酪氨酸激酶抑制剂调控宿主抗结核作用的研究进展

尽管现有的抗结核治疗方案在药物敏感结核病患者的治疗中取得了显著成效,但是药物毒性及耐药菌株的问题日益突出。因此,研究者们开始寻找新的药物和治疗策略,以期更好地治疗结核病。宿主导向治疗(host-directed therapy,HDT)可利用小分子化合物调节宿主的免疫反应,进而保护组织并清除病原体。HDT的主要目的是增强宿主的抗结核免疫功能,同时缩短传统抗生素治疗的时间,提高治疗效果,被视为治疗结核病的一种有前景的方法。酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)主要参与激活细胞信号转导,从而调节细胞生长、增殖、死亡等一系列生理生化过程。酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)是一种新型抗癌药物,在多种恶性肿瘤中可靶向过表达细胞通路,也可通过诱导自噬并激活其他信号通路发挥抗肿瘤活性。研究发现,TKI也可以在巨噬细胞中调节信号转导过程,降低胞内结核分枝杆菌的载量,具有巨大的治疗潜力。因此,TKI可作为HDT的潜在候选药物,应用于临床辅助治疗结核病。笔者将从PTK及信号转导入手,针对潜在的HDT治疗结核病的靶向药物研究进行综述,旨在为HDT疗法更好地应用于现有药物及研发新药,从而辅助治疗结核病提供参考。

新型4-苯胺基喹唑啉类酪氨酸激酶抑制剂的抗肿瘤活性研究

目的对合成的新型4-苯胺基喹唑啉类酪氨酸激酶抑制剂TYIG1~TYIG9进行抗肿瘤活性研究,为寻找具有靶向抗肿瘤活性的候选化合物提供依据。方法采用均相时间分辨荧光（HTRF）法对化合物进行EGFR、VEGFR-2两个靶点的体外活性筛选;采用MTS法对化合物进行肿瘤细胞（A431、A549、H1975、MDA-MB-231）增殖抑制的体外活性评价;采用人肺癌H1975细胞的移植瘤裸鼠模型评价其在动物体内抗肿瘤活性。结果采用HTRF法从合成的一系列化合物中筛选出化合物TYIG4~TYIG9对EGFR、VEGFR-2激酶的活性较好。MTS法检测得到这6个化合物对4种肿瘤细胞（A431、A549、H1975、MDA-MB-231）均有不同程度的抑制作用,其中TYIG6的增殖抑制作用的选择性更为突出;体内试验结果表明TYIG6能够剂量相关性地抑制肿瘤生长,50、100 mg/kg TYIG6对H1975的相对肿瘤抑制率分别为42.59%、34.92%。结论 TYIG6具有良好的体内外抗肿瘤活性,具有成为新型双靶点酪氨酸激酶抑制剂的潜能,有进一步的研究价值。

白种人蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22基因1858C/T多态性与类风湿关节炎易感性的meta分析

目的：探讨蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22（PTPN22）基因1858C／T多态性与类风湿关节炎（RA）易感性的关系。方法：检索中国生物医学文献数据库、万方医学数据库、PubMed数据库，收集有关PTPN22 1858C／T多态性与RA易感性相关的研究报告，运用meta分析方法计算不同遗传模型下的比值比（OR）值及其95％可信区间（CI）。同时进行异质性分析、亚组分析和发表偏倚检验。结果：有32篇文献纳入meta分析（40个病例对照），包括25059例RA患者和25466例对照，选入文献无发表偏倚性。meta分析结果显示：P11PN22 1858C／T多态与RA发生相关（OR=1．606，95CI％=1．518～1．699，P〈0．001）。分层分析显示，1858C／T多态是白种人罹患RA风险等位（OR=1．612，95％CI=1．544—1．683，P〈0．001），而在亚裔人群中该位点未发生突变（或者突变频率极低）。PTPN22 1858C／T多态与类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸肽抗体（ACCP）有相关性。结论：PTPN22 1858C／T多态的T等位是白种人的风险等位，RF、ACCP均阳性的RA患者携带1858T等位的概率大于RF、ACCP均阴性的RA患者。

