长链非编码RNA赖氨酰氧化酶样蛋白1反义RNA在结直肠癌中的表达及对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)赖氨酰氧化酶样蛋白1反义RNA(LOXL1-AS1)在结直肠癌中的表达及对结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响和可能的作用机制。方法 选取2016年1月至2018年12月在河南省人民医院行结直肠癌根治术的56例病人新鲜癌组织,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结直肠癌组织样本及结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116和Lovo细胞中lncRNA LOXL1-AS1的表达水平,以配对癌旁组织及人正常结直肠黏膜细胞FHC作正常对照;构建靶向LOXL1-AS1序列的小干扰RNA(si-LOXL1-AS1)并转染SW480和Lovo细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆实验、划痕实验和Transwell小室法检测沉默lncRNA LOXL1-AS1表达对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测沉默LOXL1-AS1表达后磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关蛋白及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达情况。结果 LOXL1-AS1在结直肠癌组织中的相对表达水平显著高于癌旁组织(1.37±0.05比0.87±0.05,P<0.05),其表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、肝转移和MSI状态显著相关(均P<0.05);LOXL1-AS1在结直肠癌细胞系(SW480、SW620、HCT116、Lovo)中的表达水平显著高于FHC细胞(1.93±0.10、1.32±0.04、1.50±0.07、1.78±0.09比1.10±0.07,P<0.05),沉默lncRNA LOXL1-AS1表达可抑制SW480细胞和Lovo细胞的增殖、侵袭及迁移能力,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达含量升高,N-钙黏蛋白(N-cadherin)、磷酸化脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达含量降低(均P<0.05)。结论 LOXL1-AS1在结直肠癌组织中高表达并与临床病理特征相关,沉默LOXL1-AS1可显著降低结直肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,该机制可能与PI3K/Akt信号通路及EMT途径有关。

赖氨酰氧化酶样蛋白1在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达

目的观察赖氨酰氧化酶(LOX)家族中的赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)及相关胶原蛋白在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达,探讨其在日本血吸虫肝纤维化形成中的作用。方法采用日本血吸虫感染的小鼠肝纤维化模型,于感染后第6、9、12周剖杀小鼠,收集其血清和肝脏标本;以HE和天狼星红两种染色方法分别观察并评价小鼠肝脏纤维化的进展程度;同时检测小鼠血清转氨酶水平。以免疫印迹(Western blot)和荧光定量PCR(qPCR)方法分别检测肝组织LOXL1、Ⅰ型胶原蛋白(Col1)及α-肌动蛋白(α-SMA)的表达并分析其含量的变化;并对血清中的可溶性和不可溶性胶原进行测定,以判断胶原交联情况。结果HE和天狼星红染色结果显示,随感染时间延长,小鼠肝纤维化也随之进展,在感染第9周肝纤维化程度最为严重,随后进入慢性肝纤维化期,纤维化程度减轻。Western blot和qPCR结果显示,LOXL1和其他纤维化指标表达情况类似,均在感染第9周时表达量明显上调;可溶性胶原含量在感染第9周时达峰值后下降,而不可溶性胶原含量则持续上升。结论LOXL1与血吸虫肝脏纤维化过程中纤维交联存在相关关系,可能在肝纤维化进程中起到促进作用。

腹股沟直疝及斜疝患者腹横筋膜原纤维蛋白-1、转化生长因子β1、类赖氨酰氧化酶1的表达研究

目的比较原纤维蛋白-1(Fibrillin-1)、转化生长因子β1(TGFβ1)及类赖氨酰氧化酶1(LOXL1)在腹股沟直疝及斜疝患者腹横筋膜组织的表达,探讨腹股沟直疝的发病机制。方法用免疫组化和Western blot方法检测在我院行疝修补术患者(直疝19例,斜疝23例)腹横筋膜组织中Fibrillin-1、TGFβ1及LOXL1的表达情况。并对两者相关性进行分析。结果腹股沟直疝患者腹横筋膜组织Fibrillin-1、TGFβ1及LOXL1的含量显著低于斜疝患者(P<0.05);直疝腹横筋膜Fibrillin-1与TGFβ1(P<0.05),LOXL1与TGFβ1的表达呈正相关(P<0.05)。结论腹股沟直疝患者腹横筋膜组织Fibrillin-1、TGFβ1及LOXL1存在异常表达,并且相互作用共同参与了腹股沟直疝的发生。

