨论Calponin亚型的基因进化、组织和细胞类型特异性表达、结构和功能的关系以及相关的调节机制。

心肌肌钙蛋白T对急性心肌梗死的诊断价值

目的 探讨心肌钙蛋白T(cTnT)对急性心肌梗死 (AMI)早期诊断价值。方法 用酶联免疫法 (ELISA)检测血清cTnT ,速率法检测肌酸肌酶同工酶MB(CK -MB) ,并对 8例AMI胸痛发作 6h内入院患者进行动态观察。结果对照组和患者组cTnT、CK -MB血清水平分别为 (0 1 8± 0 0 9)ug/L、(1 5 1± 3 4)U/L和 (3 6± 3 4)ug/L、(91 1±80 6)U/L ,患者组阳性率分别为 89 3 % (2 5/2 8)、71 4% (2 0 /2 8) ;8例动态观察的患者中有 3例 2小时内入院 ,血清cTnT水平开始升高 [(0 446± 0 0 70 )ug/L]。 8例患者血清cTnT升高达峰值时间为 (1 3 5± 2 6)h ,比CK -MB早[(1 8 0± 3 0 )h]。 1 0天～ 1 4天回复正常。结论 cTnT是急性心肌梗死的早期诊断指标 。

甲状腺乳头状癌组织中GCDFP15、Calponin的表达及临床意义

目的分析甲状腺乳头状癌组织中巨囊性病液体蛋白15(GCDFP15)、类肌钙蛋白(Calponin)的表达水平及临床意义。方法选取2014年1月至2017年5月于该院确诊并行手术切除的102例甲状腺乳头状癌患者作为研究对象,收集其癌组织(研究组)及相对应的癌旁正常组织(正常组)标本,采用免疫组织化学法检测两组GCDFP15、Calponin的表达情况,分析GCDFP15、Calponin表达与甲状腺乳头状癌患者临床病理特征的关系,采用单因素、多因素COX回归分析GCDFP15、Calponin表达与甲状腺乳头状癌预后的关系。结果研究组GCDFP15阳性表达率(64.71%)明显高于对照组(29.41%),研究组Calponin阳性表达率(39.22%)明显低于对照组(66.68%),差异均有统计学意义(P<0.05)。GCDFP15、Calponin表达在不同TNM分期、侵犯被膜、淋巴结转移的甲状腺乳头状癌患者之间差异有统计学意义(P<0.05)。GCDFP15、Calponin阳性与阴性患者对应5年生存率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,甲状腺乳头状癌5年生存率与TNM分期、侵犯被膜、淋巴结转移、GCDFP15阳性及Calponin阴性表达有关(P<0.05)。多因素COX分析结果显示,TNM T 3~4期、淋巴结转移、侵犯被膜及GCDFP15阳性、Calponin阴性均为影响甲状腺乳头状癌病预后的独立危险因素(P<0.05)。结论甲状腺乳头状癌患者癌组织中GCDFP15、Calponin表达情况与甲状腺乳头状癌患者TNM分期、侵犯被膜、淋巴结转移有关,二者有望成为评估甲状腺乳头状癌患者预后的有效指标。

前列腺癌组织中GCDFP15、Calponin表达与患者临床病理特征和预后的关系

目的:探讨前列腺癌组织中巨囊性病液体蛋白15(GCDFP15)、类肌钙蛋白(Calponin)表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取2017年3月—2019年3月潜江市中心医院行前列腺根治术的102例前列腺癌患者作为前列腺癌组,另选同期行经尿道前列腺电切术的55例良性前列腺增生患者作为前列腺增生组。采用免疫组化法检测两组前列腺组织中GCDFP15和Calponin表达情况。通过单因素分析GCDFP15、Calponin表达与前列腺癌患者临床病理特征的关系,采用多因素Cox回归分析影响前列腺癌患者预后的危险因素。结果:前列腺癌组的GCDFP15阳性率为79.41%,高于前列腺增生组的1.82%,Calponin阴性率为75.49%,高于前列腺增生组的0(P<0.05)。临床分期为T3和T4期、Gleason≥7分、远处转移、淋巴结转移、术前前列腺特异抗原(PSA)≥20 ng/mL前列腺癌患者的GCDFP15阳性率、Calponin阴性率分别高于T1和T2期、Gleason<7分、无远处转移、无淋巴结转移、术前PSA<20 ng/mL的前列腺癌患者(P<0.05)。GCDFP15阴性表达患者3年生存率为80.95%,高于阳性表达患者的50.62%(P<0.05),Calponin阳性表达患者3年生存率为84.00%,高于阴性表达患者的48.05%(P<0.05)。单因素分析显示,不同Gleason评分、远处转移、淋巴结转移、术前PSA水平的前列腺癌患者3年生存率比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示,Gleason≥7分、有淋巴结转移、术前PSA水平≥20 ng/mL、GCDFP15阳性表达、Calponin阴性表达是影响前列腺癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:GCDFP15、Calponin表达异常与前列腺癌的病情进展、预后有关,GCDFP15阳性和Calponin阴性表达能够作为前列腺癌预后评估的生物学指标。

