干扰TcRXR2对朱砂叶螨卵期的致死效果分析

【目的】基于RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术筛选朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus卵孵化过程中的关键基因,为开发靶向朱砂叶螨卵期的RNAi控制技术奠定基础。【方法】通过基因克隆、序列分析和qPCR分析,筛选出在朱砂叶螨卵期特异性表达的基因(类视黄醇X受体2,RetinoidX receptor 2,TcRXR2),并应用RNAi,表型观察分析干扰TcRXR2基因表达后,对朱砂叶螨各个发育过程的影响。【结果】克隆获得了TcRXR2的全长序列,开放阅读框长度为1293 bp,可编码氨基酸为430 aa,具有核受体的DNA结合域(DNA-binding domain,DBD)和配体结合域(Ligand binding domain,LBD)。TcRXR2在第二若螨阶段高表达,在其他阶段无显著性差异(P>0.05),但是进一步检测其在不同日龄卵中的表达发现,TcRXR2在卵后期表达量显著提高(P<0.05)。在连续饲喂ds TcRXR2的条件下,朱砂叶螨幼螨仍能成功发育为成螨,使用点滴ds TcRXR2的方式处理卵则可显著影响卵的孵化(P<0.05),具有致死效应。这些结果表明,TcRXR2基因是影响朱砂叶螨卵孵化的特异性RNAi靶点。【结论】研究找到了一个对朱砂叶螨卵期具有致死效应RNAi靶点,为利用RNAi技术防治朱砂叶螨奠定了基础。