转录因子BTB-CNC同源体1通过上调赖氨酰氧化酶促进胶质母细胞瘤中巨噬细胞的募集和极化

目的研究转录因子BTB-CNC同源体1(BACH1)通过上调赖氨酰氧化酶(LOX)促进胶质母细胞瘤(GBM)中巨噬细胞的募集和极化。方法基于公共数据库分析BACH1在胶质瘤中的表达特点和预后情况;构建BACH1过表达的稳转GBM细胞系,并对其进行转录组和蛋白质组联合测序分析;利用Transwell共培养体系将GBM细胞与巨噬细胞共培养,观察对巨噬细胞的趋化和极化影响;构建GL261-C57BL/6小鼠脑胶质瘤原位模型,探索靶向调控BACH1对肿瘤生长以及免疫微环境中巨噬细胞的影响。结果首先,相对于正常脑组织,BACH1在胶质瘤中高表达,且在GBM患者中表达最高;同时还发现高表达BACH1的GBM患者预后较低表达BACH1的患者更差。然后,测序结果发现相对于BACH1空载组,BACH1过表达组中肿瘤相关巨噬细胞趋化因子LOX的转录和蛋白水平均显著升高(转录组,P<0.0001;蛋白组,P=0.0015)。其次,流式实验结果表明,相对于BACH1空载组,BACH1过表达组中M2型肿瘤相关巨噬细胞(CD11b^(+)CD206^(+))明显增加(P<0.0001),当加入LOX抑制剂后,两组中的M2型肿瘤相关巨噬细胞明显减少且BACH1过表达组减少的更明显(BACH1-Vec,P=0.0015;BACH1-OE,P=0.0013)。小鼠脑胶质瘤原位模型结果提示,相对于BACH1空载组,BACH1过表达组中肿瘤体积更大且侵袭能力更强。结论BACH1能够通过促进GBM细胞分泌肿瘤相关巨噬细胞趋化因子LOX进而影响巨噬细胞的募集和极化,最终促进肿瘤的恶性进展。

类赖氨酰氧化酶1和Fibulin-5与盆底功能障碍疾病

盆底功能障碍疾病是由于支持盆底的肌肉、筋膜、神经纤维等组织发生病变,导致盆底支持结构薄弱所致。随着健康意识的提高,对其关注也越来越多。盆底功能障碍疾病的发生与分娩损伤、子宫支持组织的疏松薄弱及长期腹压增加有关,但其发病机制迄今尚未完全明确。动物实验研究表明,类赖氨酰氧化酶1(LOXL-1)是弹性纤维发育成熟和保持内环境稳定的关键酶,Fibulin-5与LOXL-1协同以原纤维的形式分布于富含弹性蛋白的组织,能直接与原弹性蛋白结合,并将原弹性蛋白以特定的序列锚定于细胞表面,对弹性纤维的合成有促进作用。

类赖氨酰氧化酶1在翼状胬肉中的表达

目的通过检测正常结膜组织和翼状胬肉中类赖氨酸氧化酶1(LOXL-1)的表达,探讨LOXL-1在翼状胬肉发展过程中的影响及意义。方法采用免疫组织化学检查正常结膜组织(19例)和翼状胬肉组织(25例)中LOXL-1的表达情况,测定两组免疫组织化学结果的光密度值。结果正常结膜组织与翼状胬肉中LO XL-1的光密度值比较,差异有统计学意义(P<0.05),正常结膜组织偏低。结论翼状胬肉组织中LO XL-1的表达较正常结膜组织高,LOXL-1在翼状胬肉发展中起到了促进的作用。