酪氨酸激酶类癌基因与胚胎发育和着床的关系

蛋白酪氨酸激酶(proteintyrosinekinases,PTKs)类癌基因在胚胎和妊娠期的子宫内膜有不同的表达。其表达产物通过受体或非受体酪氨酸激酶的活性,参与信号传导,在胚胎发育和着床过程中发挥作用。PTKs可受类固醇激素、生长因子、胚胎本身和一些化学因子的调控。对PTKs类癌基因在胚胎和妊娠期子宫内膜的不同表达的研究,可为不孕症的防治和辅助生殖技术提供理论基础。

酪氨酸酶转运对黑色素生成影响研究进展

哺乳动物毛色的形成依赖于黑色素细胞中黑色素数量及分布比例,酪氨酸酶类(TYR/TYRP1)的转运及其活性是黑色素合成的关键。衔接蛋白(AP-1/3)和溶酶体相关细胞器生物合成复合物(BLOC-1,2,3)将TYR/TYRP1从早期核内体转运至黑素小体,若TYR/TYRP1无法转运至黑素小体中,黑色素合成则会受到抑制。ATP7A将铜离子转移到TYR/TYRP1,从而激活TYR/TYRP1活性,ATP7A的减少同样会使黑色素细胞中黑色素合成量减少。关注这些复合物在转运TYR/TYRP1的作用及影响其活性的因素,可以从不同的角度解析黑色素合成机理,以此为基础探索哺乳动物毛色的淡化机制,以期为阐明人类黑色素合成障碍的相关疾病提供理论依据。

脑卒中后抑郁大鼠丘脑脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B蛋白的表达变化

目的探讨脑卒中后抑郁(PSD)大鼠丘脑脑源性神经营养因子(BDNF)及其高亲和力受体酪氨酸激酶受体B(TrkB)蛋白的表达变化,及其在PSD发病机制中的作用和意义。方法选择成年SD大鼠24只,随机分为对照组、抑郁组、脑卒中组和模型组,每组6只。利用线栓法建立局灶性脑缺血大鼠模型,加以慢性不可预见的中等应激刺激和孤养方法造成PSD动物模型,应用免疫组织化学方法检测各组大鼠造模后第29天丘脑BDNF和TrkB免疫阳性细胞数的表达变化。结果模型组BDNF阳性细胞表达较对照组和抑郁组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);模型组TrkB阳性细胞表达较对照组、脑卒中组和抑郁组明显减少,差异有统计学意义[(9.00±2.12)个vs(41.22±11.91)个、(17.22±5.76)个和(33.67±8.32)个,P<0.01]。结论 PSD大鼠丘脑BDNF及其高亲和力受体TrkB蛋白表达减少可能与PSD发病机制有相关性。

以c-met为靶点的酪氨酸激酶抑制剂的研究进展

c-met作为受体酪氨酸激酶,与肿瘤的发生、发展及转移密切相关,c-met激酶是治疗肿瘤的重要靶点。本文主要综述了c-met激酶的作用机制及近年来报道的一系列不同类型的c-met激酶抑制剂,并详细阐述了小分子c-met激酶抑制剂的构效关系。

大肠癌组织中酪氨酸激酶受体RON的表达及意义

目的:研究酪氨酸激酶受体RON在大肠癌组织中的表达情况。方法:收集大肠癌标本69例,大肠腺瘤15例,正常大肠黏膜15例,采用免疫组织化学技术检测组织中RON的表达。结果:大肠癌、大肠腺瘤组织中RON的表达明显高于正常大肠黏膜组织(P<0.05);RON的表达强度与大肠癌病理分期、淋巴结转移及肿瘤浸润深度相关(P<0.05)。结论:RON是一个能有效反映大肠癌发生发展的生物学指标。