GCDFP15和Calponin在宫颈病变组织中表达及临床预后意义

目的探讨巨囊性病液体蛋白15(GCDFP15)、类肌钙蛋白(Calponin)在宫颈癌和癌前病变组织中表达水平及与患者临床病理特征、预后的关系。方法选取2014-09-01-2016-09-30电子科技大学医学院附属绵阳医院·绵阳市中心医院行宫颈活检或手术的151例患者的宫颈石蜡标本和45例癌旁组织标本(距癌周>2 cm,正常组)为研究对象。其中将84例宫颈癌作为宫颈癌组、35例宫颈高级别上皮内病变(HSIL)作为HSIL组、32例宫颈低级别上皮内病变(LSIL)作为LSIL组。免疫组化法检测GCDFP15和Calponin在不同宫颈组织中的表达情况。通过χ^(2)检验分析GCDFP15、Calponin表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系。多因素Cox回归分析影响宫颈癌患者预后的关联因素。结果宫颈癌组GCDFP15阳性表达率(76.19%、62.86%、46.87%和0)与Calponin阴性表达率(71.43%、54.29%、43.75%和2.22%)均高于HSIL、LSIL和正常组,差异均有统计学意义,χ^(2)值分别为70.369和57.043,均P<0.001。国际妇产科协会(FIGO)分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为低分化和淋巴结转移的宫颈癌患者GCDFP15阳性表达率(89.66%vs 69.09%、88.89%vs 66.67%、94.44%vs 71.21%)与Calponin阴性表达率(89.66%vs 61.82%、88.89%vs 58.33%、94.44%vs 65.15%)均高于Ⅰ~Ⅱ期、中/高分化和无淋巴结转移的宫颈癌患者,差异均有统计学意义,均P<0.05。GCDFP15阴性表达患者的5年生存率(OS;75.00%)高于阳性患者(40.63%);Calponin阴性表达患者的5年OS(40.00%)低于阳性患者(70.83%),差异均有统计学意义,均P<0.05。单因素分析结果显示,Ⅰ~Ⅱ期、中/高分化、无淋巴结转移、GCDFP15阴性、Calponin阳性的宫颈癌患者5年OS高于Ⅲ~Ⅳ期、低分化、淋巴结转移、GCDFP15阳性和Calponin阴性的宫颈癌患者,差异有统计学意义,χ^(2)值分别为5.601、8.402、4.056、7.206和6.523,P值分别为0.018、0.004、0.044、0.007和0.011。多因素Cox回归分析显示,Ⅲ~Ⅳ期(HR=2.36,95%CI:1.35~4.13)、有淋巴结转移(HR=2.22,95%CI:1.32~3.73)、GCDFP15阳性表达(HR=2.63,95%CI:1.40~4.94)和Calponin阴性表达(HR=3.33,95%CI:1.52~7.31)是宫颈癌患者预后的关联因素,χ^(2)值分别为18.546、16.367、21.053和25.361,均P<0.001。结论GCDFP15在宫颈癌组织中以阳性表达为主,而Calponin在宫颈癌组织中以阴性表达为主。GCDFP15阳性表达、Calponin阴性表达与宫颈癌患者的预后不良有关,可作为预测患者预后的生物学指标。

维持性血液透析患者血清cTnI、CRP水平对预测心血管事件价值的作用

目的探讨血清肌钙蛋白I(cTnI)、C-反应蛋白(CRP)水平对预测慢性肾衰维持性血液透析患者发生心血管事件的价值。方法80例慢肾衰维持性血液透析患者,分别测定cTnI、CRP水平后,继续规律血液透析每周3次,每次4小时,1月后再次测定cTnI、CRP水平,随诊1年,终点为心血管事件。结果血液透析1月后cTnI、CRP水平与初测相比均无明显变化(P﹥0.05);随诊1年后,12例患者发生心血管事件,其中82%患者cTnI水平升高,60%CRP升高。80例患者中cT-nI升高和cTnI正常心血管事件发生率分别为24%和5%(P﹤0.01),CRP升高和CRP正常为32%和10%(P﹤0.01)。结论慢肾衰维持性血液透析患者,规律性血液透析不能有效降低cTnI、CRP水平,异常升高的cTnI、CRP与心血管事件有关。