小鼠P311蛋白与类赖氨酰氧化酶-1相互作用的鉴定

P311是利用抑制差减杂交技术从小鼠肺组织中筛选到的一个肺泡发育上游调节基因.它高水平表达于肺泡发育的相关阶段,而在慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者肺组织中表达水平大大下降.为深入探讨P311蛋白的作用机制,构建pGBKT7-P311诱饵表达载体,利用酵母双杂交技术,从小鼠肺组织cDNA文库中筛选出P311相互作用蛋白类赖氨酰氧化酶-1(lysyl oxidase-like 1,Loxl-1).并通过体内外免疫共沉淀及双分子荧光互补实验进行验证.为进一步研究P311蛋白的生物学功能提供新的思路。

转化生长因子β1通过赖氨酰氧化酶调控低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化

目的:探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是否通过赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)参与低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化。方法:24只SD大鼠随机均分为常氧组、低氧组以及低氧+β-氨基丙腈(β-aminopropionitrile,β-APN)组。体外培养大鼠支气管上皮细胞,分为常氧组、TGF-β1组、TGF-β1+SB431542(TGF-β1受体拮抗剂)组、低氧组、低氧+SB431542组以及低氧+β-APN组。比色法测定并计算胶原蛋白交联,免疫组织化学法和Western blot检测大鼠支气管上皮细胞TGF-β1、LOX、E-钙黏蛋白(E-cadherin)以及波形蛋白(vimentin)的蛋白表达。结果:在大鼠动物模型中,低氧组支气管上皮细胞TGF-β1、LOX、vimentin蛋白表达以及胶原交联均明显高于常氧组,但E-cadherin蛋白表达则明显弱于常氧组,低氧对vimentin、E-cadherin蛋白表达以及胶原交联的影响均能被β-APN所逆转。离体细胞实验显示,常氧组大鼠支气管上皮细胞为铺路石状形态,TGF-β1组和低氧组大鼠支气管上皮细胞形态逐渐向梭形上皮间充质细胞转化,而β-APN能逆转大鼠支气管上皮间充质细胞转化。TGF-β1能诱导大鼠支气管上皮细胞LOX蛋白表达,呈浓度依赖性,并被SB431542所阻断。与常氧组比较,低氧组离体培养的大鼠支气管上皮细胞TGF-β1、LOX和vimentin表达及胶原交联明显升高,SB431542能明显下调TGF-β1或低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞LOX和vimentin的表达及胶原交联;TGF-β1组和低氧组离体培养的大鼠支气管上皮细胞E-cadherin表达减弱,SB431542能逆转TGF-β1或低氧培养的大鼠支气管上皮细胞E-cadherin的表达。结论:TGF-β1介导LOX表达,促进低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化。

下调赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)表达抑制乳腺癌细胞的增殖与迁移

目的探究赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)基因对乳腺癌细胞的增殖及迁移能力的影响。方法利用基因表达谱交互分析(GEPIA)与Kaplan-Meier分析确定乳腺癌组织LOXL1的表达以及与乳腺癌患者预后的关系。通过慢病毒稳定转染技术,稳定敲低MDA-MB-231细胞和MCF7细胞的LOXL1。采用集落形成实验、CCK-8法、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色实验检测敲低LOXL1对乳腺癌细胞增殖能力的影响,划痕实验以及Transwell^(TM)实验检测敲低LOXL1对乳腺癌细胞迁移能力的影响。结果与正常组织相比,LOXL1在乳腺癌组织高表达,且与不良预后相关;敲低MDA-MB-231、MCF7乳腺癌细胞LOXL1后,细胞增殖和迁移能力明显降低。结论敲低LOXL1降低乳腺癌细胞的增殖及迁移能力。

T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1、赖氨酰氧化酶mRNA的表达与结直肠癌淋巴结微转移及预后的关系