吸烟对表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌疗效的影响研究

目的探讨吸烟对表皮生长因子(EGFR)-酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)疗效的影响。方法选取2012年1月—2014年1月天津医科大学总医院肿瘤科接受EGFR-TKI治疗的60例晚期NSCLC患者,给予厄洛替尼或吉非替尼治疗,根据不同吸烟状态分为吸烟组22例和非吸烟组38例。比较不同临床特征NSCLC患者吸烟率,两组临床疗效,Kaplan-Meier生存分析比较两组肿瘤进展时间(TTP)和总生存期(OS)。结果不同性别NSCLC患者吸烟率比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、组织学类型、TNM分期、功能状态(PS)评分、化疗类型NSCLC患者吸烟率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。吸烟组部分缓解1例、疾病稳定11例、疾病进展10例,非吸烟组分别为4例、27例、7例,两组临床疗效比较,差异有统计学意义(u=2.192,P=0.029)。吸烟组中位TTP为12个月,非吸烟组中位TTP为18个月,两组间差异有统计学意义(χ2=5.459,P=0.021)。吸烟组中位OS为15个月,非吸烟组中位OS为24个月,两组间差异无统计学意义(χ2=2.459,P=0.104)。结论 EGFR-TKI治疗晚期非吸烟NSCLC患者较吸烟患者更有效,且非吸烟患者无进展生存时间可能长于吸烟者。

针刺介入时机对脑梗死大鼠能量代谢和脑源性神经生长因子、酪氨酸激酶受体B的影响

目的研究针刺介入时机对脑梗死大鼠能量代谢和脑源性神经生长因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(TrKB)的影响,探讨针刺治疗脑梗死的机制及介入时机。方法采用线栓法制备大鼠局灶性永久性脑缺血模型,分为假手术组、模型组、2 h针刺组、3 d针刺组和7 d针刺组5组,在术后1、3、7、14 d,4个时间点分别测定大鼠缺血脑组织钠,钾-三磷酸腺苷酶(Na+,K+-ATP酶)、钙,镁-三磷酸腺苷酶(Ca2+,Mg2+-ATP酶)活性和BDNF、TrKB阳性神经细胞数。结果脑梗死后大鼠脑组织的Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性急剧下降,1 d时最低,随着时间的延长出现先升再降的变化。针刺组的ATP酶活性在不同时间点较模型组均有不同程度升高(均P<0.01),2 h组高于3 d和7 d组(P<0.01,P<0.05)。脑梗死后大鼠脑组织中的BDNF,TrKB阳性神经细胞数随着时间延长逐渐增多,各时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。针刺各组的BDNF、TrKB阳性神经细胞数随着时间的延长逐渐增多,各时间点之间比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。2 h针刺组的BDNF、TrKB阳性细胞数比3 d、7 d针刺组的增多更显著,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论针刺可显著改善缺血脑组织的能量代谢,增加缺血脑组织的BDNF,TrKB阳性神经细胞数量,对脑梗死引起的缺血性脑损伤起修复和保护作用,在脑梗死后越早进行针刺治疗疗效越好。

酪氨酸激酶2基因多态性与汉族人群急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的关联研究

目的探讨酪氨酸激酶2(TYK2)基因多态性与急性一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)之间的关联。方法选择2006年10月—2010年10月豫北地区汉族DEACMP患者109例,急性一氧化碳中毒(ACMP)未发生迟发脑病患者115例,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术,检测TYK2的rs10876994和rs34536443位点,分析基因多态性与疾病的关联性,评估长谷川痴呆量表(HDS)、常识-记忆-注意测验(IMCT)、日常生活能力量表(ADL)。结果 rs34536443位点无多态性。DEACMP组和ACMP组rs10876994位点基因型分布为AA:20.2%和19.1%,AC:47.7%和40.9%,CC:32.1%和40.0%;等位基因频率为A:44.0%和39.6%,C:56.0%和60.4%,差异均无统计学意义(P>0.05)。按性别分层后,差异仍无统计学意义(P>0.05)。rs10876994位点不同基因型携带者在病情最严重时的IMCT〔AA:(3.09±1.19)分,AC:(2.42±1.04)分,CC:(1.91±0.85)分〕和ADL〔AA:(59.09±3.34)分,AC:(61.88±2.07)分,CC:(62.40±1.68)分〕评分比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论尚未发现rs34536443和rs10876994基因多态性与DEACMP关联的证据,暂不支持TYK2基因作为DEACMP的遗传易患基因。

