截短型细胞毒素Gelonin的分子构象和生物活性

为了探索免疫络合物中具杀伤靶细胞的毒素,gelonin的结构与功能的关系,根据化学合成的gelonin基因序列和3维分子构象设计了N端区Gly,Leu,Asp和或C端区Asp,Lys,Asp,Pro,Lys缺失的gelonin.以重组质粒pEgel为模板,在相应引物存在下,用PCR法获得5′端区和或3′端区碱基序列缺失的gelonin基因片段.经克隆、表达和纯化得到3种截短型gelonin(GN3、GC5、GN3C5).CD谱和荧光谱表明,完整型gelonin(GO)与截短型gelonin的分子构象有明显的差异.它们的构象变化与类DNase活性和抑制肿瘤细胞生长的能力均为GO≥GN3>GC5>GN3C5.结果再一次证明了具有α+β型结构蛋白,gelonin的构象与生物活性的一致性.