目的探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(T-lymphoma invasion and metastasis-inducing factor,Tiam1)、赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)mRNA的表达与结直肠癌淋巴结微转移及预后的关系。方法收集2014年8月至2017年6月在中国人民解放军总医院第七医学中心普外科手术切除的结直肠癌患者病灶组织样本与癌旁组织样本78例,采用免疫组化法测定淋巴结微转移情况,采用反转录-聚合酶链反应检测Tiam1、LOX mRNA表达情况,同时随访患者的生存情况与一般情况,最后进行相关性分析。结果在78例样本中,病灶组织样本检出淋巴结微转移20例,检出率为25.6%;在癌旁组织样本中检出淋巴结微转移2例,检出率为2.6%,两组比较差异有显著性(P<0.05)。病灶组织样本中的Tiam1、LOX mRNA阳性表达率分别为43.6%、89.7%,癌旁组织样本分别为2.6%、3.8%,两组比较差异有显著性(P<0.05)。所有患者均获得随访,平均(33.52±1.31)个月,随访生存45例,生存率57.7%。Tiam1 mRNA阳性患者的结直肠癌淋巴结微转移率显著高于阴性患者,生存率显著低于阴性患者,两组比较差异有显著性(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析也显示Tiam1 mRNA阳性表达患者的生存期低于阴性表达患者(P<0.05)。Cox模型多因素风险回归分析显示LOX mRNA表达、Tiam1 mRNA表达、淋巴结微转移都是影响患者预后生存的主要独立危险因素(P<0.05)。结论Tiam1、LOX在结直肠癌侵袭转移过程中具有重要作用,Tiam1、LOX mRNA的表达与结直肠癌淋巴结微转移及预后存在显著相关,也是影响患者预后的危险因素。

结直肠癌组织中锌指E盒同源结合蛋白-1、赖氨酸酰氧化酶-2的表达变化及意义

目的探讨结直肠癌组织中锌指E盒同源结合蛋白-1(ZEB1)与赖氨酸酰氧化酶-2(LOXL2)的表达变化及其意义。方法利用免疫组织化学法检测83例结直肠癌患者手术切取的癌组织与癌旁组织中ZEB1与LOXL2的表达水平,并进行比较。分析癌组织ZEB1与LOXL2的表达与患者临床病理参数的关系。采用Kaplan-Meier生存曲线评估预后。结果 ZEB1、LOXL2在结直肠癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(P均<0.05)。结直肠癌组织中,ZEB1及LOXL2的阳性表达率与TNM分期、浸润程度、淋巴结转移相关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤组织分化程度无关(P均>0.05),且ZEB1与LOXL2的表达呈正相关(r=0.348,P=0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果表明,ZEB1及LOXL2表达阴性的患者术后生存率和平均生存时间均高于ZEB1及LOXL2表达阳性的患者(P均<0.05)。结论 ZEB1与LOXL2在结直肠癌组织中异常高表达,且参与病情进展及促进不良预后。

赖氨酰氧化酶样蛋白1在癌症中作用机制的研究进展

癌症是导致人类死亡的主要原因之一,也是提高人类预期寿命的重要障碍。癌症的有效筛查、早期诊断、早期治疗一直以来是临床的难点,鉴定新的生物标志物或分子靶标以改善癌症患者的诊断和治疗情况刻不容缓。赖氨酰氧化酶样蛋白1(lysyl oxidase like 1,LOXL1)作为一种分泌型的铜依赖性胺氧化酶,在多种类型细胞中广泛存在。LOXL1可以维持弹性蛋白的稳态,参与细胞外基质的重塑,在机体发育、组织损伤、纤维化疾病和癌症的发展过程中发挥重要作用。LOXL1生物学功能广泛,其功能异常是许多临床疾病发生的基础。研究表明,LOXL1蛋白在人类肾细胞癌、膀胱癌和结直肠癌中表达下调并抑制肿瘤的生长,而在人类涎腺腺样囊性癌、肾细胞癌、肺腺癌、胸膜间皮瘤、脑胶质瘤和胃癌中表达上调,提示LOXL1蛋白在不同类型的癌症中具有抑癌或促癌的双向作用。本文主要综述LOXL1蛋白的结构、功能及其与癌症发生发展的关系,进一步探讨LOXL1蛋白在癌症研究中的应用前景,为癌症的临床诊断与治疗提供理论基础和参考依据。