酪氨酸激酶受体Tie2在不同肿瘤中的表达及其意义

目的 :探讨Tie2在不同肿瘤细胞中的表达及其意义。方法 :用RT -PCR、Westernblot以及免疫组化方法检测了 8种人肿瘤细胞株中Tie2在mRNA和蛋白水平上的表达。结果 :Hela、SPCA1、74 0 2和U2OS细胞中Tie2有不同程度的表达。结论 :Tie2不仅在血管内皮细胞中表达 ,在一些肿瘤细胞中也有表达。Tie2可作为某些肿瘤的标志 ,有助于肿瘤的诊断并为肿瘤的治疗提供新的潜在靶点。

肝细胞生长因子/酪氨酸蛋白激酶MET 信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性分析

目的探讨分析肝细胞生长因子(HGF)/酪氨酸蛋白激酶MET(c-met)信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性。方法选择2018年3月至2019年3月承德医学院附属医院临床术后经病理证实的乳腺癌标本75例、乳腺纤维腺瘤标本60例以及癌旁正常乳腺组织标本50例。采用SP免疫组化法以及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组织标本HGF、c-met、β连环素(β-catenin)蛋白表达和mRNA表达情况。结果HGF[82.67%(62/75)比48.33%(29/60)比14.00%(7/50)]、c-met[86.67%(65/75)比55.00%(33/60)比20.00%(10/50)]、β-catenin[78.67%(59/75)比41.67%(25/60)比6.00%(3/50)]在乳腺癌组织、乳腺纤维腺瘤组织以及癌旁正常乳腺组织中的表达均差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中HGF、c-met mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05),其中乳腺癌相对表达量最高、乳腺纤维腺瘤相对表达量次之;而乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中β-catenin mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。HGF表达阳性率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小、ER表达、HER-2表达有关(P<0.05)。c-met蛋白表达阳性率与病人肿瘤TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。β-catenin蛋白表达异常率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小密切相关(P<0.05)。结论乳腺癌组织中HGF、c-met蛋白高表达而β-catenin蛋白异常表达,且HGF/c-met信号通路及β-catenin蛋白与乳腺癌侵袭转移密切相关。

姜黄素衍生物对K562细胞酪氨酸激酶活性的影响

目的研究姜黄素(Cur)衍生物对K562细胞酪氨酸酶激活性的影响,从中筛选酪氨酸激酶(PTKs)抑制剂。方法以PGT[聚谷氨酸钠∶酪氨酸(4∶1)]为激酶反应底物包被96孔酶标板,以磷酸化酪氨酸特异性单克隆抗体为第一抗体,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测反应体系中加入的K562细胞裂解液PTKs对反应底物PGT的酪氨酸残基磷酸化的程度,以此测定K562细胞裂解液中的PTKs活性。在此反应体系中加入不同浓度的Cur衍生物,观察对PTKs活性的影响。结果对Cur衍生物进行筛选,得到4种PTKs抑制剂,分别为Cur衍生物FM0815、FM0817、FM0822及FM0824。4个Cur衍生物对PTKs活性的抑制均明显强于Cur,且呈量效、时效关系。结论 Cur衍生物FM0815、FM0817、FM0822及FM0824具有显著的PTKs活性抑制作用。

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2研究进展

SHP-2作为一种蛋白酪氨酸磷酸酶,包含2个SH2结构域,由PTPN11基因编码,参与多种细胞信号转导通路。其突变与不同类型的白血病及实体瘤的发生关系密切。研究SHP-2的作用机制可能会对临床抗肿瘤治疗带来新的希望。

表观扩散系数在非小细胞肺癌酪氨酸激酶抑制剂治疗效果评价中的应用

目的研究扩散加权成像(DWI)技术中表观扩散系数(ADC)值在非小细胞肺癌(NSCLC)应用酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗效果评估中的价值。资料与方法前瞻性收集2014年5月-2015年12月经病理证实的19例拟接受TKI的晚期NSCLC患者,于靶向治疗前、治疗1周后以及治疗4周后进行3次CT及MRI扫描,比较不同时间点肿瘤长径、平均ADC值的变化;分析不同时间点肿瘤平均ADC值与肿瘤最大径及最大径变化率的相关性;比较有效组及无效组各个时间点ADC值组内及组间差异。用Bland-Altman分析法分析操作的可重复性。结果治疗1周后ADC值较治疗前显著增加(t=-6.329,P<0.05),而治疗1周后肿瘤最大径与治疗前差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前相比,治疗4周后ADC值明显升高(t=-4.878,P<0.05),肿瘤最大径与治疗前差异有统计学意义(t=7.054,P<0.05)。靶向治疗前肿瘤ADC值与治疗4周后的最大径变化率呈负相关(r^2=-0.474,P<0.05)。有效组内靶向治疗前与治疗1周后ADC值差异有统计学意义(P<0.05),治疗4周后有效组与无效组间ADC值差异有统计学意义(P<0.05)。Bland-Altman分析显示操作者间可重复性好。结论靶向治疗1周后的ADC值能较肿瘤最大径更敏感地反映肿瘤治疗后的改变,并且治疗前的ADC值在预测靶向治疗4周后的最大径变化趋势方面有一定的价值,具有可重复性。

