培养条件对蝙蝠蛾拟青霉菌株SH-1产生粉红色变化的影响

冬虫夏草[Cordyceps sinensis(Ber K.)Sacc.]菌培养过程中,蝙蝠蛾拟青霉菌株SH-1的菌丝产生粉红色变化的现象,粉红菌株与SH-1菌株形态上存在很大差异,为查明产生的原因,在单因素试验基础上考察培养时间、培养温度、光照、p H和装液量对粉红色变化的影响,通过响应面法优化冬虫夏草真菌的培养环境,分析影响粉红色变化的关键因素。结果表明,产生粉红变化的最适培养条件为培养时间80 d、培养温度20.55℃、p H 7.51、装液量250 m L,在此培养基条件下,粉红菌株ZH-1产生概率为35.14%;得出菌株ZH-1的最大得率培养条件为培养时间80 d、培养温度为22.25℃、p H 6.89、装液量250 m L,在此培养基条件下,粉红菌株ZH-1得率为8.95%。

冬虫夏草粉红菌株的分子鉴定

在冬虫夏草真菌培养过程中,菌株SH-1菌丝产生粉红色变化的现象,粉红菌株ZH-1与正常菌株SH形态存在很大差异。菌株SH-1与粉红菌株ZH-1的ITS序列比对鉴定结果表明,11株SH-1和2株ZH-1都能扩增出条带,条带清晰且稳定,分布在500~750 bp范围内,13株菌株在Gen Bank中应用Blast比对都与Paecilomyces sp.Cs-4(EU328187)的相似性达到了100%。用3种方法对13株菌株ITS序列与分离自冬虫夏草的32株真菌ITS序列(下载自Gen Bank)构建系统进化树,3种方法都显示13株菌株与蝙蝠蛾拟青霉分为1支,可以确定粉红菌株ZH-1与正常菌株SH-1为同一个种,即蝙蝠蛾拟青霉。

培养基配方对冬虫夏草菌株产生粉红异变的影响研究

冬虫夏草真菌筛选过程中,蝙蝠蛾拟青霉SH-1的菌丝会逐渐产生粉红色变化,SH-1和粉红菌株ZH-1在形态上存在很大差异,经分子鉴定,两株菌为同一种。为查明产生粉红菌株的原因,最大化粉红菌株的得率,在考察4个培养基配方因素对粉红菌株产生的的单因素试验基础上,通过响应面法中的BBD设计优化冬虫夏草培养基配方,分析影响菌株SH-1产生粉色变化的因素。结果表明:产生ZH-1最适的培养基配方为氮源A(x_1)43.51 mL,K_2HPO_4(x_2)0.6 g、氮源B(x_3)2.56 g、葡萄糖(x_4)5.18 g。在此培养基配方条件下,菌株ZH-1产生概率为37.24%。试验结果表明,培养基配方中氮源A、K_2HPO_4的含量对产生粉红现象有显著影响,氮源A、葡萄糖含量对粉红菌株ZH-1的得率有显著影响。