血清lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p水平对急性心肌梗死后心律失常的预测价值

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)赖氨酰氧化酶样1-反义RNA1(LOXL1-AS1)、微小RNA(miR)-3614-5p在急性心肌梗死患者血清中的表达水平,以及对心律失常的预测价值。方法选择2021年1月—2023年1月西安交通大学第一附属医院心内科住院治疗急性心肌梗死患者148例作为研究对象(急性心肌梗死组),根据患者是否发生心律失常,分为非心律失常亚组(n=96)和心律失常亚组(n=52),另选取同期与急性心肌梗死患者一般资料相匹配的健康体检者148例为健康对照组。比较各组血清lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p水平;多因素Logistic回归分析急性心肌梗死后心律失常的影响因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积(AUC)分析血清lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p水平对急性心肌梗死后心律失常的预测价值。结果与健康对照组比较,急性心肌梗死组lncRNA LOXL1-AS1水平升高,miR-3614-5p水平降低(t/P=16.248/<0.001、8.397/<0.001);心律失常亚组病变血管支数、lncRNA LOXL1-AS1水平高于非心律失常亚组,左心室射血分数(LVEF)、miR-3614-5p水平低于非心律失常亚组[χ^(2)(t)/P=14.315/<0.001、7.312/<0.001、3.706/<0.001、7.656/<0.001];Target Scan Human网站预测结果显示,lncRNA LOXL1-AS1与miR-3614-5p有结合位点,可能存在靶向关系;多因素Logistic回归分析结果显示,lncRNA LOXL1-AS1高、病变血管支数多是急性心肌梗死后心律失常的危险因素,miR-3614-5p、LVEF高是保护因素[OR(95%CI)=3.542(1.589~7.896)、1.527(1.081~2.156)、0.721(0.601~0.865)、0.789(0.664~0.938)];lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p及二者联合预测急性心肌梗死后心律失常的AUC为0.820、0.890、0.932,二者联合优于各自单独预测(Z/P=3.470/0.001、2.293/0.022)。结论急性心肌梗死后心律失常患者血清lncRNA LOXL1-AS1水平显著升高,miR-3614-5p水平显著降低,两者联合对急性心肌梗死后心律失常有较好的预测价值。