肺腺癌患者表皮生长因子受体酪氨酸激酶结构域突变与放射敏感性的关系

【目的】探讨肺腺癌患者表皮生长因子受体酪氨酸激酶结构域（EGFR-TKD）突变与放射敏感性的关系。【方法】将36例肺腺癌并 EGFR-TKD突变者列为观察组，24例无突变者列为对照组。对两组患者肺部原发病灶均采用三维适形放射治疗，放疗结束后1个月复查胸部 CT评价近期疗效。【结果】全部患者均顺利完成治疗，观察组完全缓解（CR）10例，部分缓解（PR）24例，稳定2例，进展0例，近期总有效率（CR＋PR）94．4％。对照组CR 7例，PR 10例，稳定6例，进展1例，近期总有效率70．8％。两组患者近期有效率比较差异有显著性（P＜0．05）。【结论】肺腺癌 EGFR-TKD突变患者的近期放疗效果好，提示 EGFR-TKD突变是预测放射敏感性的重要指标。

Axl受体酪氨酸激酶对肝癌细胞生长的影响及其机制的研究

目的研究受体酪氨酸激酶Axl对肝癌细胞生长的影响及其相关的作用机制。方法体外培养肝癌细胞(hepatom a carcinoma cell,HepG_2),用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰HepG_2细胞的Axl表达,生长曲线法检测干扰前后HepG_2细胞生长情况;Western blot方法检测生长信号通路中Akt、p-Akt的表达水平。结果 HepG_2细胞的Axl经siRNA干扰表达下降后细胞生长受到抑制;Western blot结果显示,干扰后细胞增殖信号通路中主要蛋白p-Akt的表达明显降低。结论 Axl可能通过Akt信号通路影响肝癌细胞的生长。

β淀粉样蛋白对神经干细胞酪氨酸蛋白激酶A表达的影响

目的:观察不同浓度的Aβ1-40对C17.2神经干细胞TrkA表达的影响。方法:分别应用含终浓度为0、20、40、60、80、100nmol/LAβ1-40的培养液孵育C17.2神经干细胞24h,MTT法检测各组细胞活性,Western blot观察各组神经干细胞TrkA表达情况。结果:MTT法检测结果显示各组细胞活性差异不明显;Western blot结果显示终浓度为20、40、60nmol/LAβ1-40组的神经干细胞TrkA表达有不同程度的增加,100nmol/LAβ1-40组细胞TrkA表达较对照组减少,80nmol/LAβ1-40组细胞TrkA表达较对照组差异无统计学意义。结论:Aβ1-40对神经干细胞TrkA表达的影响呈浓度依赖性。

酪氨酸激酶对鼻咽癌细胞成瘤的影响

目的:研究酪氨酸激酶(Etk/BMX)转染对鼻咽癌细胞成瘤的影响。方法:利用脂质体2000将野生型Etk/BMX表达质粒pcDNA3.1-Etk导入Etk/BMX低表达水平的鼻咽癌细胞株sune-1中,建立Etk/BMX稳定高表达细胞株sune-wt,空质粒pcDNA3.1转染细胞作为对照(sune-vector)。流式细胞仪检测其转染效率,然后分别接种于裸鼠,对成瘤率及大小进行比较。结果:成功筛选到持续高表达Etk的sune-wt细胞,流式细胞仪检测Etk表达(75.5±2.34)%。sune-wt较之sune-vector和sune-1成瘤率较高,肿瘤生长较快。结论:Etk/BMX在鼻咽癌中可促进细胞增殖,增加致瘤性。