骨肉瘤患者癌组织中AHA1 mRNA和LOXL2 mRNA表达与侵袭转移基因mRNA表达的相关性及临床意义

目的研究骨肉瘤(osteosarcoma)患者癌组织中热休克蛋白90 ATP酶激活因子1(the activator of HSP90 ATPase-1,AHA1)和赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase like-2 protein,LOXL2)表达与侵袭转移基因mRNA表达的相关性及临床意义。方法选取2016年2月~2017年3月华北医疗健康集团峰峰总医院诊治的90例骨肉瘤患者为研究对象。应用实时荧光定量PCR检测组织中AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA及侵袭转移基因Wnt家族成员9A(Wnt9a)mRNA,锌指E盒结合同源盒1(Zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)mRNA,锌指E盒结合同源盒2(ZEB2)mRNA,N-钙黏素(N-cad)mRNA和波形蛋白(Vim)mRNA表达。采用Pearson相关分析,比较不同临床特征骨肉瘤患者AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA表达差异。Kaplan-Meier生存分析影响AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA表达对骨肉瘤患者预后的影响。单因素及多因素COX回归分析影响骨肉瘤患者预后的因素。结果骨肉瘤组织中AHA1 mRNA(3.16±0.59),LOXL2 mRNA(2.84±0.44)及侵袭转移基因Wnt9a mRNA(3.23±0.42),ZEB1 mRNA(2.73±0.39),ZEB2 mRNA(2.52±0.56),N-cad mRNA(2.71±0.65),Vim mRNA(2.81±0.73)表达均高于癌旁组织(1.10±0.21,0.95±0.18,0.79±0.15,0.64±0.11,0.98±0.19,0.68±0.14,0.72±0.15),差异具有统计学意义(t=31.206,37.716,51.903,48.931,24.706,28.964,26.605,均P<0.05)。骨肉瘤组织中AHA1 mRNA与LOXL2 mRNA表达呈显著正相关(r=0.712,P<0.05)。骨肉瘤组织中AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA与侵袭转移基因Wnt9a mRNA,ZEB1 mRNA,ZEB2 mRNA,N-cad mRNA,Vim mRNA表达呈显著正相关(r=0.504~0.720,均P<0.05)。Eneeking分期Ⅲ期、有软组织浸润和有肺转移骨肉瘤组织中AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA表达高于Eneeking分期Ⅰ~Ⅱ期、无软组织浸润和无肺转移患者,差异具有统计学意义(t=14.122~171.054,均P<0.05)。AHA1 mRNA高表达组和低表达组患者五年生存率分别为36.36%(16/44),78.26%(36/46)。AHA1 mRNA高表达组患者五年累积生存率明显低于低表达组,差异有统计学意义(Log-rankχ^(2)=16.081,P<0.05)。LOXL2 mRNA高表达组和低表达组患者五年生存率分别为34.88%(15/43),78.72%(37/47)。LOXL2 mRNA高表达组患者五年累积生存率明显低于低表达组,差异有统计学意义(Log-rankχ^(2)=15.880,P<0.05)。肺转移(OR=1.921,P<0.05),Eneeking分期Ⅲ期(OR=1.906,P<0.05),AHA1 mRNA高表达(OR=1.405,P<0.05),LOXL2 mRNA高表达(OR=1.733,P<0.05)是影响骨肉瘤患者不良生存预后的独立危险因素。结论骨肉瘤组织中AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA表达升高,两者表达与侵袭转移基因表达有关,是影响骨肉瘤患者不良生存预后的独立危险因素。

赖氨酰氧化酶与乳腺癌侵袭转移相关因子的研究

目的探讨赖氨酰氧化酶(LOX)与乳腺癌侵袭转移相关因子基质金属蛋白酶(MMPs)及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的相关性以及LOX在乳腺癌侵袭转移中的可能机制。方法构建LOX基因的特异性慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV),稳定转染至乳腺癌细胞MDA-MB-231,实验设空白组、干扰组和阴性对照组,实时定量荧光PCR检测3组细胞中LOX、MMP-2、MMP-9和HIF-1α的表达,Western blot检测各组LOX蛋白的表达;构建乳腺癌细胞MDA-MB-231,MCF-7和LOX基因干扰的MDA-MB-231裸鼠移植瘤模型,6周后测定移植肿瘤的生长及转移情况,SP免疫组织化学技术检测移植瘤中LOX、MMP-2、MMP-9及HIF-1α蛋白的表达情况。结果转染LOX-RNAi-LV后乳腺癌细胞MDA-MB-231中的LOX mRNA和蛋白被明显抑制,抑制率为89.20%和82.97%,差异有统计学意义(P<0.05);干扰组的MMP-2、MMP-9及HIF-1α表达与阴性对照组及空白组比较差异有统计学意义(P<0.05);6周后裸鼠的MDA-MB-231组LOX、MMP-2、MMP-9及HIF-1α蛋白表达水平明显高于LOX基因干扰组及MCF-7组,相关分析显示,LOX蛋白与MMP-2(r=0.696,P=0.000)、MMP-9(r=0.735,P=0.000)、HIF-1α(r=0.737,P=0.000)蛋白呈显著正相关。结论 LOX-RNAi-LV可有效下调乳腺癌细胞MDA-MB-231中LOX mRNA和蛋白表达水平;LOX促进乳腺癌侵袭转移的机制可能与MMP-2、MMP-9及HIF-1α的异常表达相关。

血清lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1与上皮性卵巢癌患者临床病理特征、血清细胞凋亡分子和预后不良的关系研究

目的 探讨血清长链非编码核糖核酸(lncRNA)中的赖氨酰氧化酶样1(LOXL1-AS1)、肺腺癌转移性相关转录本1(MALAT1)与上皮性卵巢癌(EOC)患者临床病理特征、血清细胞凋亡分子和预后不良的关系。方法 选取2017年1月至2020年1月该院收治的EOC患者68例作为EOC组,另选取70例卵巢良性肿瘤患者作为良性组,选取同期体检健康者60例作为对照组;对比3组患者血清中lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1表达水平,以lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平中位值(1.90、1.38)分别将EOC患者分为lncRNA LOXL1-AS1低表达组(34例)和lncRNA LOXL1-AS1高表达组(34例),以及lncRNA MALAT1低表达组(33例)和lncRNA MALAT1高表达组(35例),对比EOC患者各表达组的临床病理特征、血清细胞凋亡分子[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、生存素(Survivin)、B细胞CLI/淋巴瘤2关联凋亡基因1(Bag-1)]水平,并采用Pearson相关性分析法探讨其相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析EOC患者各表达组的预后差异,多因素Cox分析EOC患者的预后不良的影响因素。结果 3组血清lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1、Bcl-2、Survivin、Bag-1水平从高到低依次为EOC组、良性组、对照组(P<0.05);血清Bax水平从低到高依次为EOC组、良性组、对照组(P<0.05)。不同年龄和病理类型的EOC患者lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05),不同国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移、组织分期的EOC患者lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1高表达组Bcl-2、Survivin、Bag-1水平均高于lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1低表达组,Bax水平低于lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1低表达组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1表达水平均与Bcl-2、Survivin、Bag-1均呈正相关(P<0.05),与Bax呈负相关(P<0.05)。随访2年后,lncRNA LOXL1-AS1低表达组累积生存率为85.29%,高于lncRNA LOXL1-AS1高表达组的55.88%,lncRNA MALAT1低表达组累积生存率为81.82%,高于lncRNA MALAT1高表达组的60.00%(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,淋巴结转移、lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1高表达是EOC患者预后不良的独立影响因素(P<0.05)。结论 EOC患者血清lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1水平呈高表达,且与淋巴结转移、FIGO分期、组织分期、凋亡因子表达及预后相关,其表达水平升高提示患者有EOC的可能,且其预后较差,检测血清lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1水平可能对EOC的诊断及治疗具有重要意义。

赖氨酰氧化酶样蛋白4在肾间质纤维化中的表达及意义

目的赖氨酰氧化酶样蛋白4(lysyl oxidase-like protein 4, LOXL4)是赖氨酰氧化酶(lysyloxidase, LOX)家族的最新成员,本研究旨在观察LOXL4在肾脏纤维化形成中的表达及意义。方法收集慢性肾脏病患者的肾活检标本,单侧输尿管结扎(unilateral ureteral ligation, UUO)大鼠;TGF-β1刺激大鼠肾成纤维细胞(NRK-49F)。通过q-PCR,Western印迹法和/或免疫组化等方法检测LOXL4的表达及作用。结果患者肾脏纤维化组织中LOXL4沉积显著高于正常肾组织(P<0.01);与Sham组相比,UUO组大鼠肾脏LOXL4、Col1(collgen 1)表达水平明显升高(P<0.01);TGF-β1显著促进LOXL4、Col1的表达(P<0.01);转染LOXL4过表达质粒后,NRK-49F胶原表达水平明显增多(P<0.01);下调LOXL4后,胶原表达水平明显下降(P<0.01)。结论在肾间质纤维化中LOXL4表达明显增加,其通过调控胶原纤维的表达而参与肾脏纤维化。

盆腔器官脱垂患者盆底结缔组织中Fibulin-5和LOXL1的表达及意义

目的:探讨盆底结缔组织中弹性纤维相关基因Fibulin-5和类赖氨酰氧化酶1(LOXL1)的表达与盆腔器官脱垂(POP)发生的关系。方法:用Real-time RT-PCR检测24例POP患者(POP组)和22例因妇科良性疾病行子宫全切术患者(对照组)的骶韧带和(或)阴道前壁组织Fibulin-5及LOXL1的mRNA表达水平;同时采用免疫组化ElivisionTM Plus两步法检测其蛋白的表达。结果:①POP组患者骶韧带和阴道前壁组织中Fibulin-5 mRNA的表达明显低于对照组,而LOXL1 mRNA的表达明显高于对照组(P<0.05);且POPⅡ、Ⅲ期患者骶韧带组织中Fibulin-5 mRNA的表达量均数随POP程度加重而降低,LOXL1 mRNA的表达量均数随POP程度加重而增加(P<0.05)。②Fibulin-5蛋白的表达主要定位于细胞外基质,LOXL1蛋白的表达主要定位于成纤维细胞和平滑肌细胞胞质中。POP组骶韧带及阴道前壁组织中Fibulin-5蛋白的阳性表达率低于对照组(P<0.05),而LOXL1蛋白的阳性表达率高于对照组(P<0.05)。结论:POP患者盆底结缔组织中Fibulin-5 mRNA和蛋白的表达降低,LOXL1 mRNA和蛋白的表达升高,且变化的程度均与脱垂程度有关。两者可能通过影响弹性纤维的聚合过程,促进POP的发病。

LOXL2在胃癌组织中表达及其与PCNA、CyclinD1、MMP-2、MMP-9的关系

目的观察在胃癌组织中赖氨酰氧化酶(LOXL)2的表达变化,探讨其与增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期素(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及预后的关系。方法应用免疫组化法检测100例胃癌组织及相应癌旁正常胃组织中的LOXL2、PCNA、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达,分析其在胃癌组织中表达与LOXL2的相关性。结果胃癌组织与癌旁正常胃组织相比,LOXL2、PCNA、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白的水平明显增高(P<0.05);在胃癌组织中LOXL2、PCNA、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白阳性表达与肿瘤侵犯深度、淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05),而与肿瘤大小、肿瘤分化程度及患者年龄无关(P>0.05);经Kaplan-Meier生存分析得出结果,胃癌患者中LOXL2蛋白表达阳性者的生存率均明显低于阴性者(P<0.01);经相关性分析发现,LOXL2与PCNA、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达具有正相关性(r=0.279,0.287,0.402,0.453;均P<0.01)。结论在胃癌组织中LOXL2高表达,可能与PCNA、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9具有协同促进作用,提高了胃癌发生发展、侵袭转移概率,可能是影响预后的危险因素。

剥脱综合征与LOXL1基因多态性相关性的meta分析

目的：研究类赖氨酰氧化酶1（LOXL1）基因多态性与剥脱综合征（XFS）和剥脱综合征性青光眼（XFG）的关系。方法：以LOXL1、多态性和XFS／XFG为关键词进行meta分析，在PubMed和Embase检索2013年5月前发表的相关文献，应用随机效应模式和固定效应模式研究LOXL1基因多态性（rsl048661、rs2165241和rs3825942）与XFS／XFG发病风险的优势比（OR）和95％可信区间。结果：在高加索人群中LOXL1基因多态性（rs1048661、rs2165241和rs3825942）同XFS／XFG的发生呈正相关，OR值分别是2．19（1．96～2．45）、8．80（6．05～12．79）和3．41（3．11～3．73）。而在亚洲人群中，LOXL1基因多态性（rs1048661和rs2165241）同XFS／XFG的发生呈负相关，OR值分别是0．06（0．02～0．18）和0．15（0．09～0．25）。结论：LOXL1基因多态性同XFS／XFG发生密切相关，但各种群之间相关性有所不同。